维生素d受体及维生素d合成酶基因在大鼠生殖系统的表达研究

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1、分类号：Ｑ４５２单位代码：１０７２０密级：公开学号：１４０７１００９０４Ａ＾＾ＳｈａａｎｘｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙｍ硕士学位论文维生素Ｄ受体及维生素Ｄ合成酶基因在大鼠生殖系统的表达研究ＧｅｎｅＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＶｉｔａｍｉｎＤＲｅｃｅｐｔｏｒａｎｄＶｉｔａｍｉｎＤＳｎｔｈｅｔａｓｅｓｉｎＲａｔＲｅｒｏｄｕｃｔｉｖｅｙｐＳｓｔｅｍｙ论文作者：欢指导教师、职称：何琳琳讲师学科、专业名称：理学、细胞生物学研究方向：维生素Ｄ类药物的研发二〇一八年六月分类号：Q452单位代码

2、：10720密级：公开学号：1407100904硕士学位论文维生素D受体及维生素D合成酶基因在大鼠生殖系统的表达研究GeneExpressionofVitaminDReceptorandVitaminDSynthetasesinRatReproductiveSystem论文作者：徐欢指导教师、职称：何琳琳讲师学科、专业名称：理学、细胞生物学研究方向：维生素D类药物的研发二○一八年六月摘要维生素D3（vitaminD3,VD3）在动物和人类生殖中扮演着重要角色。VD3经维生素D代谢酶即维生素D合成酶(CYP27A1、CYP27B1)和降解酶催化可产生一系列代谢产物，其中1α,25(O

3、H)2D3(1,25D3)是VD3在动物体内的活性形式，主要通过结合维生素D受体（vitaminDreceptor,VDR）发挥其生物学作用。相关研究表明，在成年大鼠、小鼠和人雄性和雌性生殖系统有VDR和维生素D合成酶表达。然而，迄今尚缺乏生殖系统发育过程及生育未生育动物生殖器官VDR和维生素D合成酶表达变化规律的研究。本研究以不同生长发育时期和5M生育与未生育的雄性和雌性SD大鼠为研究对象，分析其主要器官的脏器指数，H&E染色检测其生殖器官的组织形态学变化，实时定量PCR（real-timequantitativepolymerasechainreaction,Real-time

4、qPCR）检测其生殖器官VDR和维生素D合成酶CYP27A1、CYP27B1mRNA的表达变化，探讨不同生长发育时期和5M生育与未生育SD大鼠生殖系统各器官VDR和维生素D合成酶mRNA表达变化的规律。进一步分离培养12M和24M睾丸间充质干细胞（mesenchymalstemcells,MSC）并检测其VDR、CYP27A1、CYP27B1mRNA的表达变化。研究结果显示，随着年龄增长，大鼠雄性和雌性生殖系统脏器指数均逐渐上升，衰老后开始下降；大鼠雄性和雌性生殖系统各器官形态随着发育过程进行不断成熟，衰老后形态开始异常；不同生长发育时期及5M生育与未生育雄性和雌性SD大鼠生殖系统

5、各器官有VDR和维生素D合成酶CYP27A1、CYP27B1mRNA的表达且其表达呈现一定的规律；不同生长发育时期及5M生育与未生育雄性和雌性SD大鼠生殖系统各生殖器官在相同发育时期CYP27A1mRNA表达均显著高于CYP27B1mRNA表达，呈极显著性差异；与12M睾丸MSC相比，24M睾丸MSCVDR、CYP27B1、CYP27A1mRNA表达量显著增加。研究结果表明，VD3可能在生殖系统不同生长发育时期各器官及睾丸MSC经维生素D合成酶合成活性VD3并结合在VDR上，从而发挥其生物学作用；活性VD3合成及其生物学作用的发挥对大鼠各生殖器官不同生长发育时期的作用有一定规律性；

6、生殖系统不同生长发育时期各器官及睾丸MSC中CYP27A1催化产物25D3经CYP27B1催化产生活性VD3可能是合成活性VD3主要的限速步骤，限制了活性VD3的产生和其生物学作用的发挥；生育对于雌性和雄性SD大鼠生殖系统各器官活性VD3的产生和其生物学作用的发挥可能有一定影响；24M睾丸MSC活性VD3的产生和其生物学作用强于I12M睾丸MSC。关键词：维生素D3（VD3）；维生素D受体（VDR）；维生素D合成酶；CYP27A1；CYP27B1；睾丸间充质干细胞（MSC）IIAbstractVitaminD3(vitaminD3,VD3)playsanimportantrolei

7、nanimalsandhumanreproduction.VD3canproduceaseriesofmetabolitescatalyzedbyvitaminDsynthetases(CYP27A1andCYP27B1)anddegradationenzyme.1alpha,25(OH)2D3(1,25D3)whichistheactiveformofVD3andplayitsbiologicalrolemainlythroughcombinationofvitam