姜黄素对cik 细胞杀伤胃癌细胞株sgc

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1、姜黄素对CIK细胞杀伤胃癌细胞株SGC：蒋允丽1,费素娟,陈复兴,刘军权，周忠海【摘要】目的探讨姜黄素对细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK细胞)杀伤胃癌细胞株SGC-7901作用的影响及其机制。方法10名健康者外周血单个核细胞(PBMC)在体外经多种细胞因子诱导为CIK细胞;收集培养第5天的CIK细胞，给予不同浓度的姜黄素诱导，37℃、5%CO2条件下继续培养72h，LDH法检测CIK细胞对SGC-7901细胞的杀伤活性;FACS法检测CIK细胞表型CD3+CD8+、CD3+CD56+含量及穿孔素、颗粒酶B水平。结果①姜黄素诱导后，

2、CIK细胞杀伤胃癌SGC-7901的活性明显提高，在10μmol/L时杀伤活性显著高于对照组(P<0.05)。②姜黄素诱导后，CIK细胞内穿孔素和颗粒酶B的水平明显提高(P<0.05)。③姜黄素能够显著增加CIK细胞的CD3+CD56+表达(P<0.05)，降低其CD3+CD8+表达(P<0.05)。结论姜黄素能提高CIK细胞对胃癌细胞株SGC-7901的杀伤活性，其机制可能与其增加CIK细胞穿孔素和颗粒酶含量以及增加CD3+CD56+表达有关。【关键词】姜黄素;CIK细胞;SGC7901胃癌细胞;杀伤活

3、性;穿孔素;颗粒酶B　　Abstract：ObjectiveToinvestigatetheeffectandtheunderlyingmechanismofthecurcumin-inducedcytotoxicityofCIKcellstogastriccancercelllineSGC-7901invitro.MethodsTheperipheralbloodmononuclearcells(PBMC)from10healthyvolunteersinatdifferentconcentrations,folloorcyt

4、otoxicityofCIKcellstocelllineSGC-7901inedbyLDHassay.ThecontentofphenotypesCD3+CD8+andCD3+CD56+ofCIKcells,thelevelsofperforinandgranzymeBorcytotoxicityofCIKcellsexposedtocurcuminonSGC-7901arkedlyelevatedandthecytotoxicityreached62.32%±1.28%ataconcentrationof10μmol/Lcu

5、rcumin,eBofCIKcellsinducedbycurcuminremarkablyincreased(P<0.05).③CurcumincouldevidentlyupregulatetheexpressionofCD3+CD56+ofCIKcells(P<0.05)anddoincanenhancedtheCIKcellcytotoxicitytogastriccancerSGC-7901andthismechanismisinvolvedintheincreaseofperforinandgranzym

6、eBcontentasin;CIKcells;gastriccancercelllineSGC-7901;perforin;granzymeB　　细胞因子诱导的杀伤(cytokineinducedkiller，CIK)细胞是将人外周血单个核细胞在体外经多种细胞因子共同诱导培养而获得的一群异质性细胞，与其他过继性免疫细胞相比，由于其具有增殖能力强、杀瘤活性高、杀瘤谱广、副作用小、对正常骨髓造血影响轻微等优点[1-2]而被广泛应用于肿瘤的过继性细胞免疫治疗[3]。姜黄素(curcumin)是一种从中药姜黄根茎中提取出来的天然化合物，

7、有研究表明，高浓度的姜黄素对树突状细胞(dendriticcell，DC)、γδT有抑制作用[4-5]，但有关姜黄素在CIK细胞作用中的影响鲜见报道，为此，我们试用不同浓度的姜黄素在体外诱导人CIK细胞，观察姜黄素对CIK细胞杀伤活性及其穿孔素、颗粒酶B的影响，以探讨姜黄素对CIK细胞杀伤胃癌细胞株SGC-7901作用的影响及其机制。　　1材料和方法　　1.1材料姜黄素(购自Sigma公司);人胃腺癌细胞株SGC-7901(购自上海细胞生物研究所);胰蛋白酶、RPMI1640(购自Gibco公司);人AB血清(购自徐州市血站);

8、胎牛血清和淋巴细胞分离液(购自中国科学院血液病研究所);IL-2(购自厦门特宝生物公司);FITC标记的鼠抗人CD56(购自BD公司);PE标记的Perforin(穿孔素)、GranB(颗粒酶B)和PE标记的鼠抗人CD3、APC标记的鼠抗人CD8(均购自杭州联科