外源sa对玉米幼苗pb2+胁迫下保护酶活性的影响

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1、外源SA对玉米幼苗Pb2+胁迫下保护酶活性的影响  摘要:在Pb2+胁迫下,添加外源水杨酸(SA)培养的玉米幼苗叶片中过氧化氢酶(CAT)的活性提高,过氧化物酶(POD)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性降低,丙二醛(MDA)的积累减少,显示SA对Pb2+胁迫下玉米幼苗的保护酶具有不同的影响。  关键词:水杨酸;玉米;保护酶;Pb2+  随着工业和现代农业的发展,重金属污染越来越严重。铅是重金属污染中的主要元素之一,它可随着汽车排放的废气及城市污水而污染空气和土壤。铅不是植物生长的必需元素,而是一种对植物有积累性危

2、害的污染物质,当铅在植物体内积累过多时,并会对植物造成毒害作用,如:铅可抑制种子内蛋白酶、淀粉酶等活性受到抑制,直接影响种子内储藏淀粉和蛋白质的分解,从而影响种子萌发所需的物质和能量,致使种子萌发受到抑制;铅胁迫可导致植物体内酶的失活、变性,甚至酶的破坏;铅也可以破坏叶绿素酸醋还原酶的活性从而导致植物的叶绿素含量减少,影响光合作用。铅可通过食物链在人体和动物组织中蓄积,当铅在体内累积过多时会对动物产生毒害作用,如:铅进入人体后,会阻碍血液的合成,导致人体贫血,出现头痛、眩晕、乏力、困倦、便秘和肢体酸痛等症状。  水

3、杨酸(Salicylicacid,简称SA),即邻羟基苯甲酸,是一种植物体内产生的简单酚类化合物,Raskin提出可以把它看成是一种新的植物内源激素,广泛存在于高等植物中。水杨酸在植物的抗病、抗低温、抗旱和抗盐等方面,以及对果实成熟、园艺产品保鲜和种子萌发等方面具有明显的作用,能缓解逆境对植物造成的伤害,增强植物的抗逆性能力,如:植物在盐胁迫条件下水杨酸含量能够显著提高钠离子向下和钾离子向上运输选择性,因此能够提高植物体的抗盐性;水杨酸也可促进植物叶片中木质素含量的增加,导致细胞壁木质化为植物抵抗病原生物的进一步侵

4、染提供了有效的保护屏障等。那水杨酸对玉米幼苗在抗铅毒害中的效应如何呢?本文研究SA对玉米幼苗Pb2+胁迫下的保护酶活性的影响,测定玉米幼苗在铅胁迫下有无水杨酸时玉米幼苗叶片的保护酶――过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性及MDA含量的变化,以此判断水杨酸对玉米幼苗铅胁迫下保护酶活性的影响效应。  1材料与方法  1.1材料与处理  植物材料为玉米晴三。挑选均匀饱满的种子,经0.1%HgCl2消毒10min后,漂洗干净,用蒸馏水在25℃下浸泡12小时后播种到垫有4层经蒸馏水湿润

5、滤纸的带盖磁盘[24cm×16cm]中,于28℃/25℃(昼/夜)下暗萌发60h。萌发期间的12h、24h、36h、和48h用蒸馏水20mL进行浇灌。60小时后开盖培养,用Hoagland营养液100mL间隔12h继续浇灌,待玉米长出两叶一心时选取长势一致的玉米幼苗进行处理。上述玉米幼苗一组用浓度为(0、200mol?L-1)的SA溶液50mL和浓度为(0、100、200、300、400mg?L-1)的醋酸铅溶液50mL混合浇灌,另一组用浓度为(0、100、200、300、400mg?L-1)的醋酸铅溶液100mL

6、浇灌,每隔12h浇灌一次,待玉米长出三叶一心时测定叶片的POD、APX、CAT活性和的MDA含量,以选取玉米幼苗的第二叶片为测定材料。  1.2APX、POD、CAT酶活性和丙二醛(MDA)含量测定  APX的测定:APX可催化AsA与H2O2反应,使AsA氧化成单脱氢抗坏血酸MD-AsA,因此在酶提取液中加入AsA,可测定APX的活性[12]。准确称取玉米叶片0.5g,加入5mL提取液,低温研磨成匀浆,离心(15000r/min,4℃,15min),取3mL上清液稀释至5mL用于酶活性的测定。在290nm处测定O

7、D值,记录OD290变化,以25下℃下1min内OD290变化0.01定义为1个酶活力单位(U),最后以U/g(FW).min表示酶的活性。  POD、CAT的测定:H2O2在240nm波长下有强烈吸收峰,过氧化氢酶能分解过氧化氢,使反应溶液吸光度随反应时间增加而降低。根??测量吸光率的变化速度即可测出过氧化氢酶(CAT)的活性。  在H2O2存在条件下,POD能使愈创木酚氧化,生成茶褐色的4-邻甲氧基苯酚。可用分光光度计测生成物来测定POD的活性。  准确称取玉米叶片0.2g,加入5mLpH为7.8,50mmol

8、/L磷酸缓冲液,低温研磨成匀浆,离心(15000r/min,4℃,15min),上清定容至5mL,用于酶活性的测定。  在240nm处测定CAT酶活力,记录OD240的变化,以25下℃1min内OD240变化0.01定义为1个酶活力单位(U),最后以U/g(FW).min表示酶的活性。  在470nm处测定POD酶活力,记录OD470变化,以25下℃1min

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