兽医临床诊疗技术第2章实验室检验

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1、第2章实验室检验实验室检验就是运用物理学、化学和生物学等实验技术和方法,对病畜的血液、尿液、粪便、体液(如胃液、脑脊髓液、胸腹腔穿刺液)、组织细胞及病理产物,在实验室特定的设备和条件下,测定其物理性状,分析其化学成分,或借助于显微镜观察其有形成分的方法,以获取反映机体功能状态,病理变化或病因等客观资料,配合临床资料进行综合分析。实验室检验是一种复杂而细致的工作,为了得到正确的结果,必须遵守严格的操作规程和次序。采取的样本必须有代表性,检验所用的试剂与器材,应符合要求,并定期进行检查和校正。要注意消毒工作,污染的器皿应先消毒后洗涤,以防传染性物质的扩散。血液

2、检验尿液检验粪便检验瘤胃液的检验穿刺液的检验常见毒物的检验第一节血液检验血液检验是临床医学检验中应用最广,对辅助诊断最有价值,最常用的基本内容之一。血液是由血浆和血细胞两部分组成,是通过循环系统与全身各个组织器官密切联系,参与机体呼吸、运输、防御,调节生理,维持正常新陈代谢和内外环境平衡的。血液全血血浆血清血液学检查血细胞计数分类与形态检查血浆生理和病理检验内分泌激素生化与免疫学检查临床血液学检查内容物理学检查:借助物理学方法测定其物理特性,如凝血时间、红细胞脆性、红细胞沉降率、红细胞压积。化学检验:即用定性或定量的化学分析方法,检测被检标本各种化学成分方

3、面的变化,如血红蛋白的检查。显微镜检查:检查其血细胞的形态及数量的变化,如红细胞,白细胞,血小板等。一、血液的采集与血涂片的制作血液样本的采取与抗凝血液样本的采取采血的部位和方法,根据检验的项目、所需血量和动物种类的不同,可分为毛细血管采血、静脉采血和心脏采血。毛细血管采血法适用于采血量少,血液不加抗凝剂而且直接在现场检验的项目。如涂血片,血红蛋白测定、血细胞计数等。马、牛可在耳尖部,猪,羊,兔等在耳背边缘小静脉,鸡则在冠或肉髯。采血前先剪毛,酒精棉球消毒,待酒精挥发后,用消毒的干燥的针头迅速刺入2-3mm深,让血液自然流出,且勿挤压以免混入过多组织液。流

4、出的第一滴血,可用于制作血片,然后用干棉球擦去局部的剩余血液,用流出的第二滴血液作红、白细胞计数和血红蛋白测定,若利用第三滴血时,仍要将第二滴血擦干,否则流出的血不能形成滴状,不易吸取。静脉采血法马、牛、羊可由颈静脉采血。猪可选用前腔静脉采血;鸡可由翼下静脉采血,即用细针头刺入翼下静脉后,任血液自行流出并接入试管中。犬、猫可于小腿外侧跖背外侧静脉或前臂内侧皮下静脉采血。局部剪毛消毒,用止血带扎住采血部上端,使静脉怒张,用消毒、干燥的注射器接上针头,针头斜上面刺入静脉采血,待抽至所需量后,先放松止血带,再用消毒棉球按住伤口,拔出针头。除去针头,将血液缓缓注入

5、清洁的试管内。需抗凝血液时,试管内加抗凝剂,并立即混匀,以免凝固。心脏采血法多用于兔、鸡及实验动物需多量血液时,鸡可由胸腔入口处向心脏刺入由于心腔压力较静脉高,血液自然涌入注射器,兔及鸡亦可在左侧胸部第1、2肋间,心搏动明显处,针头与胸壁呈垂直方向缓缓刺入。猪的前腔静脉采血马的颈静脉采血兔的耳静脉采血血液的抗凝草酸盐是常用的抗凝剂,每1.5-2.0mg可抗凝1.0ml血液,可用于血液常规检验。因对红细胞大小有影响,故不能用红细胞压积测定,如测定红细胞压积时,可用双草酸盐抗凝剂或乙二胺四乙酸二钠。双草酸盐抗凝剂草酸钾0.8g草酸铵1.2g蒸馏水加至100ml

6、溶解后吸取0.5ml,加入供采血试管或小瓶中,置干燥箱内(温度不超过80℃)烘干备用,可供5ml全血抗凝。血液检验乙二胺四乙酸(EDTA)盐可适用于一般的血液学检查,特别是血小板计数,但因为影响血小板聚集和白细胞吞噬功能,不适合于血象及血小板功能检查。(EDTA-Na2-H2O)每10mg可使5ml全血抗凝;或配成10%的溶液,每2滴可使5ml全血抗凝。(EDTA-K2-2H2O)1%溶液0.1ml可使5ml血液不凝固。全血细胞分析及血细胞比容测定。3.8%枸橼酸钠溶液每1ml可使4ml全血抗凝。常用于血沉、凝血因子和血小板功能检查。因其毒性小又可作为血液

7、保养液。但不适用于血液化学检验。由于抗凝剂溶解缓慢,故只能配成溶液,不能用粉剂。血液检验肝素肝素价格最贵,其优点是抗凝作用强,不影响血细胞的体积,不致溶血等,可用于多种血液生物化学分析和红细胞压积测定。但过量的肝素可引起白细胞聚集和血小板减少,故不适用于白细胞和血小板计数,也不适用于血涂片检查,因其在瑞氏染色时会出现蓝色背景,更不能用于血液学一般检查。肝素是生理性抗凝剂,广泛存在于肺、肝、脾等几乎所有的组织和细胞周围,肥大细胞和嗜碱性粒细胞的颗粒中。它是一种含硫酸基团的黏多糖。抗凝机制较为复杂,主要是加强抗凝血酶Ⅲ灭活丝氨酸蛋白酶的作用,从而阻止凝血酶的形

8、成,并有阻止血小板聚集等多种抗凝作用。通常用肝素粉剂配成1g/L水

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