access免疫化学发光技术介绍

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时间:2018-10-19

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1、ACCESS化学发光系统19901997199619951993199419921991199819992000200220012003免疫分析系统–Access家族系列的创新史“Classic”Access®LXIUniCelDxI800Access®2免疫全系列产品Access2UniCelDxI600UniCelDxI800UniCelDxC600i分析项目UniCelDxC660iUniCelDxC880iUniCelDxC680iUniCelDxC860i一种技术的延续和相同的试剂盒在不同分析平台的使用,确保病人结果的一致性免疫

2、分析检测的浓度关系临床生化10-1210-910-610-310-0pg/mLng/mLmg/mLmg/mLgm/mL免疫分析治疗药物甲状腺激素性激素特殊过敏原肿瘤标志物感染性疾病维他命心脏标志物丰富的分析菜单性激素(12)雌二醇促卵泡生成激素泌乳素促黄体生成激素游离雌三醇总β人绒毛膜促性腺激素孕酮睾酮硫酸脱氢表雄酮抑制素A性激素结合球蛋白PAPP-A*唐氏筛查甲状腺(9)第三代促甲状腺素三碘甲状腺原氨酸游离三碘甲状腺素原氨酸甲状腺素游离甲状腺素甲状腺过氧化物酶抗体抗甲状腺球蛋白抗体甲状腺球蛋白甲状腺摄取肿瘤标志物(8)甲胎蛋白癌胚抗原B

3、R(CA15-3)OV(CA12-5)GI(CA19-9)前列腺特异性抗原游离前列腺特异性抗原ISOFORMSPSA*贫血类(7)维生素B12铁蛋白叶酸红细胞叶酸内因子抗体促红细胞生成素可溶性转铁蛋白受体心血管(4)肌酸激酶同功酶-Mass肌红蛋白肌钙蛋白ⅠBNP骨代谢类(2)全段甲状旁腺激素骨碱性磷酸酶过敏原总IgE生长类人类生长激素糖尿病类胰岛素肾上腺/垂体皮质醇炎症指标白介素-6自身免疫ANA**研发中免疫分析的基本概念免疫分析的基本原理免疫分析是根据抗体与特异性的抗原结合的原理进行定性/定量检测的技术。抗原Y抗体“锁和钥匙”免疫分

4、析检测的发展历程免疫学方法的发展非标记免疫标记免疫标记免疫技术将Ag或Ab用标记物(如荧光素、酶、放射性同位素、化学发光物质等)进行标记,在与标本中的相应Ab或Ag反应后,可以不必测定Ag-Ab复合物本身,而测定复合物中的标记物,通过标记物的放大作用,进一步提高了免疫技术的敏感性。标记免疫分析技术三要素通常在检测系统中会使用到一种叫标记物(labeling)的物质,常标记在抗体上通常会有一个分离(separation)的过程在最后读取信号前需要去仔细关注一下分析的模式(format)免疫分析的经典定义免疫分析是一种通过特异性的抗体与分析物

5、的结合来检测或者定量抗体或抗原的一种分析技术YAntibodyAntigenIgG抗体两条重链和两条轻链分子大小~150,000道尔顿特异性结合位点非特异性结合位点免疫分析的工作定义免疫分析是利用特异性的抗体与底物结合、但不能用简单的化学方法读数和检测的一种分析方法需要通过特异性抗体的标记形成测试系统通常需要在分析检测前进行分离(异相免疫技术)特别注意分析的形式免疫分析的类型均相免疫技术无需分离步骤容易自动化,但不够灵活,具有局限性比浊法–适合含量较高的大分子物质FPIA,EMIT,CEDIA–主要针对小分子分析物,特别是药物检测FPIA

6、:荧光偏振免疫分析EMIT:多聚酶免疫分析技术CEDIA:克隆酶供体免疫分析免疫分析的类型异相免疫分析技术需要分离步骤不容易自动化,但适合多种分析方法和检测手段,较容易灵活控制高度敏感性和特异性反应时间短免疫分析的类型免疫分析-“what”检测手段–化学发光分离技术–磁性微粒子结合方式–灵活多变(竞争法、夹心法)-“how”}检测技术免疫分析检测技术–方法多样需要有一种“标记物”来生成可供检测的能量标记物可能需要或不需要活化需要有适合由该标记物生成的可检测物的侦测器(光电倍增管)分离技术结合方式标记免疫分析技术放射免疫分析酶免疫分析荧光免

7、疫分析化学发光免疫分析标记免疫分析技术放射免疫分析-RIA不稳定的分子衰减过程中释放出射线125I产生γ射线发射器通过γ记数仪进行检测3H产生β射线通过液体闪烁记数仪进行检测放射免疫分析技术优点敏感性高动力学范围宽干扰因素少局限性有害的底物不易自动化γ射线半衰期短Β射线存在废物处理问题标记免疫技术荧光免疫分析技术-FIA原理荧光底物,通常使用4-MUP(4-甲基伞酮)吸收并储存能量,进入激发态,并回复到基态的过程中,多余的能量以电磁辐射的形式(发光)释放通过荧光计检测优点跟RIA具有相同的敏感性和动力学检测范围避免了RIA的半衰期短、有害

8、物质的环境污染问题局限性容易受自动荧光素或者样本中含有的能使荧光淬灭的物质干扰应用举例Abbott-Largemolecule(MEIA)assaysonIMx,AxSYM标记免疫技术荧光偏振

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