螺旋体和检验

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1、怀化医专《微生物学检验》教案编号：2010年上学期授课教师桂芳教研室主任审核签名李争鸣螺旋体及检验课时授课月日月日月日月日月日月日教学课题2时间星期星期星期星期星期星期授课对象检验专业班级【掌握】钩端螺旋体，梅毒螺旋体的生物学特性和微生物学检验。【熟悉】1、回归热螺旋体和伯氏疏螺旋体的特性。目的要求2、各类螺旋体的致病与免疫性。【了解】防治原则和其他螺施体。重点：1、螺旋体的概念与特征教学重点2、钩端螺旋体的主要生物学性状及微生物学检验及难点3、梅毒螺旋体的主要生物学性状及微生物学检验难点：钩端螺旋体、梅毒螺

2、旋体的微生物学检验。教法与讲授法学法课型理论课教学手段多媒体1、概述：主要特点及分类。（10min）2、钩端螺旋体：形态染色、培养、抗原构造与分类。致病性与免疫性，微生物学检查教学及防治原则。（35min）内容与3、梅毒螺旋体：形态染色、培养特性、抗原构造。致病性与免疫性，微生物学检查及时间防治原则。（35min）分配4、其他螺旋体。(10min)小结（10min）复习1、什么叫螺旋体？有哪些特征？思考题2、梅毒螺旋体的血清学检测包括哪些试验？其原理如何？1、张卓然主编《临床微生物学与微生物检验》人卫出版社第

3、3版2006.11参考资料2、倪语星主编《临床微生物学与检验》人卫出版社第4版，2007年3、李凡主编《医学微生物学》人卫出版社第7版2008.1本次课首先应重点讲授螺旋体的概念与基本特征，尤其是与其他微生物的区别。自评其次是钩端螺旋体、梅毒螺旋体的微生物学检查及致病性，螺旋体常用的染色法是镀银染色法，该法的操作方法及结果观察可以放在实验课介绍。1第二十七章螺旋体及检验(spirochete)螺旋体是一类细长、柔软、弯曲呈螺旋状、运动活泼的原核细胞型微生物。生物学地位介于细菌与原虫之间。有细胞壁、原始核，以二

4、分裂方式繁殖，对抗生素敏感等。其中致病性螺旋体主要有钩端螺旋体属、疏螺旋体属、密螺旋体属等3个属。第一节钩端螺旋体（Leptospira）有2种：问号钩端螺旋体——人畜共患病；双曲钩端螺旋体——不致病。一、生物学性状1.形态染色螺旋细密、规则，形似细小珍珠排列的细链。一端或两端呈钩状，故名钩端螺旋体。运动活泼，常使菌体呈C、S或8字型。G-，但不易着色。常用Fontana镀银染色法，被染成棕褐色。暗视野显微镜下可见活泼运动、折光性强而成白色的钩端螺旋体。2.培养特性需氧或微需氧，营养要求高，常用Korthof

5、培养基，其中含10%新鲜灭活兔血清或牛血清，蛋白胨和磷酸盐缓冲液（血清除促进钩体生长外，还可中和其产生的毒性）。适宜生长温度为28-30℃，若11-13℃能生长的为非致病的双曲钩端螺旋体。最适pH7.2-7.6，pH<6.5死亡，最高能耐pH8.4。在人工培养基中生长缓慢：液体培养基：28℃培养1-2周，液体培养基呈半透明云雾状生长。1%琼脂固体：28℃1-3周，可形成透明、不规则，d<2mm的扁平小菌落。生化反应不活泼，不分解糖类和蛋白质，有过氧化氢酶，有的菌株可溶血。3.抵抗力对热和酸抵抗力弱，60℃1m

6、in即死亡。0.2%来苏、1:2000升汞、1%石炭酸经10~30min被杀灭。对青霉素敏感。2在夏秋季酸硷度中性的湿土或水中可存活20天以上，甚至数月之久，这在本菌的传播上有重要意义。4.抗原构造与分类1）属特异性抗原（菌体抗原）：脂多糖复合物，用于分群。2）型特异性抗原（表面抗原）：多糖蛋白复合物，用于分型。问号状钩端螺旋体至少可分为25个血清群、273个血清型。我国已发现的致病性钩端螺旋体至少有19个血清群、74个血清型，是发现血清型最多的国家。二、致病性与免疫性1、致病物质•（1）内毒素样物质(ELS

7、)或称脂多糖样物质(LLS)•（2）溶血素：溶解红细胞，引起贫血、出血、肝肿大、黄疸、血尿。•（3）细胞毒性因子(CTF)：引起小鼠肌肉痉挛、呼吸困难而死亡。•（4）细胞致病作用(CPE)物质：56℃经30分钟被破坏。注射入家兔，可形成红斑和水肿。2、所致疾病钩端螺旋体病（一种人畜共患传染病）。储存宿主：鼠和猪，其他：50多种动物（蛇、鸡、鸭、鹅等）传播途径：人与污染水或土壤接触,经粘膜或破损皮肤进入;经胎盘垂直传播.临床表现：大多隐性感染，随尿排出。轻重程度与感染钩体型别、毒力、免疫性有关。轻者似感冒，重者

8、引起内脏器官和神经系统的损害。先形成钩体血症,进入损伤全身毛细血管内皮细胞及肝、肾、肺心及中枢神经。疾病特点：起病急、高热、乏力、全身酸痛、眼结膜充血、腓肠肌压痛、表浅淋巴结肿大。免疫性：疾病后可获得抗同型钩体的持久免疫力。细胞免疫为主。三、微生物学检查法（一）标本采集钩端螺旋体可从临床标本、携带者和自然界的水中分离获得。标本包括血液、尿和脑脊液，发病早期(10天内)血液的阳性率高，2周后尿和脑脊液