孕激素和米非司酮对子宫内膜癌hhua细胞的作用

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1、孕激素和米非司酮对子宫内膜癌HHUA细胞的作用【】目的探讨孕激素和孕激素受体拮抗剂米非司酮对人子宫内膜癌HHUA细胞株的生长抑制作用及对其表达凋亡蛋白的影响。方法体外培养人子宫内膜癌HHUA细胞，不同浓度孕激素和米非司酮分别作用于细胞72h，绘制细胞生长曲线计算半数有效浓度（IC50）后，分为对照组、孕激素组、米非司酮组、孕激素和米非司酮联合组，以各药物的IC50干预细胞48h后，用MTT法计算细胞抑制率，免疫组化S-P法测定各组细胞bcl-2和Fas蛋白表达的变化。结果MTT实验表明，孕激素和米非司酮均能抑制子宫内膜癌

2、细胞增殖。孕激素半数有效浓度为100.7537μmol/L；米非司酮的半数有效浓度为39.5534μmol/L，联合用药组抑制率显著高于单独用药组。孕激素和米非司酮联合可使bcl-2表达下降，Fas表达升高（P＜0.05）。结论孕激素和米非司酮联合应用在子宫内膜癌HHUA细胞的抗增殖和干预bcl-2和Fas蛋白的表达方面有协同作用。【关键词】子宫内膜肿瘤；孕酮；米非司酮；肿瘤细胞；培养Effectsofprogesteroneandmifepristoneonthehumanendometrialcancercellli

3、neHHUA【Abstract】ObjectiveTostudytheeffectsofprogesteroneandmifepristoneonthegroanendometrialcancercellline.MethodsHHUAcells，treatedbydifferentconcentrationsofprogesteroneandmifepristoneinedfortheirgroethylthiazolyltetrazolium（MTT）assayafter72hoursandgottheinhibit

4、oryconcentration50%（IC50）.HHUAcells，treatedbycontrol，progesteroneormifepristoneorprogesteronebinedmifepristonefor48hours，inedfortheirinhibitoryratemunohistochemistryassay.ResultsHHUAcellsgroifepristone.IC50ofprogesteroneis100.7537μmol/L；IC50ofmifepristoneis39.553

5、4μmol/L.Theinhibitoryrateofprogesteronebinedifepristoneifepristone.Theexpressionofbcl-2ifepristoneandsynergisticeffectetrialneoplasms；mifepristone；progesterone；tumorcells；culture近20余年来，子宫内膜癌的发病率有上升趋势，且随着发病年龄的年轻化，保留生育能力的治疗方案已成为患者的迫切需求。激素治疗是年轻子宫内膜癌患者的主要保守治疗手段之一，研究显

6、示［1］，年轻未育的内膜癌Ⅰ期患者，如果细胞分化好可以考虑保守治疗，同时严密监测有无复发，等待完成生育后再行手术治疗。目前子宫内膜癌激素治疗的主要药物有高效孕激素及三苯氧胺。有研究表明，孕激素受体拮抗剂米非司酮对多种肿瘤细胞具有抑制作用。本实验旨在探索孕激素和米非司酮二者联合对子宫内膜癌HHUA细胞的生长抑制作用，以及该方案对HHUA细胞株表达凋亡蛋白的影响，以期为临床治疗子宫内膜癌提供新方案。1材料与方法1.1子宫内膜癌细胞系子宫内膜癌HHUA细胞是高分化子宫内膜腺癌细胞，其含有雌二醇受体和孕激素受体以及a公司），96

7、孔培养板（Costar公司），酶联免疫检测仪（SPECTRAMAX250型德国生产）。鼠抗人bcl-2、Fas单克隆抗体均为北京中杉公司产品。1.3细胞的制备HHUA细胞在含10％小牛血清的DMEM培养液中置37℃、5％CO2培养箱中培养，每4～5天传代，药品用无水乙醇溶解，并用含小牛血清的培养基稀释到所需浓度，使乙醇终浓度小于1％。1.4四甲基偶氮唑盐（MTT）比色实验1.4.1绘制细胞生长曲线取对数生长期HHUA细胞制备成3×104个细胞/ml，混匀后加入96孔细胞培养板，每孔200μl，24h后观察细胞已贴壁，吸弃

8、上清加入含药物的培养基，孕激素的剂量稀释为0、10、20、40、60、80、100、120、140、160μmol/L，米非司酮的剂量稀释为0、5、10、20、40、60、80、100、120μmol/L，空白对照组中加入相等体积不含药物的培养基，每组6个复孔，培养72h，加MTT溶液（5mg/m）20μl，继续孵育