催吐萝芙木生物碱的提取工艺研究与外貌等离子共振技能在槲寄生凝聚素的应用

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时间:2018-10-28

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1、催吐萝芙木生物碱的提取工艺研究与外貌等离子共振技能在槲寄生凝聚素的应用----毕业范文论文-->第一部分:催吐萝芙木生物碱的提取工艺研究第一章绪论1.1萝芙木属药用生物碱的研究现状萝芙木(Rauvolfia)系夹竹桃科萝芙木属的常绿小灌木,广泛分布于热带及亚热带地区。其属名是为了纪念德国植物学家LeonhardRaubine)、阿吗灵(ajmaline,即萝芙木碱raualicine)、利新胺(rescinnamine)、坎尼生(canescine)、罗尼生(raunescine)、蛇根碱(serpentine)、蛇根亭宁(serpentitine)等吲哚类生物碱

2、[3~5]。其中,利血平、育亨宾、阿吗灵的研究起步较早,研究深度与广度也较突出;而其他的生物碱的研究亦在逐渐拓展。1.1.1利血平的研究利血平(reserpine)是萝芙木中主要的药用生物碱,在催吐萝芙木中含量最高可达1%。有轻度降压功能,作用缓慢而持久,对中枢神经系统有镇静、安定作用,主要用于轻重度高血压的治疗[6]。.........................................1.2催吐萝芙木药用生物碱的提取工艺研究催吐萝芙木(RauvolfiavomitoriaAfzel)原产于非洲加纳,1960年代引种至我国的云南、广西等地,近年来获得

3、大面积的引栽种植[42]。目前关于催吐萝芙木的生物碱的提取工艺研究报道,一部分关注生物总碱的提取,所获得的产物含有利血平、萝芙木甲素等生物碱,其成分即为萝芙木根部的弱碱性混合生物碱[43~45];还有一部分报道的工艺只注重其中一种生物碱的提取,如利血平的提取,催吐萝芙木的原料资源未能得到充分的利用[46~48];此外还有一部分报道的研究目的在于分析而不是制备,操作步骤较繁琐,收率低,不适合生产[49~51]。本课题组多年来一直致力于萝芙木属植物的生物碱资源利用方面的研究[48、52],在传统提取工艺的基础上进行了创新改进,开发了新型利血平分离提取工艺,分别取得小试

4、、中试规模实验的成功。此外,在现有的利血平提取工艺的基础上,研究从同一批催吐萝芙木原料中提取利血平和育亨宾的新工艺,并取得了阶段性的实验成果,已经成为规模化工业生产的重要参考依据,有望通过进一步的科技成果转化,实现经济效益的产出。第二章催吐萝芙木有效成分的分离提取引言:本课题的研究目标为建立从催吐萝芙木中同时获得利血平、蛇根碱、阿吗灵等生物碱单体的分离提取工艺,并为实现大规模工业生产提供必要的参考依据。在已建立的利血平、育亨宾提取工艺的基础上[1~3],我们认为酸性乙醇浸提、大孔树脂吸附和洗脱步骤已经成为提取分离生物碱类化合物的有效步骤。但是,在获得含有生物碱组分

5、的洗脱液之后,如何进一步提纯,获得纯净的生物碱化合物单体,是整个催吐萝芙木生物碱提取工艺中的最关键步骤,也是本课题研究中创新性最高的技术环节。通过本课题的前期研究工作,我们发现溶剂萃取、薄层层析、硅胶柱层析等常用的分离纯化天然产物有效成分的方法在此并不适用[4~6]。在本课题的研究中,由于从催吐萝芙木中浸提出的生物碱组分过于复杂,增加了阳离子交换树脂处理的步骤,对所获得的含有生物碱组分的大孔树脂洗脱液进行分离纯化。此外,我们还考察了电层析和反相层析这两种分离方法的纯化效果。实验结果表明,以羧甲基纤维素作为分离介质,加载生物碱粗提样品,通电进行电层析的过程中,液体在

6、层析柱中流速较慢,且产生的焦耳热过大,易破坏分解样品,分离效果不明显。而反相层析的方法,却获得了较为理想的分离结果。由此,在阳离子交换树脂处理步骤后,直接以C18柱反相层析提取,通过梯度洗脱,分段收集洗脱液,将生物碱组分分离,然后通过有机溶剂结晶的方法,获得纯净的生物碱单体。.....................................2.1材料与仪器2.1.1材料干燥的催吐萝芙木根块,由云南思茅伟农植物制药有限公司提供。育亨宾粗品,由陕西禾博天然产物有限公司提供。利血平和育亨宾标准品均购自美国sigma-aldrich公司。高效液相色谱用甲醇为色谱纯

7、,购自上海凌峰化学试剂有限公司。工业乙醇,购自常熟市杨园化工有限公司。氢氧化钠、硫酸、丙酮、无水乙醇、甲醇、三氟乙酸,均为分析纯,购自国药集团化学试剂有限公司。HZ-818大孔吸附树脂,购自华东理工大学华震科技有限公司。D152大孔弱酸性阳离子交换树脂,购自南开大学化工厂。1×2型强酸性阳离子交换树脂,上海医药工业研究院提供。.....................................第二部分:表面等离子共振技术在槲寄生凝集素的应用.............92-145第四章绪论.............................92-1094

8、.1表面等

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