川芎挥发油对发热大鼠下丘脑环氧化酶

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1、川芎挥发油对发热大鼠下丘脑环氧化酶：杨金蓉宋军胡荣华桦李莉【摘要】　　目的探讨川芎挥发油解热作用机理。方法采用免疫组化及RT-PCR方法对啤酒酵母发热大鼠下丘脑组织环氧化酶－2（COX-2）蛋白及mRNA表达的影响进行研究。结果模型组大鼠下丘脑COX-2蛋白和mRNA表达均高于正常对照组（P<0.01），川芎挥发油高、中剂量组COX-2蛋白和mRNA表达低于模型组（P<0.01或P<0.05），低剂量组与模型组相比无明显差异（P>0.05）。结论川芎挥发油解热机理之一可能是抑制大鼠下丘脑COX-2的

2、表达从而减少PGE2的产生使中枢体温调定点下调达解热效应。【关键词】川芎挥发油；解热；环氧化酶-2　　Abstract：ObjectiveToinvestigatetheantipyreticmechanismofessentialoilofligusticumchuanxiongHort(CH).MethodsExpressionsofCOX-2proteinandmRNAinhypothalamusofbreRNAinhypothalamusofmodelgroupalgroup,highandmiddledoseso

3、fCHcouldsignificantldecreasetheexpressionsasparedodelgroup,butloechanismofessentialoilofLigusticumchuanxiongHort.(CH)maybeinhibittheexpressionofCOX-2proteinandmRNAinhypothalamusofrats,therebyreducethecontentofPGE2thatlochuanxiongHort.；Antipyretic；COX-2　　笔者前期研究发现川芎

4、挥发油(CH)具有明显的解热、镇痛、抗炎作用，且其解热机理与降低下丘脑PGE2含量有关（杨金蓉《川芎挥发油解热作用部分机理研究》.成都中医药大学2002博士学位论文）。环氧化酶（COX）是前列腺素生物合成的关键酶，有两种不同类型：COX-1和COX-2。其中，COX-1是一个组成酶，与生理性前列腺素合成有关；COX-2则是一个诱导酶，可以被脂多糖等多种因子诱导，与发热、炎症密切相关［1］。为进一步探讨川芎挥发油解热作用的机理，我们观察川芎挥发油对发热大鼠COX-2表达的影响。　　1器材与方法　　1.1药物川芎挥发油：川芎购

5、于都江堰市徐渡乡，经成都中医药大学鉴定教研室鉴定为LigusticumchuanxiongHort.。川芎经水蒸气蒸馏法提取挥发油，无水硫酸钠脱水后备用。临用时以1%吐温80配成所需浓度乳剂。　　1.2试剂及仪器啤酒酵母：将新鲜啤酒酵母(成都啤酒厂提供)于鼓风条件下60℃烘干，粉碎，过100目筛后低温保存，临床用时以水调制为20%的悬液备用，用时摇匀。安痛定：成都制药一厂生产，批号20010507。COX-2免疫组化试剂盒：武汉博士德生物工程有限公司产品。TaKaRaRNAPCRKit(AMV)Ver.3.0试剂盒：宝生物

6、工程（大连）有限公司产品。PUS显微镜：日本产品。　　1.3动物SD成年雄性大鼠，体重（200±20）g，共60只，购于成都中医药大学实验动物中心，合格证号，川室动管字第8号。　　1.4方法参照文献［2］，动物在实验环境［实验室温度控制在（25±1）℃，相对湿度（60±2）%］中每日测肛温（测温探头插入肛门2cm）两次，连续5d，使其适应。实验前10h禁食不禁水。实验前间隔30min测肛温两次，取两次平均值作为大鼠的基础体温，（两次肛温波动＞0.3℃者淘汰）。选取基础肛温在(36.6±0.5)℃之间的SD雄性大鼠适量，取其

7、中8只作为正常对照组（ip生理盐水），其余大鼠背部皮下注射20%啤酒酵母混悬液10ml/kg，每30min测肛温1次。6h后,升温不足0.8℃者淘汰。立即将筛选合格的大鼠按升温幅度和体重分层随机分为5组，每组8只，即模型组（ip生理盐水），阳性药组（安痛定），川芎挥发油高、中、低剂量组（分别ip0.68%，0.23%，0.11%的川芎挥发油）。各组均等容积不等浓度ip给药，5ml/kg。然后每隔30min测肛温1次。给药2h后，快速断头取下丘脑作相应处理供测试相关指标。　　1.4.1COX-2蛋白表达的观察（免疫组化法）标

8、本组织常规酒精脱水、透明、石蜡包埋切片，切片厚度4μm，SABC法染色，DAB显色。高倍镜下随机选取4视野，计数每100个细胞中COX-2阳性细胞数。采用PEMS3.0进行统计分析。　　1.4.2COX-2mRNA表达的观察（RT－PCR法）COX-2和β-actin引物根据文献［3］，并在GenBan