超微归脾丸对d

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1、超微归脾丸对D桂卉,文雅萍,邹龙,刘东文,蔡光先【摘要】目的研究超微归脾丸的抗衰老作用及其机制。方法背部皮下注射D-半乳糖造衰老小鼠模型,造模同时连续灌胃给药45d后,测定肝脏及脑组织的抗氧化指标(MDA,SOD.freelin,加热回流煎煮1.5h,离心过滤,滤渣加10倍量的水加热回流煎煮1.0h,离心过滤,合并滤液,浓缩成浓缩液,浓缩液置蒸发皿中蒸干,置真空烘箱内60℃真空干燥,得干浸膏。干浸膏粉碎成100目浸膏粉,泛制成丸,干燥得普通归脾丸。2.2超微归脾丸的制备称取10倍处方量(除木香、白术、茯苓)各药材超微饮片,加10倍量的水,浸泡30

2、min,75℃下进行动态提取1.5h,离心过滤,滤渣加8倍量的水,再提取1.0h,离心过滤,合并滤液,浓缩成浓缩液,浓缩液置蒸发皿中蒸干,置真空烘箱内60℃真空干燥,得干浸膏;木香、白术经CO2超临界流体萃取得挥发油,挥发油用β-环糊精包合,得挥发油β-环糊精包合物,药渣与处方其它药物合并提取;干浸膏粉碎成100目浸膏粉,再与茯苓超微粉、挥发油包合物混匀泛制成丸,干燥得超微归脾丸。2.3动物分组取小鼠60只,.freelg·kg-1·d-1的3%D-半乳糖生理盐水溶液,1次/d,连续45d。2.5给药方法将普通归脾丸、超微归脾丸均用蒸馏水溶解,配

3、成相当于生药材1.0g/ml的药液,超微归脾丸低、中、高剂量组均灌服超微归脾丸药液,普通归脾丸组灌服普通归脾丸药液。根据日服用剂量,按人体模型表面积换算后给药剂量分别为:超微归脾丸高剂量组15.50g/(kg·d)、中剂量组8.00g/(kg·d)、低剂量组3.89g/(kg·d),普通归脾丸组按超微归脾丸中剂量组给药,模型组、空白对照组给予中剂量同体积生理盐水。2.6指标测定连续给药45d后,颈椎脱臼处死小鼠。取胸腺、脾、肝称重测定脏器指数;同时将肝及脑制成1%组织匀浆(组织匀浆的制备按试剂盒说明),按试剂盒中方法测定肝及脑组织SOD的活力、M

4、DA的含量、GSH-Px活性。2.7统计学分析数据均采用SPSS12.0软件完成统计处理。结果以±s表示;计量资料组间差异比较采用t检验。3结果3.1各归脾丸对小鼠胸腺、脾、肝脏指数的影响实验结果见表1。由表1可知,与模型组比较,各归脾丸组均能显著提高亚急性衰老小鼠模型的鼠的脏器指数(P0.05,P0.01),超微归脾丸低、中剂量组与普通归脾丸组相比,差异无统计学意义,超微归脾丸高剂量组与普通归脾丸组相比差异有统计学意义(P0.05,P0.01)。从胸腺、脾脏器指数的比较可知,普通归脾丸组与超微归脾丸各剂量之间无明显区别,同时超微归脾丸各剂量之间

5、也无显著性差异。表1各归脾丸对小鼠胸腺、脾脏、肝脏的影响与模型组比较,●P0.01,▲P0.05;与普通归脾丸组比较,◆P0.01,■P0.05;n=53.2各组小鼠肝脏MDA含量、SOD和GSH-Px活性测定结果见表2,与模型组比较,普通归脾丸组、超微归脾丸低、中、高剂量组的肝MDA含量、SOD和GSH-Px活性都具有显著性差异(P0.05)。与普通归脾丸组相比较,超微归脾丸低、中、高剂量组的肝MDA含量和SOD都有显著性差异(P0.01);与普通归脾丸组相比较,超微归脾丸中、高剂量组的GSH-Px活性明显升高(P0.01),但超微归脾丸低剂量

6、组却无显著性差异。表2不同组别小鼠肝组织中MDA含量、SOD和GPX活性检测结果与模型组比较,●P0.01,▲P0.05;与普通归脾丸组比较,◆P0.01,■P0.05;n=53.3各组小鼠脑MDA含量、SOD和GSH-Px活性测定结果见表3。与模型组比较,普通归脾丸组、超微归脾丸低、中、高剂量组的脑MDA含量、SOD和GSH-Px活性都有显著性差异(P0.05,P0.01)。与普通归脾丸组比较,超微归脾丸低、中、高剂量组的脑MDA含量、SOD和GSH-Px活性均无明显区别。表3不同组别小鼠脑组织中MDA含量、SOD和GPX活性检测结果与模型组比

7、较,●P0.01,▲P0.05;与普通归脾丸组比较,◆P0.01,■P0.05;n=54讨论本实验通过小鼠颈背部皮下注射300mg/(kg·d)的3%D-半乳糖生理盐水溶液,连续注射45d造亚急性小鼠衰老模型。由实验结果可知:模型组小鼠肝、脑的各抗氧化指标明显高于或低于空白对照组,重要的组织器官胸腺、脾以及肝脏显著性萎缩,说明本实验造模成功。MDA是一种脂质过氧化产物,能引起细胞代谢及功能障碍,因而引起细胞损伤,进而加速机体衰老3,4;SOD活力的高低间接反应了机体清除氧自由基的能力5;GSH-Px是机体内广泛存在的一种重要的催化过氧化氢酶6,测

8、定GSH-Px可以间接的反应细胞的完整程度。饲养动物45d后,给予归脾丸的各组小鼠的抗氧化指标如肝、脑的MDA含量、SOD和GSH-Px

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