中药蒲公英花中总黄酮的分离纯化研究

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1、中药蒲公英花中总黄酮的分离纯化研宄袁杰(辽宁中医药大学附属医院制剂中心121004)【摘要】目的:研究确定分离纯化中药蒲公英花中总黄酮的实验条件。方法:应用D-101大孔吸附树脂对蒲公英花中的总黄酮进行精制纯化,确定最好的精制纯化条件。结果:最佳精制纯化条件pH3.0,2BV上样量,2BV/h流速。结论:在最佳条件下,蒲公英花中总黄酮的分离纯化效果最好,可为蒲公英花中总黄酮的分离纯化提供更完善的科学依据。【关键词】蒲公英总黄酮分离纯化【中图分类号】R284.2【文献标识码】B【文章编号】1672-508

2、5(2014)05-0278-02【Abstract】Objective:TostudytheseparationandpurificationoftotalflavonoidsdeterminedexperimentalconditionsofChinesemedicinedandelionflowers.Methods:thetotalflavonoidsbymacroporousresinD-101todandelionflowerswaspurified,determinethebestpuri

3、ficationthepurificationcondition.Results:theoptimumpurificationconditionsofpH3.0,2BV,samplevolume,flowrateof2BV/h.Conclusion:undertheoptimalconditions,totalflavonefromdandelionflowersbestpurificationpurificationeffect,providebetterscientificbasisfortotal

4、flavonoidsfromdandelionflowers.【Keywords]dandelion;totalflavonoids;separationandpurification蒲公英(TaraxacummongolicumHand-Mazz),性寒,味甘苦,有利湿退黄、消肿散结、清热解毒的功效,从蒲公英中提取分离出的黄酮类化合物,有治疗乳痈、小便淋沥涩痛、湿热黄疽、肺痈咳痰、痈肿疔毒的功效[1]。近年来,蒲公英花在药品、保健品和食品中有一定的开发应用价值,在寻找天然黄酮化合物方面也有极高的研宄价

5、值。据《本草纲0》记载:“蒲公英嫩苗可食,生食治感染性疾病尤佳。”20世纪初,国内外许多科研工作者就开始对蒲公英中的化学成分进行研究,从中分离得到对羟基苯乙酸、咖啡酸、总黄酮、胆碱和留醇、后来冇文献相继报道了脂肪、碳水化合物也存在于蒲公英中,并进一步证实了黄酮类化合物、微量元素的存在等。大孔吸附树脂是一种不含交换基团且有大孔结构的高分子吸附树脂,能选择性吸附中药中的各种成分,从而达到分离纯化的目的[2】本实验应用D-101大孔吸附树脂对蒲公英花中的总黄酮进行精制纯化,研究上样溶剂的性质(极性、浓度、pH

6、等)、上样量和流速等,确定最好的精制纯化条件,冋吋也为蒲公英的药理研究和临床应用提供理论依据。1.资料与方法1.1仪器、试剂与材料大孔吸附树脂D101(西安蓝深交换吸附材料有限公司);KQ-250DE型超声波清洗器(40kHz,昆山市超声仪器有限公司);BT124S型电子分析天平(赛多利斯科学仪器公司);UV-2450型紫外可见分光光度计(日本岛津公司);旋转蒸发仪;芦丁标准品由北京药品生物制品检验所提供;无水乙醇、氯化铝、盐酸、亚硝酸钠等试剂均味分析纯;蒲公英花采自太原地区的野生种类。1.2方法1.2

7、.1人孔树脂的预处理树脂溶胀后,用无水乙醇装柱,并用乙醇洗柱,吋吋检查洗脱的乙醇,将乙醇与水以1:5的比例混合、振摇至澄清吋即可停止洗柱,再用蒸馏水洗柱至无乙醇味后备用。1.2.2标准曲线的制备按参考文献[4]的方法绘制芦丁标准曲线,作为总黄酮含量测定的方法依据。1.2.3样品的制备和纯度的计算将干燥的蒲公英花粉碎后过80B筛,精密称量10g样品,加适量水后超声提取30min,过滤,滤液加适量75%乙醇超声提取3次,每次30min,过滤,合并3次滤液,于旋转蒸发仪中蒸干,加蒸馏水溶解至10mL,取ImL

8、溶解液,稀释10倍后测定吸光度。根据吸光度和标准曲线计算出样品中的总黄酮量或纯度。取少量剩余溶剂蒸发至浸膏状备用。1.2.4动态吸附解吸试验称取约20mLD-101树脂,湿法装柱。多组精确量取-定体积的一定浓度的总黄酮溶液过树脂柱,对比考察上样量、pH、流速等过柱条件对吸附的影响,并根据公式计算吸附率和解吸率。吸附率=[(C0V0-C1V1)/C0V0]×100%解吸率=[C2V2/(C0V0-ClVl)]×100%

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