盾叶薯蓣中甾体皂苷及其体外血小板活性研究

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时间:2018-11-01

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1、盾叶薯蓣中留体皂苷及其体外血小板活性研宄[摘要]利用大孔吸附树脂柱色谱、硅胶柱色谱、ODS柱色谱及制备液相等方法,从盾叶薯蕷Dioscoreazingiberensis70%乙醇提取物中分离得到10个化合物,并通过核磁和质谱等波谱学方法分别鉴定它们的结构为胡芦巴皂苷Xllla(1)、小花盾叶薯蓣皂苷(2)、胡芦巴皂苷IVa(3)、三角薯蕷皂苷(4)、protobioside(5)、lilioglycosideK(6)、盾叶新苷(7)、三角叶皂苷(8)、薯蓣次苷A(9)、延龄草皂苷(10)。其中,化合物1,3,5,6均为首次从该植物中分离得到。化合物1〜10的体外血小板活性筛选

2、表明,化合物7和8能够诱导血小板聚集,而化合物9具有显著抑制血小板聚集的作用。[关键词]盾叶薯蕷;留体皂苷;分离鉴定;血小板聚集盾叶薯蕷DioscoreazingiberensisC.H.Wright,又称黄姜,为薯蓣科薯蓣属多年生草本攀援植物,广泛分布在河南、四川、湖北和陕西南部。盾叶薯蓣为我国特有薯蓣属植物,资源丰富,是生产激素类药物合成前体皂素(薯蓣皂苷元)的主要生产原料之一。盾叶薯蓣作为中药,具有清肺止咳、利尿通淋、通经止痛、解毒消肿等功效[1],也被用于中药新药的研究开发。目前,上市药物盾叶冠心宁片就是由盾叶薯蓣根茎提取物生产而成的中成药,可用于治疗高血脂、心绞痛和

3、冠心病等症。留体皂苷是盾叶薯蓣中的主要化学成分,前人已经从盾叶薯蓣中分离得到一系列的甾体皂苷类成分[2-5]。早期的研究多集中在皂苷元,近年报道的成分包括螺留皂苷及呋留皂苷,但研宄的系统性不足,特别是对其中微量成分的分离鉴定研宄较少。本文以盾叶薯蓣为研究对象,利用多种分离手段从其70%乙醇提取物中共分离得到10个单体化合物,并鉴定它们的结构分别为胡芦巴皂苷Xllla(1,trigoneosideXllla)、小花盾叶薯賴皂昔(2,parvifloside)、胡芦巴皂苷IVa(3,trigoneosideIVa)、三角薯蕷皂苷(4,deltoside)、protobioside

4、(5)>lilioglycosideK(6)、盾叶新苷(7,zingiberensisnewsaponinl)>三角叶皂苷(8,deltonin)、薯蕷次苷A(9,prosapogeninAofdioscin)、延龄草皂苷(10,thllin)。其中化合物1,3,5,6为首次从该植物中分离得到。基于盾叶冠心宁片的临床应用和已报道的盾叶薯蓣留体皂苷的心血管活性,对得到的各单体化合物进行了体外血小板聚集活性的筛选,初步探讨其构效关系。1材料WatersSYNAPT质谱仪(Waters,美国);VarianUNITYINOVA600超导核磁共振谱仪(PaloAlto,美国)和JNM

5、-ECA-400超导核磁共振谱仪(日本电子,日本);Waters2695型高效液相色谱仪,VenusilXBPC18色谱(4.6mmX250mm,5Um,艾杰尔,天津),PL-ELS2100型蒸发光检测器(漂移管温度70°C,雾化温度50°C,气流量1.6L?min-1,Polymer,英国);Primelinesolventdeliverymodule(ASb美国)制备型高效液相色谱仪,ShodexRID102型示差检测器(ShowaDenko,日本),VenusilXBPC18色谱柱(10.0mmX250mm,5um,艾杰尔,天津)。SP825型大孔吸附树脂(三菱,日本)

6、;ODS-A(120,50um;YMC,日本);柱色谱硅胶用硅胶H(青岛海洋化工厂),薄层色谱硅胶板(青岛海洋化工厂)。MonoBlocAB104-S型1/1万天平(Mettle-Toledo,美国);RE-2000型旋转蒸发仪(亚荣,上海);SHZ-III型循环水真空泵(亚荣,上海)•’CHRISTALPHA1-2LD型冷冻干燥机(MarinChrist,德国);560CA型血小板聚集仪(CHRONOLOG,美国),CentraMP4R型离心机(IEC,美国),15mL硅化离心管(金麦克,中国);MEK-2-7226血细胞计数仪(Chronolog,美国)。分析纯试剂甲醇、

7、乙醇、乙腈、氯仿等有机溶剂(北京化学试剂厂);所用色谱纯试剂甲醇(安徽时联特种溶剂股份有限公司)、乙腈(美国Fisher公司);肝素钠(Merck,德国);戊巴比妥钠(Merck,德国)。Wistar雄性大鼠200g(军事医学科学院动物中心)。盾叶薯蕷根茎采购自陕西安康,由天津中医药大学张丽娟教授鉴定为盾叶薯蕷D.zingiberensis,标本(HJ1004)保存于北京军事医学科学院放射与辐射医学研究所生物技术研究室中药化学组。2提取与分离盾叶薯蓣药材5.5kg,切片,70%乙醇回流提取(2次,每次l

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