中药复苏饮对严重脓毒症患者外周血单核细胞tlr2

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1、中药复苏饮对严重脓毒症患者外周血单核细胞TLR2【摘要】观察中药复苏饮对严重脓毒症患者外周血单核细胞TLR2、TLR4基因表达的影响。【方法】将４０例患者随机分为复苏饮组（治疗组）和安慰剂组（对照组）各２０例，两组均采用西医常规监护治疗，治疗组配合使用中药复苏饮（由工人牛黄、西洋参、黄芪、生大黄、生石膏、麦冬、丹参、赤芍、猴枣等组成），而对照组则加用安慰剂。另选取１５名健康体检者作为正常组。采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR)法测定治疗前及治疗第３、第７天外周血单核细胞TLR2、TLR4　m

2、RNA表达的变化。【结果】治疗前两组患者单核细胞TLR2、TLR4mRNA表达显著低于正常组（Ｐ＜０.０５)。对照组于治疗第７天TLR2、TLR4　mRNA表达开始明显升高（Ｐ＜０.０1);治疗组于治疗第３天TLR2、TLR4　mRNA表达即明显回升，且治疗后各个观察点的基因表达明显高于对照组（Ｐ＜０.０５);但两组的ＴＬＲ２、ＴＬＲ４　mRNA表达均未达到正常组水平（Ｐ＜０.０５或Ｐ＜０.０1）。【结论】中药复苏饮可明显上调外周血单核细胞TLR4、TLR2　mRNA的表达，降低严重脓毒症患者的

3、病死率。【关键词】脓毒症中药疗法复苏饮治疗应用Toll样受体脓毒症是一种全身感染性疾病。以往研究认为，多种病原微生物的细胞壁成分［如革兰阴性菌的内毒素（LPS），革兰阳性菌的肽聚糖（PGN)和脂磷壁酸（LTA)等］均可通过与细胞表面的蛋白质受体CD14结合，诱导全身炎症反应，从而导致脓毒症休克甚至多脏器功能衰竭综合征（ＭＯＤＳ）。然而，由于CD14本身是一种膜锚蛋白（缺乏跨膜区和胞内区），不能直接向细胞内传导ＬＰＳ信号，新近研究发现，Toll样受体（Tolllikereceptors,TLRs

4、)可能是ＬＰＳ跨膜信号转导的门户蛋白［１］。目前，已克隆的人类的TLRs成员有１０个（即TLR1～10)，其中TLR2和TLR4的作用尤为显著。TLRs如同天然免疫的眼睛，监视与识别各种不同的病原特异性分子模式（pathogenspecificmolecularpatterns,PAMPs)，激活ＮＦκB信号通路，启动一系列免疫炎症反应，最终达到清除入侵的病原微生物的目的，在天然免疫中发挥重要的抗感染免疫功能。因此，以TLRs信号受体为靶向，可能为脓毒症的防治带来新的希望。本文通过观察中药复

5、苏饮对严重脓毒症患者外周血单核细胞TLR2、TLR4基因表达的影响，从受体角度初步探讨中药在抗感染免疫中的作用。现将结果报道如下。1资料与方法1.1临床资料1.1.1病例选择及分组所选病例为２００４年４月至２００５年１１月广州中医药大学第一附属医院ICU收治的严重脓毒症的患者，确诊２４h内被纳入研究。但需除外以下情况：①年龄小于１８岁;②妊娠及哺乳期妇女;③前６个月内接受化疗者;④目前或前３个月内接受皮质激素或其他免疫抑制剂、免疫调节剂治疗者;⑤有免疫系统疾病者;⑥人类免疫缺陷病毒（HIV）阳性

6、者;⑦终末期肝功能或肾功能衰竭者;⑧入院２4h内死亡者。符合纳入标准的患者共４３例，在取得患者或家属知情同意后被纳入研究，其中３例因经济原因自动出院而被剔除，最终入选患者共４０例。入选患者依据随机数字表法分为西医常规治疗加复苏饮组（治疗组）和西医常规治疗加安慰剂组（对照组）各２０例。治疗组男１０例，女１０例;年龄最小２０岁，最大７５岁，平均（６６.６±4.8）岁;对照组男１１例，女９例;年龄最小２３岁，最大７５岁，平均（６４.８±５.１）岁;APACHE　Ⅱ评分：治疗组为（２３.７１±７.４９）

7、分，对照组为（２３.８０±６.６０）分。同期在健康体检者中随机抽取１５名自愿者作为正常对照组（正常组），其中男８例，女７例;年龄最小２２岁，最大７０岁，平均（６２.８±６.７）岁。３组在年龄、性别方面均无显著性差异（Ｐ＞０.０５)，且治疗组和对照组的APACHEⅡ评分亦无显著性差异（Ｐ＞０.０５),具有可比性。1.１.２诊断标准按照２００１年国际脓毒症定义会议提出的脓毒症及严重脓毒症的诊断标准［１］。1.2治疗方法所有入选患者均给予重症监护、抗炎、营养支持、维持血流动力学稳定、呼吸机辅助呼吸等西

8、医常规治疗。治疗组在西医常规治疗基础上加用中药复苏饮（广州中医药大学第一附属医院制剂室提供，由人工牛黄、西洋参、黄芪、生大黄、生石膏、麦冬、丹参、赤芍、猴枣等组成，诸药研末分装胶囊，0.4g/粒），品服或凉开水化开后鼻饲，每日3次。均给对照组在西医常规治疗基础上加用安慰剂（广州中医药大学第一附属医院制剂室提供，由淀粉色素制成，大小、颜色和外包装与复苏饮完全一致），用法同复苏饮。两组均以治疗７天为１个疗程，以２８天计算患者总病死率。1.3实验方法所有患者被纳入研究时（治疗前）、治疗第３天、第７天各