乙烷硒啉对小鼠体内移植性肝癌 (h22)和lew

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1、乙烷硒啉对小鼠体内移植性肝癌(H22)和Lew【摘要】目的观察乙烷硒啉对小鼠移植性肝癌(H22)和Leg/kgCTX及25、12.5、6.3mg/kg乙烷硒啉。停药3d后(第11天)每组处理一半动物，计算抑瘤率，并用流式细胞仪观察其对细胞周期的影响；另一半动物观察生命延长率。结果乙烷硒啉在25、12.5、6.3mg/kg剂量下对小鼠肝癌H22移植瘤的抑瘤率分别为52.5%、43.6%和30.2%，生命延长率分别为56.6、38.7%和14.2%；对小鼠Leg/kg组出现S期阻滞(P<0.05)。结论乙烷硒啉对小鼠移

2、植性肝癌(H22)和Leoreffectofethaselenontransplantedlivercancer(H22)andLeice.MethodsThetransplantedlivercancer(H22)andLeicemodelsice,iceineach.Intraperitonealinjection(ip.)ofthreedosagesedonceadaythroughtheabdominalthesecondtotheeighthdayaftercancericeineachgrouporinhib

3、itionratioandobservethecellcyclebyfloetry,andtheothersg/kg,thetumorinhibitionratioice,respectively.Thetumorinhibitionratioice,respectively.paredg/kg(P<0.05).ConclusionEthaselenhasanantitumoreffectonthetransplantedlivercancer(H22)andLeice,andasdosageisincrease

4、d,theeffectisenhanced.Themechanismmaybeacplishedthroughinterferingtumorcellgroetry硒作为一种微量元素，其抗癌作用已被广泛研究[12]。硒在自然界以有机硒和无机硒化合物两种形式存在。实验证明，无机硒化合物具有蓄积性毒性和致突变作用，而有机硒化合物因为其经过甲基化、烷基化等脱毒过程，不仅具有抗癌作用，且毒性与无机硒化合物比较显著降低[34]。本研究以肝癌(H22)和LePUS,Japan)，回旋式切片机(上海仪表厂)，流式细胞分析仪(FAC

5、SCAN,USA)。1.2实验动物ICR种小鼠，购自西安交通大学医学院实验动物中心，动物合格证号：SCXK(陕)2007001；C57BL/6种小鼠，购自中国药品生物制品检定所实验动物中心，动物质量合格证号：京动管许字(2000)第017号。实验动物均为清洁级，每品系各60只，雌雄各半，体重18～22g，自由进食饮水。动物在西安交通大学医学院实验动物中心SPF动物房饲养。1.3瘤株H22肝癌、Lein离心3min，沉淀用PBS洗一遍，重新用PBS悬浮，台盼蓝拒染法计数活细胞数，细胞存活率应大于95%。调整细胞密度为5×

6、106/mL，每只实验动物颈背部注射细胞悬液0.5mL。待肿瘤长到直径为6～7mm时，剥离肿瘤，按上述方法在体内传代3次，第3代荷瘤鼠作为皮下移植瘤动物模型进行实验。1.4.2实验分组取ICR种和C57BL/6种小鼠各60只，18～22g，♂、♀各半。于右腿背部皮下接种H22及LeL/只。接种后将小鼠随机均分为5组：乙烷硒啉高、中、低剂量组(25、12.5、6.3mg/kg)、阴性对照组及阳性对照组，每组12只。1.4.3抑瘤率实验接种肿瘤后第2天开始腹腔注射新鲜配置的药物或5g/L羧甲基纤维素钠溶液。阳性对照组腹腔注射

7、阳性对照药物CTX60mg/kg，阴性对照组腹腔注射5g/L羧甲基纤维素钠溶液。以上各组动物每天给药1次，连续7d。每天观察小鼠状态，测量肿瘤大小。每组中随机挑6只动物，停药3d后，于第11天脱臼处死，称体重、实体瘤重,计算抑瘤率；测量肿瘤的长短径，计算肿瘤体积。其他小鼠任其自然死亡并记录存活天数，计算各组小鼠荷瘤后平均存活天数和生命延长率。肿瘤体积(V)=ab2/2，a为肿瘤块长径，b为肿瘤块短径；抑瘤率(%)=(对照组瘤重-实验组瘤重)/对照组瘤重×100%；生命延长率%=(实验组平均存活时间-对照组平均存活时间)/

8、对照组平均存活时间×100%[6]。1.4.4细胞周期分布及凋亡率的检测避开坏死的部分，剪取乳白色或粉红色肿瘤块，按方法1.4.1分离单细胞悬液，低渗裂解红细胞，调整细胞密度为106/mL；取1mL细胞悬液，加入70%(体积分数)乙醇5mL重悬，4℃固定30min；固定好的细胞用PBS(pH7.2)洗3次，重悬于1m