酪酪肽对重症急性胰腺炎大鼠胰腺组织no生成及in

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1、酪酪肽对重症急性胰腺炎大鼠胰腺组织NO生成及iN　　【Abstract】AIM:ToinvestigatetheeffectofPYYonNOandiNOSinratslydividedintoSAPgroupandtreatmentgroupequallyinnumber,40ratsodels.Thetreatmentgroupol/g)bysubcutaneousinjectionimmediatelyafterthefirstLarginineinjection,and0.8pmol/gPYYesaltogetheratanintervalo

2、f4h,andtheSAPgroupethodasLarginine.48hafterthebeginningofmodeling,thecontentsofNOinthehomogenatesofpancreaticheadsinedmunohistochemistrystaining.RESULTS:iNOShighexpressionrateandNOcontentinthepancreatictissuesoftheSAPgroupol/g,ol/grespectivelyinthetreatmentgroup.AndNOcontentinp

3、ancreasintreatmentgroupol/g)，此后每次间隔4h，共10次；SAP组接受同剂量的生理盐水.开始造模后48h取胰头组织制成匀浆液，用硝酸还原酶法测定NO含量；取胰尾组织用于免疫组化观察iNOS.结果：SAP组胰腺iNOS的高表达率为0.90，NO含量为（68±3）μmol/g，治疗组iNOS为0.10，NO为（22±5）μmol/g，两组比较均有显著性差异（P均＜0.05）.结论：酪酪肽对SAP有治疗保护作用，这种治疗作用的机制可能与其降低胰腺NO生成及iNOS活性表达有关.　　【关键词】胰腺炎，急性坏死性；一氧化氮；一氧化氮合

4、酶；酪酪肽　　0引言　　近年来，随着对急性胰腺炎的病理生理学研究的不断深入，除胰酶的自身消化理论外，人们还认识到白细胞过度激活学说、炎性因子的级联瀑布效应学说等多种理论，这些理论的提出对于临床重新认识该疾病并基于该理论建立的治疗体系起着较大的作用，重症急性胰腺炎（SAP）仍是当前困扰临床治疗的一个问题［1］.深入研究酪酪肽（peptideYY,PYY）对重症急性胰腺炎胰腺组织一氧化氮（NO）及诱导型一氧化氮合成酶（iNOS）表达的影响，将有助于进一步揭示PYY治疗SAP的作用及机制，为临床治疗奠定理论基础.　　1材料和方法　　1.1材料健康雄性SD大鼠

5、40只（西安交通大学医学院动物中心），体质量250～300g，随机均分成重症急性胰腺炎组（20只）和治疗组（20只）.L精氨酸，分析纯级（厦门星龙达化学试剂有限公司）；NO试剂盒（硝酸还原酶法，南京建成生物工程研究所）；iNOS一抗试剂盒和即用型SABC免疫组化染色试剂盒（武汉博士德生物工程有限公司）；酪酪肽（凤凰制药有限公司）；Leica组织切片机（德国LEICA）；DT100化学天平（北京光学仪器厂）；722分光光度计（北京医疗设备厂）.　　1.2方法参照文献［2-3］并经本实验改良的腹腔内注射左旋精氨酸法制备大鼠SAP模型，所有大鼠实验前禁食

6、12h，自由饮水.两组大鼠均分3次给予腹腔内注射60g/L左旋精氨酸(3×1.5mg/g)，间隔1h，诱导SAP模型.治疗组大鼠在第1次腹腔内注射精氨酸后立即皮下注射PYY(0.8pmol/g)，每次间隔4h，共10次.胰腺炎组大鼠皮下注射生理盐水，方法和剂量（即每次每克质量所给的酪酪肽的体积毫升数）同左旋精氨酸.在开始造模后48h剖腹，取胰头组织，准确称体质量，按质量体积比为1∶9加生理盐水制备成100g/L匀浆液，离心，取上清液-20℃保存，用于测定胰腺组织NO含量（硝酸还原酶法）；取胰尾组织用40g/L甲醛固定，用于胰腺HE染色及免疫组化观察iN

7、OS表达.均严格按说明书操作检测.根据Grewal等的方法对胰腺组织损伤进行定量评分.iNOS阳性细胞计数方法：每例切片观察50个高倍视野（×40），对每个视野的阳性细胞计数，求出每例的平均值.染色强度（阴性、弱、中、强）及阳性细胞率（≤5%，6%～30%，31%～70%，≥71%）分别积分为0，1，2，3分，iNOS免疫组化结果判定采用半定量积分法，即对每张切片的阳性细胞率及阳性细胞强度分别进行分级计分，两项之和1～3分为低表达，4～6分为高表达.　　统计学处理：计量资料数据以x±s表示，组间差异显著性采用双侧t检验法和单因素方差分析法，计数资料的组

8、间差异显著性采用双侧χ2检验法，显著性检验水准取P<0.05.　　2结果　　2.1胰腺病