乙酰肝素酶和基质金属蛋白酶9在胃癌中的表达及临

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1、乙酰肝素酶和基质金属蛋白酶9在胃癌中的表达及临【摘要】目的：探讨乙酰肝素酶(Hpa)、基质金属蛋白酶9(MMP9)在胃癌组织中表达的临床病理意义及其与胃癌进展的关系。方法：采用免疫组化SABC法检测65例胃癌、20例癌旁非瘤组织中Hpa、MMP9的表达，比较胃癌和癌旁非瘤组织以及不同肿瘤浸润深度及淋巴结有无转移胃癌患者Hpa、MMP9的阳性表达，并对Hpa、MMP9在胃癌中的表达进行相关性分析。结果：胃癌组织Hpa、MMP9阳性表达率(60.0%、55.4%)均明显高于癌旁非瘤组织(15.0%、

2、15.0%)(P均<0.01);Hpa及MMP9表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移关系密切(P<0.05);胃癌组织中Hpa和MMP9的表达呈正相关(rs=0.531，P=0.000)。结论：Hpa、MMP9在肿瘤侵袭转移中起重要作用，可作为胃癌预后判断的指标。【关键词】胃肿瘤;乙酰肝素酶;基质金属蛋白酶9;免疫组织化学[ABSTRACT]Objective:Toinvestigatetheclinicopathologicalsignificanceoftheexpressionofhepa

3、ranase(Hpa)andMMP9,anditsrelationshiptoprogressingingastriccarcinoma.Methods：TheexpressionofHpaandMMP9munohistochemistrySABCin65gastriccarcinomacasesand20adjacentnonneoplastictissues.ThepositiveratiosofHpaandMMP9atissuesandadjacentnonneoplastictissuesa

4、sphnodemetastasis.ThecorrelationanalysisofHpaandMMP9expressioningastriccarcinomatissueatissuethanthatinadjacentnonneoplastictissue(P<0.01),andtheirexpressionscorrelatedtotheinvasiondepthandlymphaticmetastasis(P<0.05),andalsoHpaexpressionatissue(rs=0

5、.531，P=0.000).Conclusion：HpaandMMP9mayplayanimportantroleintheinvasionandmetastasisofgastriccarcinomaandcanbeaprognosticindicator.　　[KEYatrixmetalloproteinase9;Immunohistochemistry　　肿瘤细胞的侵袭和转移是一个复杂的多步骤过程。乙酰肝素酶(Hpa)是目前已确定的唯一能够降解硫酸乙酰肝素蛋白多糖基因(HSPG)的蛋白酶,通过特异性降

6、解HSPG发挥其促进肿瘤细胞侵袭和转移的作用;基质金属蛋白酶9(matrixmetalloproteinases9，MMP9)是一种锌离子依赖性内肽酶，主要降解细胞外基质和基底膜中的胶原蛋白，在破坏细胞外基质和基底膜的屏障作用、促进肿瘤细胞侵袭和转移的过程中同样具有作用。HpamRNA的检测在多种肿瘤中已有研究报道，但目前联合检测Hpa和MMP9在胃癌中的表达少有报道，本实验对65例胃癌切除标本Hpa和MMP9的表达进行了检测，现报道如下。　　1材料与方法　　1.1研究对象　　选取河源市人民医院20

7、03～2005年胃癌手术切除标本65例，男性47例，女性18例，年龄35～78岁，中位年龄60岁，其中有淋巴结转移者40例。所有病例术后均经病理证实。另取癌旁非瘤组织20例作为对照，癌旁组织距离肿瘤边缘不小于5cm。　　1.2Hpa、MMP9的检测　　采用免疫组化SABC法进行检测。Hpa抗体、即用型SABC免疫组化染色试剂盒及DAB显色试剂盒购于武汉博士得生物工程有限公司;兔抗人MMP9多克隆抗体为北京中山生物技术有限公司产品，均在4℃冰箱保存。用已知的阳性切片作阳性对照，以PBS代替一抗作为阴性对照。

8、　　1.3结果判定标准　　1.3.1HpaHpa以细胞膜和/或细胞浆内出现棕黄色颗粒为阳性判断标准，以染色强度和阳性细胞比例评定阳性表达。参照Friedmann等[1]的方法，每张切片随机观察5个视野，每个视野观察100个肿瘤细胞，计数500个肿瘤细胞中阳性染色的细胞数，阳性细胞记数仅限于肿瘤细胞染色。染色强度分级如下：无着色为0，淡黄色为1，黄色及更深颜色为2;阳性细胞数分级为:阳性细胞数小于50