补肾益肺化淤法对大鼠慢性阻塞性肺病肺功能的影响

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1、补肾益肺化淤法对大鼠慢性阻塞性肺病肺功能的影响:梁喜章,曹勇,陈伟军,谭碧珠【摘要】目的探讨补肾益肺化淤法对慢性阻塞性肺病(COPD)大鼠模型肺功能的影响。方法采用气管内注射脂多糖合被动吸烟建立COPD大鼠模型,作血气分析和肺组织切片行苏木素-伊红(HE)染色,观察补肾益肺化淤法对COPD大鼠肺功能及形态学的影响。结果模型组出现咳嗽、气急、喘息等COPD典型症状;血气分析出现低氧血症、高碳酸血症;肺组织病理学可见支气管表现出不同程度的慢性炎性细胞浸润,肺泡扩大,肺泡壁断裂,部分肺泡融合形成肺大泡。治疗组给予中药汤剂后,各项

2、指标得到改善,且高剂量组优于低剂量组。结论补肾益肺化淤法可以改善COPD大鼠全身及呼吸系统症状,缓解肺功能下降。【关键词】慢性阻塞性肺病;补肾益肺化淤法;血气分析;肺组织切片 慢性阻塞性肺病(COPD),在我国每年造成的死亡可达100万人,致残人数高达500万~1000万,严重危害人们的生命健康及生活质量[1]。我们根据COPD的临床特点和中医理论,认为肺肾两虚是本病的主要发病机制,外邪侵袭是其发病的外在条件,痰淤互结是其形成的重要病理基础,于是针对本病拟定了补肾益肺化淤法。本实验采用气管内注射脂多糖合被动吸烟法建立大鼠C

3、OPD模型,观察补肾益肺化淤法对大鼠COPD的作用效果和机制,以期为临床补肾益肺化淤法治疗COPD提供实验依据。  1材料  1.1药物补肾益肺化瘀中药由补骨脂、菟丝子、党参、山药、赤芍、黄芪、葶苈子、法半夏单味中药免煎颗粒组成,购于暨南大学附属第一医院(深圳三九医药股份有限公司生产),用灭菌温蒸馏水配成相当于原生药材浓度的2.7g/ml浓缩液,置4℃冰箱备用。  1.2动物健康清洁级SD大鼠,体质量(180±20)g,3月龄,雌雄各半,购于中山大学实验动物中心,合格证号:No.0033311.SCXK(粤):2004-0

4、011,粤监证号:2008A010。  2方法  2.1COPD大鼠模型的建立将大鼠随机分成模型组,中药高剂量治疗组、低剂量治疗组、空白对照组4组,每组8只,雌雄各半。采用气管内注射脂多糖合被动吸烟方法分别对模型组、中药高剂量治疗组、低剂量治疗组大鼠进行造模:①气管内注射脂多糖:于第1,14天用1%戊巴比妥钠(50mg/kg)对大鼠进行腹腔注射麻醉,将其仰卧位固定于大鼠固定板,在光线充足的条件下,暴露声门,以拔除针芯的16号静脉套管针快速插入气管,取溶于生理盐水的脂多糖200μl(1mg/ml)通过静脉套管针快速注入气管,

5、然后将大鼠固定板垂直旋转,使脂多糖液能够均匀分布于两肺,再拔出套管针[2];②被动吸烟:将大鼠置于20cm×30cm×40cm熏箱内,隔天给予8支香烟烟熏20min,连续熏吸1个月,其中第1天和第14天不予熏吸,而进行气管内注入脂多糖。  2.2实验方法造模后,中药高剂量组按30g/kg(相当于成人常规临床用量18倍)给予补肾益肺化瘀中药灌胃;低剂量组按10g/kg(相当于成人常规临床用量6倍)给予补肾益肺化瘀中药灌胃;空白对照组和模型组,正常喂饲,灌服等容积生理盐水1次/d,连续30d。  2.3实验观察与指标检查  2

6、.3.1一般情况观察每天定时观察记录大鼠活动度、精神、皮毛及饮食、呼吸、死亡等情况。  2.3.2血气分析测定在灌药治疗结束后次日采清晨空腹血。先用100u/ml的肝素湿润1ml注射器内壁。具体操作如下:将2ml的浓肝素(12500u/ml)全部加到100ml的生理盐水瓶中混匀,用注射器吸取稀释的肝素0.2ml,将肝素来回抽动,使针管全部湿润,然后将多余的肝素全部排出,注射器死腔残留的肝素即可抗凝。注意湿润内壁后除残留于死腔(包括针尖部分)外,应尽排弃出去,排尽空气。对大鼠进行麻醉,剖开大鼠腹部,找取腹主动脉,随后用肝素湿

7、润后的1ml注射器抽大鼠腹主动脉血0.8ml左右,针头迅速刺入橡皮塞,用手搓动针筒,使血液与肝素混合,放进冰袋迅速送血气分析仪分析。  2.3.3病理标本检查进行完“2.3.2”项步骤后,腹主动脉放血处死大鼠,迅速剪下右肺中下叶,并放入中性福尔马林中浸泡,石蜡包埋切片,作苏木素-伊红(HE)染色,再将制好的切片于光学显微镜观察拍片。  2.4统计学处理用SPSS11.5统计软件进行数据处理,实验结果±s,q检验作统计学分析。  3结果  3.1一般情况在造模过程中,大鼠出现咳嗽、气促、喘息、呼吸道分泌物增多,以及体质量下降

8、、毛枯易脱、蜷卧少动、大便干硬等症状改变。经中药治疗后,气喘、咳嗽症状不同程度减轻,口鼻分泌物减少。空白对照组大鼠精神正常,活泼好动,体肥,皮毛光泽无脱落。  3.2补肾益肺化瘀中药对COPD大鼠动脉血pH、PaO2、PaCO2的影响结果见表1。中药高、低剂量组PaO2均显著高于模型组(P<0.0

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