人参皂苷rg2对alzheimer病模型大鼠学习记忆能力和老年斑形成的影响

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1、人参皂苷Rg2对Alzheimer病模型大鼠学习记忆能力和老年斑形成的影响：庄莹石博田歆崔丽【摘要】目的探讨人参皂苷Rg2对Aβ2535诱导的阿尔茨海默病（AD）大鼠模型的学习记忆能力及老年斑（SP）形成的影响。方法大鼠腹腔注射人参皂苷Rg2预防给药，大鼠双侧海马内注射Aβ2535建立AD模型，采用Morris水迷宫和被动回避性跳台反射实验检测各组大鼠的学习记忆能力；Bielschoa公司；人参皂苷Rg2采用1，2丙二醇为溶媒，由吉林大学药学院李平亚教授惠赠；银杏达莫注射液，贵州益佰制药；大鼠脑立体定位仪，日本NARISHIGE公司产品；Morris水迷宫，成

2、都泰盟机械设备厂制造；大鼠被动回避性跳台反射实验系统，中国医学科学院药物研究所产品；AX70OLYMPUS光学显微镜，日本制造。　　1.3方法　　1.3.1预防给药　　各组均采用腹腔注射方式进行预防给药。正常对照组和AD模型组给予生理盐水2ml·kg-1·d-1；银杏达莫组给予银杏达莫注射液，3.6mg·kg-1·d-1；溶媒组给予1，2丙二醇，1ml·kg-1·d-1，人参皂苷Rg2低、中、高剂量组给予人参皂苷Rg23、6、12mg·kg-1·d-1，连续给药4g/kg）麻醉后，备皮，固定于大鼠脑立体定位仪上，常规消毒皮肤，沿颅顶中线剪开皮肤，暴露头骨及前囟。参

3、照文献〔2〕，选定注射位点为前囟后3.5mm，中线旁2.0mm处。用牙科钻钻开颅骨，微量加样器吸取Aβ2535溶液4μl，垂直进针，达蛛网膜下3.0mm处，缓慢注射，5min内完成，留针5min后取出。采用相同方法进行对侧海马内等剂量药物注射。AD模型组、银杏达莫组、溶媒组及人参皂苷Rg2各剂量组大鼠海马内均注射Aβ2535，正常对照组大鼠海马内注射等体积生理盐水。清洁创面后缝合皮下组织和皮肤，对合好切口，强力碘消毒，待大鼠清醒后放回笼中常规饲养。　　1.3.3Morris水迷宫实验　　各实验组建立AD模型2，高60cm，水池中水面高约28cm；圆柱形有机玻璃平

4、台直径14cm,高25cm，位于水面下2～3cm处。室温及水温均保持在（22±2）℃；测试时以鲜牛奶加水搅浑至看不到平台为止。大鼠于测试前将头颈部用苦味酸涂黄。圆形水池分成四个象限，平台放置于第1象限的中心位置，大鼠沿1至4象限的顺序在每个象限的固定入水点处放入水池。水面上方1.5m处的摄像机连接于路径追踪系统，可追踪大鼠头颈部黄色标记，并拍摄记录其在水中的游走轨迹。通过计算机软件分析逃避潜伏期即大鼠从入水至找到并爬上平台所需的时间。Morris水迷宫实验连续7天。第1天至第6天，进行定位航行实验，按1、2、3、4象限的顺序在入水点处将大鼠头朝池壁轻轻放入水中，记录

5、120s内的逃避潜伏期，取其平均值作为学习能力指标。第7天为空间搜索实验，撤掉平台，仅在一固定象限将大鼠放入水中，记录120s内大鼠穿过原平台位置的次数，作为记忆能力的指标。　　1.3.4被动回避性跳台反射实验　　水迷宫实验结束后进行。第1天将大鼠放入跳台仪的反应箱中,适应环境3min后通以36V交流电,大鼠受到电击后，多数跳上绝缘平台逃避电击。大鼠可能再次或多次跳至铜栅上后又跳回绝缘平台，如此训练5min，记录大鼠的跳台次数，又称错误次数，以此作为学习能力的指标。在此基础上，24h后重新测试,先将大鼠放在绝缘平台上，在铜栅上通电并开始计时，记录大鼠第一次跳下平台所

6、用的时间作为潜伏期，以5min内跳下的次数作为错误次数，将上述两项作为大鼠记忆能力的指标。　　1.4统计学分析　　行为学结果数据以x±s表示，两组间差异用SPSS10.0统计学软件进行t检验分析。　　2结果　　2.1Morris水迷宫实验　　定位航行试验：各组大鼠在前3天的学习中，逃避潜伏期并无明显差异。第4天至第6天，与正常对照组相比AD模型组大鼠逃避潜伏期明显延长(P＜0.01）。与AD模型组相比，溶媒组无显著性差异；银杏达莫组、人参皂苷Rg2各剂量组逃避潜伏期均明显缩短(P＜0.01或P＜0.05)。人参皂苷Rg2各剂量组与银杏达莫组相比，第4天时，人参皂苷R

7、g2低剂量组大鼠的逃避潜伏期显著延长(P＜0.01），其余均无明显差异。空间搜索试验：与正常对照组大鼠相比，AD模型组大鼠穿台次数明显减少(P＜0.01)。与AD模型组相比，溶媒组大鼠穿台次数无显著差异；银杏达莫组、人参皂苷Rg2中、高剂量组大鼠穿台次数均明显多于AD模型组(P＜0.05)；人参皂苷Rg2低剂量组大鼠穿台次数虽高于AD模型组，但无统计学意义。人参皂苷Rg2各剂量组大鼠穿台次数均低于银杏达莫注射液组，尤其是人参皂苷Rg2低剂量组更为明显(P＜0.05），见表1。表1各组大鼠Morris水迷宫实验结果(略)　　2.2被动回避性跳台反射实验　　与正常对