重金属pb、cd胁迫下龙须菜的富集效应及差异

重金属pb、cd胁迫下龙须菜的富集效应及差异

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1、硕士学位论文题目:重金属Pb、Cd胁迫下龙须菜的富集效应及差异蛋白质组学的初步研究英文题目:PreliminarystudiesonbioaccumulationeffectsanddifferentialproteomicsofGracilarialemaneiformisunderPbandCdstresses姓名:屈肖肖学号:10908065所在学院:理学院导师姓名:杜虹专业:生物化学与分子生物学入学日期:2009年9月答辩日期:2012年6月学位论文原创性声明本论文是我个人在导师指导下进行的工作研究及取得的研究成果。论文中除了特别加以标

2、注和致谢的地方外,不包含其他人或其它机构已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体,均已在论文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律责任由本人承担。作者签名:日期:年月日学位论文使用授权声明本人授权汕头大学保存本学位论文的电子和纸质文档,允许论文被查阅和借阅;学校可将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或其它复制手段保存和汇编论文;学校可以向国家有关部门或机构送交论文并授权其保存、借阅或上网公布本学位论文的全部或部分内容。对于保密的论文,按照保密的有关规定和程序处理。作者签名:导师签名:日

3、期:年月日日期:年月日汕头大学硕士学位论文摘要随着现代工业的发展以及人类活动的不断增加,我国沿海局部地区和养殖区沉积物中的重金属污染严重,已经成为了一个重大的风险问题。大型海藻是生态系统中的初级生产者,在海洋生态系统和环境中扮演者重要角色。龙须菜作为我国沿海特别是山东、江苏和广东各省广泛栽培的一种经济型宏藻,具有重要的经济和生物学价值。因此,研究重金属在龙须菜体内富集特征、效应和龙须菜对重金属的响应机制具有重要意义。本研究以龙须菜为材料,通过设置不同浓度重金属探讨了龙须菜对Pb、Cd重金属富集效应,并采用蛋白质组学手段,分离鉴定了Pb、Cd胁迫

4、下差异表达蛋白,进一步阐述了龙须菜对重金属Pb、Cd毒害的响应途径。获得了以下结果:1.在0.05mg/L时,藻体内Pb、Cd累积量分别36.44和16.39μg/gdrywt;在2mg/L时,藻体内Pb、Cd累积量分别827.56和217.94μg/gdrywt.在0.05和2mg/L时,发现龙须菜对Pb、Cd的富集能力是镉的2.35倍和3.96倍;在2mg/L时,龙须菜体内微量元素Fe、Mn比对照组含量低(p<0.05);结果表明重金属Pb、Cd处理导致龙须菜体内微量元素的下降,可能使藻体的叶绿素a含量和可溶性蛋白含量下降,使藻体自身的光合

5、作用和生长受抑制,影响了龙须菜的经济价值。2.采用pH4-7、11cm的IPG胶条及12%的SDS-PAGE胶分离Pb胁迫下龙须菜蛋白,经过PDQUEST软件分析发现26个显著性差异点,经过质谱和NCBI数据库比对后,确定了14个蛋白。通过NCBI等生物信息学公共数据库,在深入分析了铅响应差异蛋白的分子功能和细胞内定位的基础上,将这些差异蛋白分为光合作用相关的蛋白、能量代谢相关蛋白、抗氧化相关蛋白、信号转导相关蛋白、碳合成和代谢以及其他相关蛋白等6个大类。3.采用pH4-7、11cm的IPG胶条及12%的SDS-PAGE胶分离Cd胁迫下龙须菜蛋

6、白,经过PDQUEST软件分析发现18个显著性差异点,经过质谱和NCBI数据库比对后,确定了10个蛋白。通过NCBI等生物信息学公共数据库,在深入分析了镉响应差异蛋白的分子功能和细胞内定位的基础上,将这些差异蛋白分为光合作用相关的蛋白、能量代谢相关蛋白、碳合成和代谢4个大类。4.结合鉴定的蛋白质的功能、生理指标和代谢途径,龙须菜对重金属胁迫可Ⅰ汕头大学硕士学位论文能的响应途径如下:首先重金属进入藻体细胞后,诱导氧自由基大量产生。其次,重金属使藻体藻红素降解为藻胆体蛋白肽段和藻体内的叶绿素a下降。而叶绿体中的细胞色素b6/f铁硫蛋白亚基和1,5-

7、二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶大亚基以及1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶大亚基表达前体蛋白表达量下降。还有,叶绿体和细胞质中ATP合成酶α亚基表达量提高,以通过三羧酸循环产生更多的能量来应对重金属胁迫。再次,藻体提高细胞质中的Hsp70和蛋白水解酶表达量,及时纠正蛋白质错配、折叠和降解已经被破坏的蛋白来维持细胞内的生理环境。关键词:铅、镉胁迫,龙须菜,双向电泳,质谱鉴定Ⅱ汕头大学硕士学位论文AbstractWiththeincreasinghumanactivityandthedevelopmentofmodernindustry,heavyme

8、talpollutioninthecoastalregionandtheculturezonesedimentshasbecomeamajorrisk

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