dns法测定黄柏中总糖的含量

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1、DNS法测定黄柏中总糖的含量作者：李卫彬，阳文辉，黄锁义【摘要】目的探讨黄柏中总糖的提取及其影响因素。方法利用6mol/L盐酸水解提取黄柏中总糖，用DNS法确定最佳条件及进行含量测定。结果最佳条件为：检测波长480nm，显色剂用量3ml，沸水浴中保持5min，黄柏中总糖含量为11.18％，RSD为1.14%(n=5)。结论本法测定黄柏中总糖，精密度、灵敏度都能符合食品分析的要求，分析结果可靠。【关键词】黄柏；DNS法；总糖　　Abstract:ObjectiveToinvestigatetheoptimizedproceduresforextractingtotalsugarf

2、romphelloodendronandtheaffactingfactors.MethodsThetotalsugarol/Lhydrochloricacidassolventfromphellodentron,3,5-dinitrosalicylicacid(DNS)colorimetryinetheoptimizedconditionandthequantityizedproceduresdetectinglcolor-developingagent,sunkintheboilinginutes.Thequantityoftotalsugarextractedfromph

3、ellodendronethodtodeterminethetotalsugarextractedfromphellodendron,theresultscanreachtothestandardsofprecisionandsensitivityinfoodanalysis.　　Keyetry;totalsugar黄柏是芸香科植物黄皮树(PhellodendronChinenseSchnEid)及黄柏树(P.AmurenseRupr.)除去栓皮的干燥树皮，前者习称“川黄柏”，后者习称“关黄柏”［1］。本品始载于《神农本草经》，原名“檗术”，列上品。“主五脏肠胃中结热、黄疽、肠

4、痔、止泻痢、女子漏下赤白、阴伤蚀疮”，历来作为清热燥湿、泻火解毒、退虚热的常用中药［2］。黄柏产地主要分布陕西、甘肃、湖北、广西、四川、贵州、云南等省区，具有清热解毒，清下焦湿热、泻火，治湿热引起的痢疾、黄疸、白带、痔疮便血，阴虚火旺引起的骨蒸劳热，目赤耳鸣、盗汗、口舌生疮等功效，并有抑菌等作用。黄柏总糖的测定未见　　2.2最大吸收波长的确定　　分别取样品液和对照品液各1ml加入25ml容量瓶中，加水至各容量瓶中液体的总体积为2.5ml，再精密加入3mlDNS试剂，混匀，于沸水浴中煮沸5min，取出立即冷却，加水至刻度，摇匀。以2.5ml蒸馏水替代标准液作试剂空白。在722型可

5、见分光光度计上于400～600nm处扫描，结果对照品与样品均在480nm处有最大吸收，故确定480nm为测定波长。　　2.3标准曲线的制作　　分别精密加入0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4ml葡萄糖对照品溶液，加水至各容量瓶中液体的总体积为2.5ml，再精密加入3mlDNS试剂，混匀，于沸水浴中煮沸5min，取出立即冷却，加水至刻度，摇匀。以蒸馏水作试剂空白，在480nm处测定吸光度。　　3结果　　3.1吸光度测定结果　　根据表1得吸光度和质量浓度的回归方程：A=0.2391C-0.02486，r=0.9991。结果表明葡萄糖在0.2～1.4mg/m

6、l与吸光度呈良好的线性关系。表1722型可见分光光度计测定吸光度（略）　　3.2精密度试验　　取同一总糖供试品溶液0.2ml，按2.2项下同法操作，连续测定5次吸光度，RSD为0.420％，表明精密度良好，结果见表2。表2精密度试验结果（略）　　3.3重现性试验　　取同一总糖供试品溶液5份，分别按2.2项下操作，连续测定5次吸光度，RSD为4.13%，表明本法重现性良好，结果见表3。表3重现性试验结果（略）　　3.4稳定性试验　　分别精密吸取总糖供试品溶液0.2ml，分别在0、10、20、30、60min测定。结果，总糖供试品溶液测得质量分数的RSD分别为3.73%(n=5)。

7、表明总糖供试品溶液在60min内是稳定的，结果见表4。表4稳定性试验结果（略）　　3.5加样回收试验　　精密吸取已知量的黄柏干燥样品粉末1g，平分5份，分别精密添加已知质量浓度葡萄糖对照品适量。按总糖样品液的制备方法分别制备样品液，按标准曲线项下方法测定，计算回收率，结果总糖样品液平均回收率为102.7%，RSD为0.36％。　　3.6样品测定　　精密吸取各供试样品溶液0.2ml置25ml容量瓶中，加蒸馏水定容至刻度。吸取该样品1ml置10ml容量瓶中，其余操作按2.2项下同法操作，测定吸光