iga肾病小鼠模型的建立与鉴定

《iga肾病小鼠模型的建立与鉴定》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、IgA肾病小鼠模型的建立与鉴定【摘要】目的建立小鼠IgA肾病模型，为临床研究IgA肾病提供实验依据。方法昆明种小鼠30只，分为正常对照组(10只)、模型组(20只)。采用口服牛血清白蛋白(BSA)联合尾静脉注射葡萄球菌肠毒素B(SEB)的方法制作小鼠IgA肾病模型。第12周末收集新鲜尿液，显微镜下尿红细胞定性检验;摘眼球取血，检测血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN);光镜法观察肾小球系膜细胞及基质变化;电镜法检测系膜区有无电子致密物沉积;免疫荧光法观察系膜区IgA沉积情况。结果第12周末，模型组小鼠均出现不同程度的

2、血尿;Scr、BUN较正常对照组显著增高(P<0.01);光镜下系膜细胞及基质明显增生;电镜下系膜区电子致密物沉积;免疫荧光示系膜区大量的IgA沉积，而正常对照组则无上述表现。结论IgA肾病小鼠模型效果良好，病理、电镜及临床指标与人类IgA肾病临床病理相似。【关键词】IgA肾病;模型;血尿;免疫荧光;小鼠　　Abstract:ObjectiveToestablishmousemodelofIgAnephropathyinordertoprovideexperimentbasisfortheclinicalr

3、esearchofIgAnephropathy.Methods30Kunmingmicelyassignedintothecontrolgroup(n=10)andthemodelgroup(n=20).MousemodelofIgAnephropathyethodoforalintakeofbovineserumalbumin(BSA)togetheraturia;bloodinetheserumcreatinine(Scr)andbloodureanitrogen(BUN);thechangesofmesan

4、gialcellsandmatrixinthekidneysicroscopy;electronmicroscopyployedtodetectelectron-densedepositsinthemesangialarea;theexpressionofIgAdepositioneasuredbyimmunofluorescencestaininginthemesangialarea.ResultsBytheendof12aturiainmodelgroupmice.BUNandScrlevelsinmodel

5、groupalcontrolgroup(P<0.01).Lightmicroscopyshoesangialcellsandmatrix.Electronmicroscopydemonstratedahighelectrondensedepositioninthemesangialarea,alitiesalcontrolgroup.ConclusionThemousemodelofIgAnephropathyproveseffective,icroscopicandclinicalparameterssi

6、milartotheclinicalpathologyofhumanIgAnephropathy.　　Keyodel;hematuria;immunofluoresencestaining;mice　　IgA肾病世界范围内广发的一种系膜增生型肾小球肾炎，占原发性肾小球疾病的10%～20%，中国、日本、新加坡等发病率较高，其中有20%～30%的患者进展到肾衰[1]。建立与人类临床病理生理相似的IgA肾病动物模型，对研究IgA肾病的发病机理、临床治疗等具有重要的作用。本实验采用口服牛血清白蛋白联合尾静脉注射葡萄球菌肠

7、毒素的方法制作IgA肾病小鼠模型，为进一步探索IgA肾病提供实验依据。　　1材料和方法　　1.1实验材料　　1.1.1实验动物昆明种小鼠30只，鼠龄(10-12)周，体重20～26g，雄性，动物编号SCXK(苏)2005-0005，由徐州医学院实验动物中心提供。　　1.1.2主要实验试剂和设备牛血清白蛋白(BSA,上海明睿生物有限公司，产品批号RF101-010);葡萄球菌肠毒素B(SEB,北京博迈世纪生物技术有限公司);兔抗小鼠IgA抗体(北京博奥森生物技术有限公司，抗体货号bs-0774R);异硫氰酸荧光素(

8、FITC)-标记的羊抗兔IgG(Milliporecorporation);MicromHM340石蜡切片机;光学显微镜(日本Carton);日本SysmexCA-1500自动生化分析仪;电镜(H-600)，切片机(LKBV型)。　　1.2实验方法　　1.2.1酸化水的制备新鲜的双蒸水中加入盐酸，浓度为8.5mmol/L。即1000ml双蒸水中加入10%盐酸3.2ml。1