病毒感染性疾病的检验诊断及方法

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1、病毒感染性疾病的检验诊断及方法邱一凡(黑龙江省大庆油田总医院163000)【中图分类号】R511【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2012)47-0133-02病毒性疾病检验诊断应首先根据临床特征和流行病学资料，初步判断可能感染的病毒。然后根据可疑病毒的生物学特点、机体免疫应答和临床过程，结合患者当前所处的时机，确定检验诊断的方法。有些病毒感染潜伏期较短，发病时机体免疫系统尚未完全应答，没有抗体产生，因此可选择测定病毒颗粒、病毒抗原或病毒核酸。对于潜伏期超过10天的病毒感染，可检测特异性的IgM抗体来进行早期

2、快速诊断、IX别初次和再次感染。对可在机体内形成持续感染或潜伏感染的病毒，可检测急性期和恢复期双份血清的IgG抗体滴度有无4倍以上升高，或直接检测病毒核酸。对原因不明，可能有新病毒感染时，应采集相应部位的标木进行病毒分离，同时应采取双份血清以确认分离的病毒为病原病毒。对同一症状可由多种病毒引起的情况，应同时检测几种相关病毒的病毒颗粒、抗原或抗体，对由多个型别组成的病毒可测定它们的共同抗原。病毒感染的实验室检查括病毒分离与鉴定、病毒核酸与抗原的直接检出以及特异性抗体的检测。1标木的釆集与送检临床医师根据流行病学资料，疾病的症

3、状与体征综合判断可能为何种病毒感染，留取适宜的标木送检。实验结果对诊断病毒感染的价值，很大程度上取决于标木的采集和处理的方式是否恰当。正确采集标木，及时运送和处理，是极为重要的。1.1采集标木的时间尽可能在发病的初期，急性期或患者入院的当天进行。疾病后期由于机体产生免疫力，开始清除病毒，使病毒数量减少或消失，不易检出。1.2标木种类的选择根据临床感染的症状及流行病学资料，判断可能感染病毒种类，选择相应部位采取标本。处理标本时要考虑病毒的生物学特性，如奋包膜病毒冻融易被火活。某些病毒如麻疹病毒吸附茬白细胞上，为了奋效分离病毒

4、，血液标本应加抗凝剂。1.2.1心脏疾病可采取咽拭子、粪便、心脏组织或心包液标本。分离相关的肠道病毒，包括埃可病毒、柯萨奇A组和B组病毒，也可采取血液标本进行血清学诊断。1.2.2中枢神经系统感染可采取咽拭子、粪便标本、脑脊液标本进行肠道病毒的分离；采取咽拭子、脑膜组织分离竽纯疱疹病毒，亦可采取脑脊液进行PCR检査；采取咽拭子，尿液、脑脊液或唾液标本用于分离腮腺炎病毒。另外，虫媒病毒、人类免疫缺陷病毒、麻疹病毒、狂犬病毒等也可引起中枢神经系统的感染，可通过血清学或测定抗原、核酸来诊断。应在入院时采取第1次血标本5〜10ml

5、,第2次在2〜3周后或出院前采取，用于双份血清学诊断。1.2.3先天或新生儿感染采取咽拭子、尿液分离人类巨细胞病毒，血清学方法测定IgM有助于诊断；采取咽拭子、皮肤、尿液、脑脊液、粪便或直肠拭子分离肠道病毒；采用喉拭子、皮损、尿液标本分离HSV,脑脊液标本用于PCR测定，皮损标本亦可用直接荧光抗体测定，测定血清中IgM有助于诊断。采集咽拭子、皮损等标本用于分离带状疱疹病毒。HBV、HIV和微小病毒B19也可引起宫内感染，可以进行血清学诊断。1.3常见标本的采集方法1.3.1血液以无菌操作抽取抗凝血10ml。抗凝剂可选用10

6、0U/ml肝素钠，常用于分离CMV和HSV,亦可用于虫媒病毒、EBV、HIV-1及新生儿肠道病毒的分离；如欲进行PCR检测核酸，则需使用EDTA抗凝；为了血清学检查的需要，应抽取另一管5ml血液，不抗凝送检。1.3.2脑脊液以无菌手续抽取脑脊液1〜2ml,置无菌试管内，在冰浴中应立即送检。在4°C可存放72小吋。常用于分离柯萨奇病毒、ECHO病毒、肠道病毒、腮腺炎病毒等。1.3.3宫颈或阴道拭子采取病灶部位分泌物，将拭子置运送液中•，如无病损部位，则清理宫颈U粘液，将拭子伸入宫颈约lcm停留5秒以上取出，置运送液中4°C冰

7、浴立即送检。常用于HSV、CMV的分离。1.3.4粪便标本取2〜4g粪便标本在无菌的容器中，加8〜10ml运送液立即送检，常用于腺病毒、肠道病毒的分离，亦用于轮状病毒的分离及抗原检测。2病毒检验的结果评价通过实验手段，从标本中获得奋关病毒感染的证据，从而确定病毒感染和临床疾病之间的因果关系，是病毒检验诊断的0标。通过分离和鉴定获得致病性病毒，发现病毒感染的特异性改变，如机体内产生特异性抗体、细胞内包涵体的形成等，即说明奋病毒感染的存在。由于各种病毒感染在不冋机体内导致的结局差别很人，因此感染病毒的临床意义必须结合流行病学资

8、料、临床表现、病毒种类及机体的病理变化作综合分析才能判定。对于一些引起急性感染性疾病的病毒而言，在疾病流行季节从人体内各种组织、脑脊液、血液、水疱液中分离到的病毒的致病特征，与患者的临床特征相符吋，可作出病原学诊断；或患者急性期和恢复期双份血清中相应的特异性抗体滴度有4倍以上的升高，也可得出病原学诊断，