反向calmagite

《反向calmagite》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、反向Calmagite血清镁测定常用甲基麝香草酚蓝、Calmagite及邻甲酚酞络合酮等方法，但均受脂血、胆红素等因素的干扰，致使该类标本结果偏高，本文运用Calmagite-EDTA分光光度法(反向法)克服了上述缺点。1原理在碱性条件下，Calmagite与镁生成红色复合物，加入EDTA后镁与其生成EDTA-Mg络合物，使Calmagite游离，吸光度值降低，其降低值与镁离子浓度成正比，而克服了本底因素的影响。2材料与方法2.1试剂上海Trace试剂盒(Trace公司Calmagite镁测定试剂盒)，包括：2.1.1

2、Calmagite试剂：含Calmagite0.14mmol/L，KCl77mmol/L，PVP0.03mmol/L。2.1.2碱性缓冲液：K1.5mmol/L，KOH14.3mmol/L。2.1.3应用液：临用前Calmagite液与碱性缓冲液等量混合即可。2.1.420mmol/LEDTANa2溶液。2.2仪器751G分光光度计。2.3方法测定管(U)、标准管(S)及空白管(B)中依次加血清、1.5mmol/L镁标准液及蒸馏水各30l，加应用液3.0ml，混匀，540nm波长比色，B管调零，记录各管吸光度值(A)。

3、各管加20mmol/LEDTANa2溶液10l，混匀，B管调零，按上比色，记录吸光度值(A2)。计算：Mgmmol/L=(UA1-UA2)/(SA1-SA2)1.52.4原法按试剂说明书进行。3结果与讨论3.1EDTANa2浓度选择空白管中加入5mmol/LEDTANa2溶液5l后吸光度值轻微降低，可能系试剂中含有微量镁的缘故。1.5mmol/L镁标准液加入10mmol/LEDTANa210l后吸光度值不再降低，至100mmol/L时仍无变化，故本文选用20mmol/LEDTANa2溶液已能满足需要。3.2稳定性镁与C

4、almagite的络合反应瞬间完成，吸光度值至少60min内无变化。加入EDTANa2后其络合物立即分解，吸光度值迅速降低至本底值，60min内无变化，其结果满意。3.3精密度取2份不同浓度的血清，平行测定镁浓度10次，批内CV值分别为1=0.87mmol/L，s1=0.028，CV1=3.22%及2=0.92mmol/L，s2=0.039，CV2=4.24%。批间1=0.872mmol/L，s1=0.043，CV1=4.93%及2=0.918mmol/L，CV2=5.33%。3.4回收率于镁浓度为0.92mmol/L

5、的混合血清中分别加入浓度分别为0.2，0.6及0.8mmol/L的镁标准，测得回收值依次为0.195，0.602及0.825mmol/L，回收率分别为97.5%，100.3%及103.1%。3.5方法学比较用反向法及原法同时测定10份外观正常血清，其结果分别为反向法=0.884mmol/L及原法=0.897mmol/L，P0.05。10份TG浓度在3.4～23mmol/L的血清标本：(s)反向法=0.8170.21mmol/L，原法=1.320.47，P0.05。脂血中镁浓度原法明显高于本法。10份脂血标本用乙醚去脂后

6、再测，其结果为(s)原法=0.8230.29mmol/L，与反向法比较P0.05。脂血所致的结果增高，是由于样本本底干扰所致。综上所述，用反向法测定血清镁浓度方法简便、快速、可有效地排除本底对吸光度的干扰，适用于脂血、母乳、奶制品、尿液等样本镁离子浓度测定，日常工作中对不适应直接比色法的标本最好用该法求得准确结果。