t0901317对急性肺损伤细胞凋亡的探讨

《t0901317对急性肺损伤细胞凋亡的探讨》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、T0901317对急性肺损伤细胞凋亡的探讨1.郴州市第一人民医院麻醉科湖南郴州423000；2.南华大学第二附属医院麻醉科湖南衡阳421001摘要：目的：探讨T0901317对急性肺损伤细胞凋亡的可能机制。方法：将54只雄性SD大鼠按随机序列表随机分为正常对照组（NC组）、脂多糖处理组（L组）和LPS+T0901317干预组（LT组），测定动脉血气和肺组织湿/干比值，检测肺组织内Api6的表达水平，检测CD68在肺组织内的表达情况来观察巨噬细胞的存活量，脱氧核糖核酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记技术检测大鼠肺组织中细胞的凋亡情况。结果：L组CD68显著减

2、少，凋亡指数（AI）显著增加（P<0.05），而LT组比L组相比，CD68表达明显增加，凋亡指数明显下降（P<0.05）；L组和LT组Api6表达均比NC组明显减少（P<0.05），而LT组明显比L组表达有所增加，差异有统计学意义（P<0.05）。结论：1、LPS所致AU大鼠肺组织比正常肺组织相比Api6表达明显减少。2、肝X受体激活后通过上调肺组织Api6的表达而减轻急性肺损伤，其机制可能是Api6参与调控肺组织中细胞的凋亡，主要是巨噬细胞。关键词：急性肺损伤；T0901317；凋亡抑制因子6;TUNEL检测急性肺损伤是各种直接和间接致伤因素导致的肺泡上皮细

3、胞及毛细血管内皮细胞损伤，可造成弥漫性肺间质及肺泡水肿，导致急性低氧性呼吸功能不全。木实验用肝X受体激动剂T0901317对大鼠进行干预，用LPS诱导ALI,造模成功后，观察大鼠AU的情况，肺组织中Api6的表达情况以及细胞凋亡情况，为进一步探讨LXRs对ALI抗凋亡的可能机制。1材料与方法1.1主要试剂和仪器LPS、T0901317、兔抗大鼠Api6多克隆抗体、羊抗兔IgG-HRP、兔抗鼠β-actin、蛋白分了•量标准、丽春红炎色试剂、BCA蛋白定量试剂盒、超速离心机、垂直电泳仪及转膜系统及其他试剂。1.2动物模型制作将54只SD大鼠随机分为三组

4、。禁食后腹腔注射麻醉，对L组和LT组的36只大鼠进行造模，而LT组的大鼠在造模前30min，注入T0901317,固定导管以防脱出后，冋笼自由活动。NC组的18只大鼠分别缓慢注入等体积的生理盐水。用IL-1620型血气分析仪测定动脉血氧分压等指标；用Westerblot检测Api6蛋白水平表达；用肺组织石蜡切片用链霉菌抗生物素蛋白-过諷化物酶连接法(SP法)进行免疫组化染色。光镜下观察肺组织中的CD68的表达情况。1.8统计学处理采用统计学软件SPSS软件包对研宄数据进行处理，计数资料用t检验，组间进行x2检验，P<O.O5表示差异有统计学意义。2结果2

5、.1大鼠肺组织W/D比值的变化L组各吋相点的W/D比值均较NC组显著升高，LT组各吋相点的W/D比值均较L组相应时相点显著下降(P<0.05),稍高于NC组。2.2大鼠动脉血氧分压的变化aL组大鼠的PaO2显著低于NC组，LT组，各吋相点的PaO2均较L组相应时相点有升高(P<0.05)o2.3大鼠肺组织Api6蛋白的表达L组Api6蛋白表达水平均比NC组相应吋相点降低，LT组Api6蛋白表达水平比L组相应时相点升高，但低于NC组(P<0.05)o2.4大鼠肺组织细胞凋亡情况通过TUNEL法检测细胞凋亡显示，NC组偶见凋亡细胞，L组凋亡细胞量

6、比NC组相应时相点显著增加，II随作用时间延长，凋亡细胞量增多；LT组凋亡细胞量比L组相应时相点明显降低，但高于NC组(P<0.05)见表1。2.5免疫组化检测CD68在肺组织中的表达情况肺组织石蜡切片经免疫组织化学方法检测CD68的表达,NC组肺组织呈现弱阳性低表达；L组在肺泡和终末支气管的周边CD68大量表达，表面巨噬细胞明显激活，以4h最为显著；同L组相应吋相点比较，LT组CD68在肺组织中表达显著提高。3讨论本研宄实验提示，ALI吋，HE染色显示炎症加重，但巨噬细胞存活量随时间延长而明显减少，肺损伤程度加深。而肝X受体激动剂T0901317干预后

7、，炎症显著减轻，巨噬细胞表达增加，肺损伤明显减轻。急性肺损伤中肝X受体可通过延迟AM的凋亡，减轻炎症反应，改善肺组织功能。因此，我们认为ALI发病过程中，引起各种细胞的凋亡，而肝X受体激动剂T0901317激活LXRs,通过不同的途径维持肺组织中炎症细胞和免疫细胞的动态平衡，减轻炎症反应，保护肺组织。在适当的吋候延迟AM凋亡，保证AM存活数量，即可减轻炎症，又可保护肺组织，从而延缓ALI的进展。4结论1.LPS所致AU大鼠肺组织比正常肺组织相比Api6表达明显减少。2.肝X受体激动剂T0901317可减轻肺组织中细胞凋亡。3.肝X受体激活后通过上调肺组织Api

8、6的表达而减轻急性肺损伤，艽机制可能是