物理因素和温度对布病凝集实验的影响

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1、物理因素和温度对布病凝集实验的影响李志娟（山丙省忻州市疾病预防控制中心山丙忻州034000）【摘要】目的：观察温度和时间对布病虎红平板凝集实验（RBPT）的影响。方法：将现采集的710份疑似布病患者的血清分别置于温室（19一25）度、平均（35+1）度恒温培养箱和（55-1）度水浴箱中，在放置不同的时间（0.5h、lh、2h、8h和24h）后，分别进行BPT实验，同时对每份血清进行试管凝集实验（SAT），观察并进行记录实验结果。结果：血清与温度和时间成反比例关系，放置血清的时间越短，温度越低，假阳性率越高。结论：血清学检测可排除温度和时间等物理因素对患者造成的假阳性率，为临床提供

2、可靠的检验依据。【关键词】布病凝集实验温度物理因素【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2013）04-0377-02布氏杆菌病由布氏杆菌引起的人畜共患传染病，流行于内蒙古、吉林、黑龙江、新疆、丙藏等牧K，主要传染源为患病的牛羊猪等病畜，病原菌主要通过体表和粘膜进入体内，临床表现为夜间或凌晨大汗淋漓，关节疼痛主要累及较大的关节，呈游走性疼痛。睾丸炎是男性患者的常见表现，有肝脾淋巴结肿大,易发展为慢性。无症状型感染见于肉食包装工人、兽医，这些人可检测出高效价的布氏杆菌血清抗体；急性布氏杆菌病潜伏期5—10天，起病急，发热，体温在38到40度，伴畏寒；

3、多汗；肌肉酸痛，约半数有肝脾肿大。现就对静脉釆集的700多份布病疑似病例血清做布病抗体检测。布病的检测方法有两种：虎红平板凝集实验（RBPT）和试管凝集实验（SAT）。试管凝集实验的判定标准以1:100为阳性。疑似病例的血清经不同时间和温度的处理后，再进行虎红平板凝集实验,从而降低假阳性率。虽然RBPT具有方法简便、快捷，易于操作和结果便于观察且漏检率极低的优点，但易于出现假阳性率，故临床上需要借助SAT实验来进行确认。现对基层所采集的710份样品进行检验，以分析物理因素和温度对布病凝集实验的影响。1监测对象和方法1.1监测对象对采集的710份样品进行检验，患者均为忻州、代县、繁

4、峙及偏远山区与牛羊密切接触者。1.2监测方法检验方法和步骤均按照《布鲁氏菌病诊断标准及处理原则》（GB15988-1995）规定标准进行。试剂由中国疾病预防控制中心传染病防制所提供，在有效期内使用。静脉采集疑似患者全血5毫升，分别置于4支塑料管中，1支放于平均（35+-1）度恒温箱（用于SAT实验），另3支（用于实验）分别置于室温（17—23）度，平均（35+-1）度恒温培养箱和56度或54度水浴箱中，分别在放置0.5h、lh、2h、8h和24h进行RBPT实验。2结果710例布病疑似患者血清（静置吋间和温度不同）RBPT结果，见表1。710份血样的检测结果表明，SAT大于或等于

5、1:100（++）共300余份。3结论放置患者吋间越长，温度越高，假阳性率越低。尽可能采集患者空腹血清。在仅使用RBPT—法来确诊的基层单位泣将初次筛选出的阳性患者血清置于平均（35+-1）度恒温培养箱中，次日进行重复试验，以减少用虎红平板试验造成的假阳性。凡是RBPT试验中凝集颗粒呈片状的，一般为假阳性；颗粒凝集均匀、规则、清澈，一般为阳性。静置血清标本宜放于55度水浴箱中进行火活，吋间不应放置太长。样品在预处理过程中，经常会到基层乡镇进行布病的流行病学调查及采样。这就出现了个血液标本的运输和保管的问题。血液标本在运输过程中，如长吋间晃动，易使血液发生溶血，等冋到实验室也不能分

6、离出适合检验中的样品血清了。最好是对已把采集到的全血样本用离心机进行分离，将血液与分离好的血清分开密闭保存。待检血清中纤维蛋白，药物浓度干扰检验结果，血清中如含纤维蛋白原过多会使试管凝集。经过治疗后或治疗期间血清凝集不明显，在炎热的夏季，血液样本在做凝集实验前从冰箱中在室温下放置放置一段吋间再离心。试管凝集层液100%清亮，++++凝集，液体50%凝集，23%清亮，不凝集。在实际工作中会出现未摇动时，清液100%透明，经轻微摇动后上清液70%澄清，有块状凝集，判定为++或+。未摇动时，呈浑浊现象，并iL不再有沉淀出现，结果是阴性。布病检验过程中容易出现微生物气溶胶并需要注意的试验

7、过程有以下方面：①高速离心后易产生微生物气溶胶。不应马上打开离心机的顶盖，应放置15〜20rain后再取出血清。有条件的离心过程应放在生物安全柜中进行。使用带有盖子的玻璃试管采取血样。②用吸管进行血清稀释时易产生微生物气溶胶。吹吸稀释液应该轻缓，不要急躁，吹吸次数应在3次以上。全部实验完成后，应对试验室进行紫外线灯的消毒照射。对710例疑似病人进行的血清学检测结果显示：把握好温度和吋间，排除干扰因素诊断准确率达到95%。用先进的检验方法尽可能排除干扰因素对病人造成的假阳性，更好地