作为连环素家族的新成员，在细胞黏附和信号转

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1、作为连环素家族的新成员，在细胞黏附和信号转作为连环素家族的新成员，在细胞黏附和信号转导中起着至关重要的作用[1-4]。　　它的基因有21个外显子，根据其剪切的不同，理论上p120ctn可产生32个亚型，所有的亚型都具有相同的犰狳(Armadillo)重复序列，只是C端或N端不同[5]。根据其起始翻译密码的不同人类的p120ctn可分为4种亚型，但各亚型的生物学功能至今尚未阐明[6,7]。目前在人肺癌中的研究很少，其在肺癌中表达的亚型种类及表达情况仍不清楚。本研究采用免疫荧光和分期标准[9]：Ⅰ期13例，Ⅱ期10例，Ⅲ期27例。　　方法冰冻组织切片和免疫荧光染色观察取新鲜肺癌和癌旁正常肺

2、组织标本OCT包埋，快速冷冻后制成5μm厚的切片，贴附于涂有多聚赖氨酸的载玻片上，冷丙酮固定10min后晾干备用。　　固定后的冰冻组织切片用0.2%TritonX-100处理15min。正常非免疫动物血清37℃孵育30min。滴加p120ctn鼠抗人单克隆抗体（1:400，BDTransductionLaboratories），4℃孵育过夜。磷酸盐缓冲液（PBS）冲洗，每次5min，重复三次。滴加罗丹明标记羊抗鼠荧光标记二抗（1:200，北京中杉），37℃孵育30分钟。PBS冲洗，每次5min，重复三次。DAPI(1:200，SIGMA公司)核复染30min；PBS冲洗；50%甘

3、油封片，荧光显微镜于波长为527nm处观察罗丹明荧光强度,于372nm波长处观察DAPI的荧光染色,确定p120ctn的表达及定位。　　讨论我们以往的研究[10-12]显示p120ctn在正常肺组织中，主要以细胞膜表达为主，而在肺癌组织中则出现细胞膜表达下降，并伴有细胞浆或细胞核表达。我们应用免疫荧光法观察其在组织冰冻切片中的表达，其结果与我们以往的研究和在其它肿瘤中的报道[13-17]相似。在正常的肺组织中，p120ctn于胞浆近胞膜域参与上皮钙黏素（E-cadherin）复合体的组成，进而稳定细胞间的黏附，因而我们观察到p120ctn在细胞膜上呈完整、连续的较强的红色荧光；而在肺癌

4、组织中，p120ctn的膜表达减弱，出现荧光的不连续或缺失。这可能是由于肿瘤细胞中的p120ctn从E-cadherin复合体中解离出来的结果，这一结果可破坏细胞间的黏附功能，从而利于肿瘤细胞的侵袭和转移。脱离了复合体的p120ctn可转向胞浆内，所以我们可以在细胞浆内可以检测到它的蓄积。　　目前，p120ctn在细胞黏附过程中的确切作用机制存在着很大争议[18,19]，其中原因之一就是由于p120ctn具有多种亚型的存在，并且这些亚型的表达具有组织特异性[19-21]。　　理论上，根据剪切不同，人类的p120ctn可以产生32种亚型，而且在不同的组织和细胞类型中p120ctn亚型的剪

5、切方式是不同的。根据起始翻译密码ATG在N-端的不同位置，可分为亚型1-4，根据外显子A、B、C在C-端不同应用又可将这四种亚型分为多种次亚型。　　由于这些剪切方式只影响到N-端和C-端，其间的犰狳重复序列并未受到干扰，因而，它可以保持完整结构从而与E-cadherin相连[18,19]。通过这种结合方式，p120ctn的各种亚型都可以与E-cadherin结合，进而对E-cadherin复合体介导的细胞黏附进行调节。但关于p120ctn各亚型的具体生物学功能及确切作用机制至今仍不清楚。尽管在人类正常组织中，可检测到四种p120ctn亚型[20]，但我们检测了癌旁正常肺组织后发现，只在

6、120KD和100KD处检测到两条特异性的条带，对应其位置相当于p120ctn的1、3两种亚型，并没有检测到明确的和4亚型的表达。这一结果提示，p120ctn亚型1和亚型3在肺组织内有较好的特异性表达。（转载自zw.nseac.作文网）　　与癌旁正常肺组织相比，肺癌组织中p120ctn总蛋白的表达量明显减少，这与Skoudy等人在结直肠癌中研究的结果类似。但是，p120ctn总蛋白的表达与肺癌组织的分期、分化等临床病理因素并无任何相关性。为了深入探究p120ctn在肺癌组织中的亚型表达及其意义。我们分别对p120ctn亚型1、3的表达量进行统计分析，结果表明：肺癌组织中亚型1的表达量明

7、显低于它在癌旁正常肺组织中的表达量，但是，我们没有检测到它的表达与各临床病理因素相关。亚型3在癌组织中表达也明显低于正常肺组织，与亚型1不同的是,亚型3的减少没有亚型1明显，而且它的表达缺失与淋巴结转移呈负相关，与其它各临床病理因素无关。从结果我们可以得出这样的推论：p120ctn亚型1与亚型3可能是肺组织中主要表达的亚型，它们的表达可能与肺癌细胞的恶性程度有关，而且，这两种亚型对癌细胞恶性表型的影响可能也是不同的。从统计结果可以看出：在分化程