hplc测定覆盆子中金丝桃苷的含量

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1、HPLC测定覆盆子中金丝桃苷的含量药学：HPLC测定覆盆子中金丝桃苷的含量是由(fanODSBP色谱柱（5µm，4.6×250mm），流动相：乙腈-0.1%磷酸溶液（15:85），检测波长：360nm。结果金丝桃苷浓度线性范围0.00506~0.1012mg/mL，r=0.99994；样品平均回收率为98.77%，RSD=1.57%（n=6）。结论该方法简便、准确、重现性好，可用于该中药的含量测定。【关键词】覆盆子金丝桃苷HPLC药学【Abstract】ObjectiveToestablishamethodtodetermineHyperininRubiFru

2、ctus.MethodsAHPLCmethodatographicassayedonaSinoChromODSBP(5µm，4.6×250mm）column.Themobilephraseconsistedofacetonitile-0.1%phosphoric（15:85）,thedetection.ResultsThelinearrangeofHyperin0.00506to0.1012mg/mLandcorrelationcoefficientethodissimple,accurateandreproducibleforthedetermination

3、ofHyperininRubiFructus.【KeyODSBP（5µm，4.6×250mm）；流动相：乙腈-0.1%磷酸溶液（15:85）；流速：1mL/min；检测波长：360nm；柱温：30℃；进样量：10µL；理论板数按金丝桃苷峰计算应不低于5000。1-金丝桃苷1-Hyperin图1对照品（A）和样品（B）的色谱图Fig.1Chromatogramsofreferencesubstance（A）andsample（B）1.2.2对照品溶液的制备精密称取金丝桃苷对照品10.12mg，置100mL量瓶中，加80%甲醇使溶解并定容至刻度，摇匀，

4、作为对照品贮备液。精密吸取2mL，置10mL量瓶中，加80%甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。1.2.3供试品溶液的制备[6]取本品粉末（过四号筛）1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入80%甲醇50mL，密塞，称定重量，超声处理（功率250L，置10mL量瓶中，加80%甲醇稀释至刻度，摇匀，分别吸取上述溶液10µL，按“1.2.1”项色谱条件测定，以进样浓度为横坐标（X：mg/mL），峰面积积分值为纵坐标（Y：mAU*s），进行线性回归，得回归方程：Y=208.31X-0.0134，r=0.99994。结果表明，金丝桃苷在0.00506~0.1012mg/mL的

5、范围内呈良好线性关系。1.2.5精密度试验精密吸取“1.2.2”项下制备的对照品溶液10µL，重复进样6次，测定峰面积，结果RSD=0.22%，表明本法精密度良好。1.2.6稳定性试验取供试品溶液于制备后0、2、4、6、8、10h进样，金丝桃苷峰面积的RSD=0.59%，表明供试品溶液在10h内稳定。1.2.7重复性试验称取同一批样品6份，按“1.2.3”项下方法处理并测定含量，结果金丝桃苷RSD=1.17%，表明此方法重复性较好。1.2.8回收率试验称取已知含量的样品6份，分别精密加入一定量的对照品，按“1.2.3”项下方法处理并测定含量，分别计算样品加样回

6、收率（结果见表1），平均回收率为98.77%，RSD=1.57%。表1金丝桃苷回收率试验结果2讨论与总结2.1流动相的选择本实验通过对乙腈-水、乙腈-0.1%磷酸溶液等多种不同比例的流动相进行比较试验，结果乙腈-0.1%磷酸溶液比例为15:85的系统分离效果较好，且峰形较好，故选择本系统为流动相。2.2含量测定的讨论本实验中1.2.9样品的含量测定中第二批的含量和其它两批含量差异较显著，分析原因可能与覆盆子不同有关系，因此，仍需做大量实验来验证。2.3含量与功效的关系本实验确定了覆盆子中的黄酮类化合物为金丝桃苷，但是金丝桃苷含量的高低与覆盆子的功效之间的联系仍不明确，还有

7、待进一步研究。