肺炎支原体抗体血清学检测方法优劣势分析

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1、肺炎支原体抗体血清学检测方法优劣势分析肺炎支原体（MP）是儿童社区获得性肺炎（CAP）的重要病原之一，占住院儿童CAP的10°/40%,肺炎支原体肺炎（MPP）好发于学龄前儿童。MP容易在人员密集的环境中发生，是经飞沫和直接接触传播，潜伏期为1〜3周，每3〜7年会出现地区周期性流行。肺炎支原体肺炎临床表现肺炎支原体肺炎以呼吸系统的临床表现最为常见，而且以发热和咳嗽为主，中高度发热多见，如果婴幼儿出现明显的肺炎支原体肺炎，症状相对较重。其他系统表现常发生在起病2天至数周，包括（大约25%）：对大环内酯类耐药的MP感染更易有其他系统表现；皮肤黏膜损伤常见；

2、心血管系统受累亦较常见，多为心肌损害；血液系统以自身免疫溶血性贫血常见。由于肺炎支原体肺炎的影像学表现并不典型，与小叶性肺炎、病毒性肺炎、细菌性肺炎相似；甚至会出现单纯性肺门淋巴结肿大型表现。肺炎支原体感染血清学规律：人体感染肺炎支原体后，能产生特异性IgM和IgG类抗体。IgM类抗体出现早，一般在感染后1周出现，3〜4周达高峰，以后逐渐降低。由于肺炎支原体感染的潜伏期为2〜3周，当患者出现症状而就诊时，IgM抗体己达到相当高的水平，因此IgM抗体阳性可作为急性期感染的诊断指标。如果患者有明显的症状，但检测IgM抗体阴性，则不能否定肺炎支原体感染，很可

3、能是感染过了急性期，而并非是没有感染肺炎支原体，此时就需检测IgG抗体。IgG较IgM出现晚，需动态观察，间隔2~4周的双份血清中检测到的抗体亚型转化或抗体水平呈4倍及4倍以上升高，可用于确诊肺炎支原体感染。如显著降低说明处于感染后期。IgG与IgM同时测定，可提高诊断率，达到指导用药、提高疗效。肺炎支原体实验室诊断：补体结合试验（CF）:原理：补体可和抗原抗体复合物结合，而游离的抗原或抗体则不结合抗体。利用己知抗原（抗体）和待检血清（抗原）反应后，加入补体进行反应，在指示系统（绵羊红细胞、溶血素）作用下，溶血则为阴性、不溶血则为阳性。特点：约90%的

4、MP患者呈补体试验阳性，灵敏度65%，特异性97%。不足：1）生殖道MP及军团菌交叉反应；2）特定疾病出现假阳性；3）缺少抗体分型；4）操作复杂、依赖经验、灵敏度低。间接免疫焚光法（IFA）：原理：荧光素能和抗体蛋白分子结合而不使抗体失活，所以在抗原与链接荧光素的抗体结合形成复合物时，能在荧光显微镜下观察到荧光，从而检测相应抗原。不足：1）无通用标准；2）主观判读结果；3）自动化程度低；4）检测时间长。凝集法（冷凝集CA、明胶颗粒凝集试验PA）原理：利用纯化的肺炎支原体抗原包被明胶颗粒，此致敏的明胶颗粒将与人血清或血浆中的肺炎支原体抗体结合产生可见的凝

5、集反应。特点：应用明胶颗粒作为载体，从而消除了许多非特异性反应，灵敏度比CF高。不足：1）吋间长：检测吋间3h（静止凝集吋间）以上；2）不能区分IgG、IgM；3）手工操作、主观判读、定性检测；4）易受RF干扰。酶联免疫吸附测定法（ELISA）:原理：抗原抗体的免疫学反应。特点：可实现批量测定和半自动测定。不足：1）时间长：至少lOOmin出结果;2）灰区比例高：10-20%的灰区占比；3）灵敏度和特异性差。直接化学发光免疫分析法（CLIA）:用化学发光剂直接标记抗原或抗体的免疫分析方法。常用于标记的化学发光物质有吖陡醋类化合物-acridiniume

6、ster（AE），是有效的发光标记物，其通过起动发光试剂（NaOH-H2O2）作用而发光。吖啶酯作为标记物用于免疫分析，其化学反应简单、快速、无须催化剂；检测小分子抗原采用竞争法，大分子抗原则采用夹心法，非特异性结合少，本底低；与大分子的结合不会减小所产生的光量，从而增加灵敏度。特点：1）天然混合抗原，通过特殊包被方法，共价包被更高纯度抗原表位成分，有效保证敏感性和特异性，同时可显著提高信噪比，更加有效区分阴m性，大大减少可疑区间。2）抗原包被在磁微粒表面，抗原表位得到充分的暴露，抗原蛋白的结构为立体构象，抗体与抗原的结合为空间表位的结合，特异性更强。