资源描述：
《慢性束缚应激小鼠海马应激性病理效应》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、慢性束缚应激小鼠海马应激性病理效应作者：杨宁波吴爱勤王传升李洁【关键词】束缚应激；海马；天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶 【摘要】目的观察慢性束缚应激下小鼠海马神经元数目的改变及天冬氨酸特异性半光氨酸蛋白酶3的活性，探讨应激对海马的损害作用及途径。方法将16只小鼠随机分为对照组和应激组各8只，采用50ml离心管建立慢性束缚应激模型，每晚束缚8min。14d后处死，取小鼠海马常规固定制HE片、免疫组化天冬氨酸特异性半光氨酸蛋白酶3片，在显微镜下进行细胞记数并显微拍照。结果慢性束缚应激组小鼠海马数目较对照组
2、减少（P<0.05），同时天冬氨酸特异性半光氨酸蛋白酶3阳性细胞率增加(P<0.05)；镜下神经元发生空泡变性，存在典型凋亡细胞。结论慢性束缚应激海马神经元凋亡蛋白天冬氨酸特异性半光氨酸蛋白酶3活性增加，天冬氨酸特异性半光氨酸蛋白酶3可能参与了应激状态下海马的细胞凋亡。 【关键词】束缚应激；海马；天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3；病理形态学 Stressfulpathologicaleffectsofhippocamalinchronicrestraintstressmice 【Abs
3、tract】ObjectiveToobservechangesofhippocamalneuronsandactivitiesofCaspase3inthehippocampusofchronicrestraintstressmiceandexploretheinjuringactionsandpus.Methods16micelydividedintocontrolandstressfulgroup(bothn=8),RSTdeviceslpolypropyleneconicaltubes,rest
4、rainstressposedfor8minutespernight.AfterFourteendaysmicemunohistochemistryCaspase3ade,countsofpositivecellandphotomicrographstakenundermicroscope.ResultsDecreaseofhippocamalneuronsoremarkedinthestressthaninthecontrolgroup(P<0.05)andrateofpositivecell
5、ofCaspase3increasedmoresignificantly(P<0.05);Neuronsdevelopedvacuolardegenerationandhaddeadcells.ConclusionActivityofhippocamalCaspase3increasedandCaspase3mightplayaroleinthedeathofhippocamalneuronsunderstress. 【Keypus;Caspase3;pathomorphism. 慢性持久的
6、不良刺激对大脑可产生病理生理损害。流行病学资料显示,慢性应激与很多精神障碍如复发性抑郁症和创伤后应激障碍(posttraumaticstressdisorder,PTSD)的发病密切相关［1,2］。国外有资料表明,慢性应激可以导致动物海马CA1和CA3区锥体细胞形态结构受损,并认为这可能与随后发生的精神障碍有关。新近的研究发现［3］,天冬氨酸特异性半光氨酸蛋白酶3(Caspase3)参与了神经退行性疾病的发生。本研究通过建立慢性束缚应激模型，观察海马脑组织的形态学改变，并半定量检测海马Caspase3
7、活性，探讨慢性应激对海马的病理损害。 1材料与方法 1.1试剂器材兔抗小鼠Caspase3抗，购于武汉博士德公司；ULTRASENSITIVETMSP超敏试剂盒，购于福建迈新生物技术开发公司；75%酒精，4%多聚甲醛，DAB显色液（3二氨基苯联胺显色液），50ml离心管（打孔3mm，通风良好），奥林巴斯显微摄像显微镜（日本），COINC光学显微镜（重庆）等。 1.2分组处理 1.2.1昆明小白鼠，周龄4～6l离心管中，可前后排列［4］。8h后将动物放出，恢复自由,供食物和水，全部动物在应激时间
8、禁食禁水，应激5次・。高倍镜下(400x)对海马CA1、CA2、CA3和DG区锥体细胞进行双盲法计数(CA1、CA2区选取细胞数较为恒定的中段)。每张切片取连续的两个视野,并保证锥体细胞层的弧度弦置于目镜的直径上,取两视野的平均值为该切片锥体细胞数,5张切片的平均值为该样本的锥体细胞数［6］。脑片室温下晾干,0.01MPBS冲洗,加入Caspase3单克隆抗体,4℃过夜,0.01MPBS冲洗,加生物素标记的二抗工作液,37℃1ｈ,0.01m
