胚胎脊髓不同移植方法对损伤后大鼠脊髓轴突再生的作用

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1、胚胎脊髓不同移植方法对损伤后大鼠脊髓轴突再生的作用【关键词】脊髓损伤摘要：［目的］研究胚胎脊髓不同移植方法对损伤后大鼠脊髓轴突再生的作用。［方法］将成年大鼠分为四组，A组：单纯脊髓挫伤和半切洞组；B组：脊髓挫伤和半切洞+胚胎脊髓移植组；C组：脊髓挫伤和半切洞+胚胎脊髓移植+损伤区上下神经根吻合组；D组：脊髓挫伤和半切洞+胚胎脊髓移植+带蒂大网膜移植组。移植后6周，应用行为学检查，观察大鼠功能恢复情况，用光、电镜检查计算轴突和观察轴突病理变化，采用计算机图像分析技术，进行定量分析。［结果］作者发现脊髓损伤后6周

2、A组轴突丢失最严重，各组轴突都有不同程度的减少，其减少程度顺序是A组>B组>C组>D组。D组与其它三组比较有显著差异性。残留的轴突数目与神经功能的改善相平行。［结论］大鼠胚胎脊髓和大网膜移植后能增强损伤脊髓轴突再生并能促进大鼠后肢神经功能的恢复。　　关键词：脊髓损伤；胚胎脊髓移植；大网膜；脊神经根；轴突；形态学分析　　Effectofdifferentmethodsoffetalspinalcordtissuetransplantiononaxonregenerationafterspina

3、lcordhemisection　　Abstract：［Objective］Toinvestigatetheeffectofdifferentmethodsoffetalspinalcord(FSC)tissuetransplantiononquantitativeanalysisofaxonregenerationafterspinalcordinjury(SCI).［Method］Fortyratsisectioninjurygroup(groupA),Fetalspinalcord(FSC)transf

4、erredgroup(groupB),FSCtransferredintoSCIsiteosisgroup(groupC)andFSCentumtransferredintotheisectioncavitygroup(groupD).Afteroperation6icroscopeineaxonalpathology,openfieldandinclinedplanetestsined.Axonscountsageanalysissystem.［Result］Morelossofaxonsainedaxon

5、sprovementinneurologicalfunctionrecovery.［Conclusion］FSCentumtransplantedafterSCIenhanceaxonregenerationintheatter，andcanpromotetherecoveryofneurologicalfunction.　　Keyentum;Spinalnerveroots;Axon;Morphometricanalysis　　脊髓损伤后轴突损伤和脊髓白质上行和下行通路的丢失是感觉、运动功能缺失的主要原因。

6、大鼠脊髓不完全横切实验研究表明保留或减少5%~10％的白质将意味着明显的功能恢复或永久性的瘫痪［1，2］。目前，作者对脊髓损伤后胚胎脊髓移植功能恢复与轴突再生数量的关系了解较少，本实验应用胚胎脊髓不同的移植方法观察对损伤后大鼠脊髓轴突再生的影响。　　1材料与方法　　1.1动物分组　　的脊髓组织做20μm的冰冻切片，进行光、电镜检查观察大鼠胚胎脊髓移植后损伤脊髓轴突病理的变化，电镜检查包括三个节段的切片，切片组织为脊髓腹侧正中白质1575μm2的特定区域，轴突计数用计算机图像分析系统进行图象处理。用斜板试验和T

7、arvol评分观察神经功能。　　1.2胚胎脊髓移植物的制备　　用怀孕14d的大鼠的胚胎脊髓为移植物，将其麻醉，用无菌技术在显微镜下取出胚胎脊髓1～2mm3放在人工脑脊液中，准备做移植用。　　1.3移植方法　　用戊巴比妥钠30mg／kg腹腔内注射麻醉，腰背部脱毛，将大鼠固定在立体定位仪上，做T12～13全椎板切除，无菌条件下暴露脊髓腰膨大。用10g重物从2．5cm高落下造成中度脊髓挫伤，然后用负压吸引的方法吸除左侧半坏死脊髓造成一约2mm×1mm×1mm大小的洞腔。脊髓挫伤和半切洞后，A组仅做脊髓挫伤和半切洞，

8、并用同样大小的明胶海绵填充脊髓洞腔。B组应用胚胎脊髓移植，用无菌玻璃管吸取约2mm×1mm×1mm胚胎脊髓注入预制的脊髓洞腔内，C组胚胎脊髓移植后经腹膜后间隙暴露脊髓左侧T12和L1神经根用显微外科剪切断之，然后用硅胶管套接吻合T12和L1近端。D组取腹部正中切口从脾和胃大弯纵行游离大网膜，有时须将脾切除，将大网膜从左侧腹壁引出经皮下隧道转移到腰背部切口内，将大网膜末端覆盖移植的胚胎脊髓。然后用90