大花杓兰内生真菌多样性研究

《大花杓兰内生真菌多样性研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、大花杓兰内生真菌多样性研究侯晓强，付亚娟，袁建平，吴智艳，王利冉，李微（廊坊师范学院生命科学学院/河北省高校食药用菌应用技术研发中心，河北廊坊065000）摘要：对大花杓兰（CypripediummacranthumSium）和茎点霉属（Phoma）真菌，分别占总菌株数的15．25％和8．47％；吉林大花杓兰样品内生真菌归于9个属，内生真菌的多样性指数H＝1．31、D＝0．93，以毛壳菌属（Chaetomium）为优势菌群，占总菌株数的23．73％。由此可见，北京大花杓兰中内生真菌多样性高于吉林大花杓兰。.

2、jyqkmacranthumSmacranthumHOUXiao－qiang，FUYa－juan，YUANJian－ping，edicinalFungiResearchandDevelopmentCenterofHebeiUniversities，Langfang065000，Hebei，China）Abstract：ThepositionanddiversityofendophyticfungaltaxainCypripediummacranthumSC．macranthum．Thesefungiilie

3、sand16generasincludedto12generas，ium（15．25％）andPhoma（8．47％）ajorfungalgroups．EndophyticfungalgroupsinJilinC．Macranthumincluded9generas，iumbelongedtothecoregroup（23．73％）．DiversityofendophyticfungiinBeijingC．Macranthum．Keymacranthum；endophyticfungi；isolation；

4、identification；diversity收稿日期：2014－12－16基金项目：国家自然科学基金项目（31100314）；河北省自然科学基金项目（C2012408007）；河北省遗传学重点发展学科建设项目；廊坊师范学院微生物学重点学科项目简介：侯晓强（1979－），男，河北怀来人，副教授，博士，主要从事药用植物菌根生物学研究，（）0316－2197013（电子信?aclass="__cf_email__"href="/cdn-cgi/l/email-protection"data-cfemail="

5、6f8bccc6171e07001a5e5658562f5e5d59">[email protected]．。大花杓兰（CypripediummacranthumSL）。1．3方法1．3．1内生真菌的分离随机选取大花杓兰健康的根、茎、叶，用清水洗净，切成1cm左右小段。采用体积分数为70％的乙醇浸泡30s，无菌水冲洗，3％次氯酸钠浸泡消毒，根、茎、叶消毒时间分别为2min、4min、1min。无菌条件下，将材料剪成0．2cm小段，置于PDA培养基上，25℃暗培养。待组织长出真菌菌丝，挑取菌丝先端接

6、种至PDA斜面培养基上，25℃暗培养完成后，4℃保藏。1．3．2内生真菌的纯化将PDA斜面培养基保藏的内生真菌接种至PDA平板培养基上，25℃暗培养6～7d，根据内生真菌的菌落形态及显微形态特征，合并形态一致的菌株。1．3．4大花杓兰内生真菌多样性分析度量在一个特定的植物组织样品中内生真菌的丰度，采用分离频率和多样性指数等指标［7，8］。分离频率可以反映出某种真菌在植物中出现的频率，多样性指数反映每种植物内生真菌的物种多样性程度。分离频率（isolationfrequency，IF）：分离到的某一指定类型内

7、生真菌的菌株数占分离内生真菌总菌株数的百分率。Shannon－A，GELFANDDH，SNINSKYJJ，etal．PCRprotocols：aguidetomethodsandapplications［M］．NeicPress，1990．315．［4］SNCHEZMS，BILLSGF，ZABALGOGEAZCOAI．Diversityandstructureofthefungalendophyticassemblagesfromtpatriccoastalgrasses［J］．FungalDivers，2

8、008，33：87．［5］THOMPSONJD，GIBSONTJ，PLEolecularidentificationofectomycorrhizalmyceliuminsoilhorizons［J］．AppliedandEnvironmentalMicrobiology，2003，69（1）：327．［10］HYDEKD，SOYTONGK．Thefungalendophytedilemma［J］．FungalD