恶性肿瘤组织中结核杆菌dna的检测

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1、恶性肿瘤组织中结核杆菌DNA的检测关键词：恶性肿瘤；结核杆菌；多聚酶链反应　　摘　要　目的　探讨结核杆菌感染与恶性肿瘤的关系。方法　采用多聚酶链反应(PCR)技术检测两种恶性肿瘤组织中结核杆菌DNA(TB-DNA)。结果41例恶性肿瘤组织中检出TB-DNA阳性患者8例，占19.5%，且TB-DNA阳性患者肿瘤发病部位基本与结核病的好发部位一致。结论结核杆菌感染可能与一些恶性肿瘤存在特殊相关性。DetectionoftuberculosisDNAinSomemalignantTumors　　Abstract　Tostudytherelationofmycobacterium

2、tuberculosisinfectionalignanttumors.Polymerasechainreaction(PCR)assayalignanttumors.TB-DNAalignanttumortissues(19.5%),moreover,theincidencelocationsofTB-DNApositivemalignanttumorsostlysimilartothatoftuberculosis.Thereisprobablyaspecialassociationbetycobacteriumtuberculosisinfectionandsome

3、malignanttumors.　　KeyorsMycobacteriumtuberculosisPCR　　据估计，全世界约有1/3的人口感染结核杆菌［1］，结核杆菌特别是其细胞壁缺陷型(L型)与肿瘤的关系引起人们注意。我们应用多聚酶链反应技术对两种恶性肿瘤进行结核杆菌DNA(TB-DNA)的检测，探讨结核感染与恶性肿瘤的关系。　　1　材料与方法　　1.1　材料　收集南方医院病理科1994年以来手术切除诊断明确的肠原发性恶性淋巴瘤20例及女性肺癌21例，所有标本常规石蜡切片，HE染色，光镜观察，部分病例做免疫组化标记LCA、L26、UCHL-1、Mac387等，同时回顾分

4、析临床资料。　　1.2　PCR检测　结核杆菌检测试剂盒购于中山医科大学达安基因诊断中心，PCR扩增仪为Hema480(珠海黑马医学仪器有限公司)。　　1.2.1　模板制备　5μm厚石蜡切片1～2片，常规脱蜡至乙醇，自然干燥，用无菌刀片将组织刮入1.5mleppendrof管中，加DNA提取液50～100μl，煮沸10分钟，10000rpm离心10min，取上清2μl作模板，常规PCR扩增。同时设人型结核杆菌基因组DNA作为阳性对照，以高纯水代替模板作为阴性对照。　　1.2.2　PCR扩增　93℃变性3min，然后进行30次循环：93℃变性45s，55℃退火45s，72℃延

5、伸1min，最后72℃延伸5min，结束循环。　　1.2.3　电泳分析　每例取PCR产物10μl(含溴酚兰指示剂)，置于2%的琼脂糖凝胶中电泳，在紫外检测仪上观察并照相。　　2　结　果　　2.1　临床病理资料　20例肠原发性恶性淋巴瘤男13例，女7例，发病年龄在4～73岁；发病部位结肠8例，盲肠7例，小肠5例；B细胞淋巴瘤14例，T细胞淋巴瘤6例，50%以上经免疫组织化学证实，12例有周围淋巴结累及。21例女性肺癌患者，发病年龄在33～68岁，周围型肺癌17例，中央型肺癌4例；发生于左肺者11例，右肺10例；组织学类型腺癌10例，腺鳞癌7例，鳞癌、小细胞癌、大细胞癌、类癌

6、各1例；支气管旁淋巴结累及者10例。　　2.2　PCR检测结果　41例恶性肿瘤组织中检出TB-DNA阳性患者8例(8/41)，其中肠恶性淋巴4例(4/20)，女性肺癌4例(4/21)。8例TB-DNA阳性的恶性肿瘤患者年龄在4～68岁，6例有周围淋巴结累及，瘤组织中均未见典型结核病变。4例TB-DNA阳性的肠恶性淋巴瘤发病部位多近回盲部，B细胞型3例，T细胞型1例。4例TB-DNA阳性的肺癌患者发病部位在左下叶2例，右上或右中上肺者2例；中央型者2例；腺癌2例，鳞癌、类癌各1例。　　3　讨　论　　结核杆菌遍布于我们的周围环境，其主要经呼吸道和消化道感染人体，因此我们选择消

7、化道和呼吸道肿瘤作为我们的研究对象，又因结核病是与免疫有关的疾病，我们选择发病与免疫有关的肠恶性淋巴瘤，为了减少吸烟因素的影响，选择了女性肺癌。本组41例恶性肿瘤经PCR技术检测出TB-DNA阳性患者8例，占19.5%，与一些报道相比阳性率较低［2,3］。　　关于TB-DNA阳性肿瘤与结核杆菌感染的联系，一般有两种假设：①结核杆菌感染发生在癌变之后，即过路感染。②结核杆菌感染发生在癌变之前，并在瘤的形成中起一定作用。结核杆菌是一种寄生在细胞内的病原菌，可在吞噬细胞内生长繁殖，并在体内外因素或抗结核药物作用下细胞壁部分或完全缺陷