早期自然流产患者蜕膜组织中inos的表达及意义论文

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1、早期自然流产患者蜕膜组织中iNOS的表达及意义论文.freeleasuredbymeansofimmunohistochemicalmethod.Of41enrecruitedinthisstudy,20ensufferingfromearlyspontaneousabortion(abortiongroup)and21enundergoingelectiveterminationofnormallyprogressingpregnancies(controlgroup).ResultsPositivestainingofinduciblen

2、itricoxidesynthaseofstromalcells、glangepithelialandhuminalepitheliumofdeciduatissueongthem(P=0.026).ConclusionTheobviousincreaseiniNOSindeciduatissueayplayanimportantroleinthegenesisofspontaneousabortion.【Keyl,0.01M,pH:7.4,PBS90ml)固定24h以制备石蜡切片。石蜡包埋切片厚度为5um。切片常规脱蜡至水,用3%H2O

3、2。浸泡灭活内源性酶,在滴加正常山羊血清封闭液前切片均需微波修复抗原,而后依次加入正常山羊血清封闭液、稀释的一抗、二抗工作液、链酶亲和素一过氧化物酶复合物,DAB(3,3-2氨基联苯胺)显色,封片。所有试验均采用在同一条件下进行。结果判定,iNOS表达在细胞浆上,判定标准以细胞浆出现明显的棕黄色颗粒为阳性,无着色或与背景颜色一致为阴性;随机选择5个高倍视野,根据多数细胞的染色强度计算强度得分,无着色为0分,淡棕黄色为1分,棕黄色为2分,深棕黄色为3分;阳性率和强度计分相加的结果:0~1分为(-),2分为(+),3~4分为(++),5~6分为(

4、+++)。1.2.3统计学处理全部统计学分析均采用SPSS14.0软件包进行,等级资料采用P使T细胞封闭于G0/Gl期,不能对IL-2R产生应答,细胞免疫下降即TH1型反应下降,从而使NO通过调节THl/TH2免疫平衡维持妊娠耐受。NO不仅是胎盘屏障的构成基础,而且还可以通过免疫调节在妊娠免疫耐受中发挥重要作用。当iNOS呈正常表达时,NO的免疫活性在滋养细胞主要表现为免疫调节作用,维持妊娠免疫耐受。本研究结果显示,大部分正常早孕组蜕膜组织的间质细胞、腺上皮细胞及腔上皮细胞浆内呈弱阳性染色,即iNOS为正常表达。NO又是一种活性很高的自由基,

5、其终产物过氧化亚硝酸根(ONOO-)有很强的毒性,能直接参与组织损伤,并介导炎症反应。iNOS由巨噬细胞、中性粒细胞被炎性因子激活后产生,它可催化产生大量的NO参与某些生理效应或病理生理过程。巨噬细胞来源的iNOS对构成及维持胎盘屏障非常重要,在iNOS的参与下,小鼠着床期滋养细胞可产生NO,从而参与血管扩张和血管形成,并介导吞噬受损伤的母体细胞的细胞毒作用,这些功能对胚胎的存活和发育具有重要意义。既往曾有研究7报道:早期自然流产患者绒毛组织中NO含量较正常早孕组绒毛组织中的含量减低,其作用机制可能是因为NO有抑制子宫平滑肌收缩的作用,而NO

6、的减少可能使子宫收缩频度较正常人增加,导致流产的发生,而其究竟是流产发生的原因还是流产引致的结果,尚无定论。但也有报道认为,自然流产的发生与细胞凋亡有关,而NO可诱导细胞凋亡8。有学者用RT-PCRDNA印迹证明胚胎未发现明显病变前,蜕膜巨噬细胞iNOSmRNA的表达升高与流产有密切关系,即自然流产者在流产发生前着床部位已有巨噬细胞的入侵,侵入的巨噬细胞产生大量的iNOS,使局部NO水平明显增加,产生细胞毒作用,使细胞生长停止,导致细胞程序性死亡9。由于NO具有脂溶性特点,可透过母胎屏障,对局部胚胎起杀灭作用10。本研究结果显示,大部分早期自

7、然流产组蜕膜组织中,iNOS呈阳性、强阳性表达,即iNOS表达异常活跃,活性显著增加。E)和左旋氧硝基精氨酸(LNA)则能有效避免自然流产的发生。本研究结果显示:正常早孕组与早期自然流产组iNOS在蜕膜组织中均有表达,但表达有差异,早期自然流产组患者蜕膜组织中的iNOS的表达明显高于正常早孕组。由此可见,iNOS在调节妊娠免疫时具有双重性,当其表达正常时,主要表现为免疫调节功能,维持正常妊娠;而表达过高时,发挥细胞毒作用,造成组织过度损伤,最终导致胚胎死亡而发生流产。如何利用NO对早期妊娠的调节作用,仍有待于更深入的研究。图1正常早孕蜕膜组织

8、iNOS免疫组织化学法染色阳性表(放大倍数400×)图2正常早孕蜕膜组织iNOS免疫组织化学法染色弱阳性表达(放大倍数400×)图3自然流产蜕膜组织iNOS免疫组织