当归多糖对hbv转基因小鼠树突状细胞作用

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1、当归多糖对HBV转基因小鼠树突状细胞作用作者：沈晓燕，侯安继，胡艳，张红卫，周维【摘要】目的研究当归多糖对HBV转基因小鼠免疫调节作用。方法采用1%当归多糖(ASP)腹腔注射，每周2次，2周后摘取小鼠脾脏制备淋巴细胞，MTT（噻唑蓝粉剂）法观察ASP对淋巴细胞的毒性作用；经粒-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）和白细胞介素-4（IL-4）培养转基因小鼠脾脏来源树突状细胞（DC），ELISA法检测DC分泌IL-12以及刺激混合淋巴细胞反应T淋巴细胞分泌IL-10、IFN-γ的含量。结果ASP在0

2、～625mg/L浓度对HBV转基因小鼠无毒性作用，并能显著促进HBV转基因小鼠DC分泌IL-12，在混合淋巴细胞反应中，能有效促进T淋巴细胞分泌IFN-γ并抑制IL-10的分泌，从而上调DC功能。结论当归多糖对HBV转基因小鼠树突状细胞功能具有上调作用，可能是当归多糖免疫调节机制之一，为当归多糖在慢性乙型肝炎临床应用提供了实验依据。【关键词】当归多糖；HBV转基因小鼠；树突状细胞；慢性乙型肝炎【Abstract】ObjectiveToobservetheeffectofAngelicasinen

3、sispolysaccharide(ASP)onthefunctionofdendriticcells(DCs)inHBVtransgenicmice.MethodsASPof1%concentrationicebyabdominalinjectiontakelymphocytes.MTTmethodlymphocytesandincubatedacrophagecolony-stimulatingfactor（GMC-SF）andinterleukin-4（IL-4）.PhenotypeofD

4、Csetry(FCM),IL-12releasedbyDCsandIL-10andIFN-γproducedbyTcellsinmixedlymphocytereaction(MLR)easuredbyELISA.ResultsASPg/Ldidn’tshophocytes,ASPcouldenhanceDCs’secretion,increaseIL-12levelinHBVtransgenicmice,increasethesecretionofIFN-γ,inhibitthesecreti

5、onofIL-10inMLR,thusup-regulatesDC’sfunction.ConclusionASPcouldup-regulatedendriticcellsfunctioninHBVtransgenicmicethatmightbeonemechanismthroughmunefunction.OurexperimentresultsprovidedexperimentalevidencefortheuseofASPinCHBclinic.【Keyice;dendriticce

6、ll;chronichepatitisB慢性乙型肝炎(chronichepatitisB,CHB)患者免疫功能低下，不能有效清除乙型肝炎病毒（HBV），机体对HBV呈现免疫耐受状态［1］。树突状细胞（dendriticcell,DC）是已知人体内功能最强大的抗原提呈细胞（antigenpresentingcells,APC），在机体抗感染免疫中发挥重要作用。近年研究表明，CHB患者DC功能处于抑制状态，如何解决DC功能的低下状态成为国内外研究的热点，多糖类中药如香菇多糖等已被公认具有较好的免疫调

7、节作用并广泛用于CHB和肿瘤的辅助治疗［2］，鉴于多糖类中药良好的免疫调节作用，理论上推测其对DC应有一定的调节作用，但迄今为止有关多糖对DC功能影响的报道尚不多见，因此，开展多糖类中药对DC影响的研究不仅开拓了多糖类研究的新领域，也有望为解决DC功能抑制提供安全实用的新制剂。当归多糖(Angelicasinensispolysaccharide，ASP)是中药当归的提取物，研究证实ASP具有较好的免疫调节作用和抗肿瘤作用，笔者曾报道羧甲基茯苓多糖（CMP）能上调DC功能［3］，但ASP对DC的

8、影响如何，相关报道甚少，因此本研究中，笔者利用HBV转基因小鼠作为动物模型，经ASP腹腔注射处理后，观察ASP对DC的作用及其与Th1/Th2分化的关系，以探讨多糖类中药对HBV感染模型动物DC的影响，为临床应用提供实验依据。1材料与方法1.1试剂与药物当归多糖（ASP）由武汉大学中南医院药学部刘萍主任药师提供，用前以D-Hank’s液稀释至所需浓度；丝裂霉素C、二甲基亚砜粉剂（DMSO）为美国Sigma公司出品，RPMI1640培养液、胎牛血清液（fetalcalfserum，FCS）为美国G