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1、反相高效液相色谱法测定鼻炎滴剂中绿原酸和黄芩苷的含量论文刘伟娜，高洁，张雪，禇文静，黄喜茹，侯海妮【摘要】目的建立测定鼻炎滴剂中绿原酸和黄芩苷含量的方法。方法采用RP-HPLC法，色谱柱为DiamonsilTMC18(250mm×4.6mm,5μm)柱,以甲醇-水-磷酸(52∶48∶0.1)为流动相，检测波长320nm,流速为1.0ml·min-1。结果绿原酸在4.30～34.40μg·ml-1范围内线性关系良好,回归方程为：A=127.3C-4.396.freell-1范围内线性关系良好,回归方程为：A=38.
2、15C+55.1，r=0.9997,平均回收率100.8%，RSD=1.4%。结论该法灵敏、简便、准确,可用于鼻炎滴剂的质量控制。【关键词】鼻炎滴剂;绿原酸;黄芩苷;反相高效液相色谱Abstract：ObjectiveToestablishamethodfordeterminationofchlorogenicacidandbaicalinincoryzadrippingsolution.MethodsRP-HPLCmethodnonsilTMC18(250mm×4.6mm,5μm),themobilephase
3、ethanol-l·min-1,thedetection.ResultsThelinearityofchlorogenicacidl-1,.freell-1,regressequationethodissensitive,simple,accurate,andcanbeusedforthequalitycontrolofcoryzadrippingsolution.Keyl/瓶,广东佛山德众药业有限公司生产：批号06001、07015、07062)。试剂：甲醇(进口色谱纯),磷酸(优质纯),重蒸水(自制)。2方法
4、与结果2.1色谱条件色谱柱:DiamonsilTM(钻石)C18(250mm×4.6mm,5μm);流动相：甲醇-水-磷酸(52∶48∶0.1);流速：1.0ml·min-1;柱温：30℃;检测波长：320nm;进样量：20μl。在上述色谱条件下，绿原酸和黄芩苷的色谱峰与相邻峰的分离度均大于2，理论塔板数以绿原酸计算大于3000。经紫外检测器检测，供试品中绿原酸和黄芩苷的保留时间与对照品一致(见色谱图1)。A.对照品B.鼻炎滴剂C.阴性对照1.绿原酸2.黄芩苷图1对照品和鼻炎滴剂HPLC图2.2对照品溶液制备精密
5、称取绿原酸对照品2.15mg，黄芩苷对照品3.88mg，分别置25ml量瓶中，用50%甲醇稀释至刻度。绿原酸对照品溶液的浓度为每毫升含86.0μg，黄芩苷对照品溶液的浓度为每毫升含155.2μg。2.3供试品溶液的制备精密量取鼻炎滴剂1.0ml置10ml量瓶中,加50%甲醇稀释到刻度,摇匀,用0.45μm微孔滤膜过滤,取续滤液,即得供试品溶液。2.4标准曲线的制备精密量取绿原酸对照品溶液,加50%甲醇制成绿原酸浓度分别为4.30，8.60，12.90，17.20，21.50，25.80，30.10，34.40μg
6、·ml-1的对照品溶液。精密量取黄芩苷对照品溶液,加50%甲醇制成黄芩苷浓度分别为15.52，31.04，46.56，62.08，93.12，108.64μg·ml-1的对照品溶液。按上述色谱条件,进样20μl,记录色谱峰面积。以峰面积A对浓度C(μg·ml-1)进行线性回归,求得回归方程为：绿原酸：A=127.3C-4.3964，r=0.9999;黄芩苷：A=38.15C+55.1，r=0.9997。绿原酸的线性范围为4.30～34.40μg·ml-1;黄芩苷的线性范围为15.52～108.64μg·ml-1。
7、2.5精密度实验按上述色谱条件,取线性关系项下对照品溶液,取20μl进样,连续进样5次，绿原酸峰面积的RSD为0.07%，黄芩苷峰面积的RSD为0.13%，结果表明精密度良好。2.6阴性对照实验按处方和工艺自配不含金银花和黄芩苷的阴性制剂，再按供试品制备方法制备溶液并测定，结果阴性溶液在绿原酸和黄芩苷对照品相同保留时间处未出现色谱峰，故认为无干扰。2.7稳定性和重现性实验取同一供试液，每2h进样20μl，结果在12h内绿原酸峰面积的RSD为0.52%;黄芩苷峰面积的RSD为0.37%。表明样品至少在12h内稳定。
8、取同一批号(06001)的鼻炎滴剂，按供试品溶液制备方法制备5份供试品溶液，各进样20μl，测得绿原酸的平均含量为0.2658mg·ml-1(RSD=0.61%);黄芩苷的平均含量为21.41mg·ml-1(RSD=0.55%)。2.8加样回收率实验绿原酸回收率的测定：精密吸取已知含量的样品(2007015)0.84ml，置10ml量瓶中，平行7份，分别加入绿原酸对照品溶
