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1、白藜芦醇对豚鼠心室肌细胞L论文易方方，唐其柱，冯斯婷，王腾【关键词】白藜芦醇；全细胞膜片钳；钙电流EffectsofresveratrolonLtypecalciumcurrentinisolatedventricularmyocytesofguineapig【Abstract】AIM:ToinvestigatetheeffectsofresveratrolontheLtypecalciumcurrent(ICaL)inisolatedventricularmyocytesofguineapig.METHODS:Singleventricularcellhe
2、althyguineapigheartusingenzymaticdissociationmethods.Thepinistrationofresveratrolat1,50,100μmol/L.RESULTS:①ResveratrolreducedtheICaLinaconcentrationdependentmanner,butithadnoeffectonIVshapeofICaL.②ResveratrolmarkedlyshiftedthesteadystateactivationcurveofICaLtotheright,andV1/2valuei
3、ncreasedfrom(-18.97±4.08)mVincontrolto(-15.97±4.13)mVinthepresenceofresveratrol（n=7,P=0.02）,theκvaluefrom(3.64±0.56)to(3.82±0.60)(n=7，P=0.67).③InactivationcurveofICaLeconstantofreactivationofICaL(98.50±9.00)msto(54.53±4.27)ms(n=6，P=0.000)byresveratrol.CONCLUSION:Resveratrolinhibite
4、dtheLtypecalciumchannel,mainlyactingontheactivityandrecoveryprocesses.【Keyp；calciumcurrent【摘要】目的：研究白藜芦醇对正常豚鼠心室肌细胞L型钙电流（ICaL）的影响.方法：采用全细胞膜片钳技术,记录不同浓度白藜芦醇作用前后对ICaL的影响.结果：①白藜芦醇呈浓度依赖性阻断ICaL,但对激活电位、峰电位、反转电位均没有影响；②白藜芦醇使ICaL稳态激活曲线右移，V1/2由对照的（-18.97±4.08）mV变为（-15.97±4.13）mV（n=7，P=0.02）.fre
5、els变为（54.53±4.27）ms（n=6，P=0.000）.结论：白藜芦醇对ICaL有阻断作用,主要作用于钙通道激活和恢复过程.【关键词】白藜芦醇；全细胞膜片钳；钙电流0引言白藜芦醇化学名为3,5,4′三羟基反二苯代乙烯(3,.freela公司）；白藜芦醇（西安赛得高科生物股份有限公司）；其余均为国产分析纯.无钙台氏液(mmol/L)：NaCl135，KCl5.4，MgCl21，NaH2PO40.33，Glucose20，HEPES10，pH7.38(NaOH调节);KB液(mmol/L)：glumaticacid50，KOH85，KCl30，MgSO
6、43，Taurine20，Glucose10，HEPES10，EGTA0.5，pH7.2(KOH调节)；电极外液组成(mmol/L)：NaCl37，CholineChloride100，CaCl21.8，MgCl20.5，HEPES10，Glucose10，CSCl4.6，pH7.3(CSOH调节)；电极内液组成(mmol/L):CSCl120，CaCl21.0，MgCl25，Na2ATP5，EGTA11，HEPES10，Glucose11，pH7.4(CSOH调节).白藜芦醇在DMSO中配成1.5mmol/L母液，每次实验时,母液溶于电极外液中配成实验所需
7、终浓度进行灌流,DMSO终浓度低于1mL/L.1.2方法1.2.1心室肌细胞的分离将豚鼠腹腔注射肝素500U/kg，头部击昏,迅速开胸取出心脏置于1000mL/LO2饱和的4℃生理盐水中冲洗，剪开心包，连接于Langendorff心脏灌流装置上逆行灌流，灌流压维持在70mmH2O，用无钙台氏液灌流3～5min，冲出心脏内残留血液，心脏完全停跳后，改用含0.33mg/LⅠ型胶原酶，0.1mg/L蛋白酶E的低钙液（Ca2+80mmol/L）灌流3~5min,至心脏膨大松弛流出液成丝后取下，除去心房，在含BSA1g/L的KB液中剪碎心室肌，37℃温孵，稀释，倒出上
8、清液,此为第一份细胞贮存液.剩余的沉淀部分继续用KB
