知母总黄酮提取工艺的研究论文

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1、知母总黄酮提取工艺的研究论文闻永举，能力强，申秀丽【摘要】目的建立知母中总黄酮提取工艺，为知母总黄酮开发和利用提供依据。方法对提取方法、提取溶剂、提取时间进行研究，采用紫外分光光度法测定知母中总黄酮含量。结果知母中总黄酮较佳提取工艺为：70%乙醇超声提取30min。结论该方法简便、快速、准确，可作为知母中总黄酮提取及含量测定方法。【关键词】知母；紫外分光光度法；总黄酮；芒果苷Abstract：ObjectiveToestableamethodofextractiontechnologyoftotalflavonoidstoo

2、fferabasisforAnemarrhena'sdevelopment.MethodsItethod,solvent,timeofextractionofAnemarrhena'statolflavonoidsandinedtatolflavonoids'contentofAnemarrhenabyUV-spectrophotometry.ResultsItinby70%acohol.ConclusionThismethodple,quick,andaccurated,andsuitabletoextractanddet

3、erminetotalflavonoids'contentofAnemarrhena.Keyarrhena；UV-spectrophotometry;Totalflavonoids；Mangiferin知母为百合科植物知母AnemarrhenaasphodelloidesBge.的干燥根茎。中医理论认为，知母性寒，味苦、甘；入肺、肾、胃经；具有清热泻火、生津润燥功能。临床用于外感热病、高热烦渴、肺热燥咳、骨蒸潮热、内热消渴、肠燥便秘［1］等症。研究表明知母中富含皂苷、黄酮类化合物［2］.freel左右有最大吸收。本实验中所用

4、的对照品是知母中主要黄酮类成分芒果苷对知母总黄酮进行含量测定。因此将芒果苷溶液及知母总黄酮提取液显色后在200～400nm处用可见-紫外分光光度计扫描，知母总黄酮和芒果苷均在258nm有最大吸收波长，结果见图1。故选择含量测定的检测波长为258nm。Ⅰ知母总黄酮紫外吸收波谱图Ⅱ芒果苷的紫外吸收波谱图图1知母总黄酮、芒果苷的最大紫外吸收波谱图2.2对照品溶液的制备取芒果苷适量，于60℃减压干燥至恒重，精密称定，加70％乙醇溶解，制成每毫升含32μg溶液，即得。2.3线性关系实验精密吸取混合对照品溶液贮备液1，2，5，10，15

5、，25ml，分别置于50ml量瓶中，加70％乙醇稀释到刻度，摇匀，即得。分别取上述溶液，进行测定，以溶液浓度与吸收度比值进行回归，分别得到回归方程为：芒果苷：Y=0.2309X-0.0031（r=0.9993），表明芒果苷在0.26～3.57μg/ml，范围内线性关系良好，芒果苷线性关系见图2。图2芒果苷线性关系图2.4提取方法的选择2.4.1回流提取法取知母粗粉1g，精密称定，置100ml圆底烧瓶中，加甲醇80ml，水浴回流提取3h，滤过，用少量甲醇洗涤药渣及容器，滤液置于同一100ml量瓶中，放冷，用甲醇补足至刻度，摇匀

6、，取溶液5ml，置于50ml量瓶中，加70％乙醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液。2.4.2超声提取法取知母粗粉1g，精密称定，置100ml量瓶中，加甲醇至刻度，超声提取30min，放冷，用甲醇补足至刻度，摇匀，过滤，取续液5ml，置于50ml量瓶中，加70％乙醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液。按“2.3项下分别取上述溶液”起，依法操作，测定各供试品溶液的吸收度。结果见表1。表1不同提取方法对知母总黄酮含量的影响表1表明以上两种提取方法差别不大，回流提取法方法繁琐，耗时，能耗大；而且知母含有较多的黏液质，提取液较难过滤。而超声提取

7、法的方法更方便、简单、快速，易于过滤。因此,选择超声提取法提取知母总黄酮。2.5提取溶剂的考察按照上述优选的方法，分别以甲醇和70％乙醇作为提取溶剂，提取知母总黄酮，并进行含量测定，（见表2）。表2表明甲醇、70％乙醇提取知母总黄酮差别不大，由于甲醇有毒，对环境有污染，选择70％乙醇作为知母总黄酮提取溶剂。表2不同溶剂对知母总黄酮含量的影响2.6提取时间的考察分别取知母粗粉1g，精密称定，置于100ml量瓶中，加70％乙醇，稀释到刻度，分别超声20，30，40min，分别按“2.4.2项下放冷处理”起，依法操作,分别制备供试

8、品溶液，并分别测定（见表3）。表3表明超声30min，知母总黄酮含量不再提高，因此，选择超声提取时间为30min。表3超声时间对知母总黄酮的影响时间t/min吸收度A202.0076302.1388402.1387n＝32.7供试品溶液的制备按照上述优选的工艺参数制备供试品溶液，取知母粗粉