hplc法测定不同采收期小叶榕叶中异牡荆苷的含量

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1、HPLC法测定不同采收期小叶榕叶中异牡荆苷的含量【摘要】目的建立小叶榕叶中异牡荆苷的含量测定方法，并比较不同采收期小叶榕叶的异牡荆苷的含量差异。方法用HPLC法进行测定，流动相为甲醇水（38∶62），检测波长为270nm。结果不同采收期药材异牡荆苷最高含量达0.69％，最低为0.18％，7～12月份含量明显高于其他月份。结论该方法简便，准确，重复性好，适于小叶榕叶中异牡荆苷的含量测定。【关键词】高效液相色谱法；小叶榕叶；异牡荆苷；采收期　　Abstract:ObjectiveTodevelopaquanti

2、tativemethodtodetermineisovitexininFoliumFiciMicrocarpae,andtoparethecontentofisovitexininFoliumFiciMicrocarpaeofdifferentgroethodobilephase.Thedetection.ResultThehighestcontentofisovitexinfromdifferentgroothsonths.ConclusionThismethodple,quickandaccuratefo

3、rdeterminationofisovitexininFoliumFiciMicrocarpae.　　KeyFiciMicrocarpae;isovitexin　　小叶榕叶FoliumFiciMicrocarpae，又名小榕叶、落地金钱，来源于桑科榕属植物榕树（FicusmicrocarpaL.f.）的叶。小叶榕叶为民间常用中草药，其味淡，性凉，具有清热发表、解毒消肿、祛湿止痛的功效［1］。用于治疗哮喘和慢性支气管炎，在治疗心血管疾病、抗炎、抑菌等方面也都有显著的效果［2］。其中主要含黄酮、三萜类和甾体化合

4、物等化学成分［3］。小叶榕叶中的黄酮类成分主要为异牡荆苷（另文报道）。本实验采用HPLC法，建立了小叶榕叶中异牡荆苷的含量测定方法。该方法操作简便、快速、重现性好，适用于本品的质量控制。　　1仪器与试药　　美国poicrocarpaL.f.的叶。对照品异牡荆苷为自制，经UV、氢谱、碳谱鉴定（另文报道），并利用HPLC归一化法分析其纯度达99.48%。甲醇（色谱纯，天津科密欧公司），其他试剂均为分析纯。　　2方法与结果　　2．1色谱条件　　GracesmartC18色谱柱（250mm×4.6mm，5μm）；流动

5、相：甲醇水（体积比38∶62）；柱温：25℃；流速：1.0mL/min；检测波长：270nm；进样量：20μL。　　2．2对照品溶液的制备　　取异牡荆苷对照品适量，精密称定，以体积分数50％甲醇溶解，配制成每1mL含异牡荆苷21.6μg的溶液，以此作为对照品溶液。　　2．3供试品溶液的制备　　取本品粉末（过20目筛）约1g，精密称定，置圆底烧瓶中，精密加入体积分数50％甲醇50mL，称定重量，加热回流40min，放冷，再称定重量，以体积分数50％甲醇补足减失的重量，摇匀，过滤，精密量取续滤液10mL，通过聚

6、酰胺柱（60～80目聚酰胺约2g，装于内径1.5cm的小柱），以体积分数50％甲醇洗脱，洗脱液收集于100mL量瓶，并以洗脱液定容至刻度，摇匀，即得。　　2．4线性关系考察　　分别精密量取“2．2”项下对照品溶液0.25，0.5，1.0，2.0，3.5，5.0和10.0mL置10mL量瓶，加体积分数50%甲醇稀释至刻度，按上述色谱条件进样，测定峰面积，分别为11565、21718、44185、88508、153526、221861、458014，依峰面积（A）与质量浓度（ρ）绘制标准曲线，所得回归方程为A=2

7、1171ρ-2585.1，r=0.9996，表明异牡荆苷质量浓度在0.54～21.6μg·mL-1范围内线性关系良好。　　2．5精密度试验精密吸取对照品溶液，重复进样5次，测定峰面积，求得RSD值为0.73％，表明精密度良好，结果见表1。　　2．6稳定性试验　　对同一供试品溶液，分别于0，2，4，12，24h进样，测定异牡荆苷峰面积，求得RSD值为1.84％，表明样品在24h内稳定，结果见表1。　　2．7重复性试验取同一批号样品5份，按供试品溶液制备方法平行处理，依法测定，求得RSD值为0.42％，表明重复性

8、良好，结果见表1。表1精密度、稳定性、重复性试验测定结果（略）　　2．8回收率试验　　精密称取已知含量的样品数份，精密加入一定量的对照品溶液，依法测定，计算平均回收率为100.51％，RSD值为4.50％，结果见表2。表2回收率试验测定结果（略）　　2．9样品含量测定　　分别取不同采收期的样品按供试品溶液制备方法处理，依法测定，计算含量。结果见图1及表3。表3不同月份小叶榕叶中异牡荆苷的含量（略）