不同提取方法对虎杖中蒽醌类成分及其抗氧化活性影响的研究

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1、不同提取方法对虎杖中蒽醌类成分及其抗氧化活性影响的研究作者：刘建华，韩立强，赵汉雨，莫娟，张素梅，潘玉善【摘要】目的研究不同提取方法对虎杖蒽醌类成分及其抗氧化作用的影响。方法采用回流、索氏、微波及超声四种提取方法，测定四种提取液中的游离蒽醌和总蒽醌的含量；采用DPPH，FRAP两种方法测定其抗氧化活性，并分析蒽醌类成分和抗氧化活性之间的关系。结果在对游离蒽醌的测定中以索氏法为最高（0.53%），其次为超声（0.45%），各种方法之间相比差异显著（P＜0.05）；在对总蒽醌的测定中，结果如下：索氏（1

2、.16%）＞超声（1.15%）＞微波（1.04%）＞回流（0.80%）；抗氧化活性测定发现，以回流液的抗氧化能力最强，其次是微波，二者与超声和索氏的相比有显著性差异（P＜0.05）；相关性分析发现，蒽醌的含量与抗氧化活性呈显著的负相关(P＜0.01)。结论不同提取方法影响虎杖蒽醌类成分和抗氧化活性，蒽醌类成分和抗氧化活性之间具有负相关的关系。【关键词】提取方法；虎杖；蒽醌；分光光度法；抗氧化　　Abstract:ObjectiveToexploretheeffectofdifferentextrac

3、tionmethodsonthecontentofanthroquinonepoundanditsantioxidativeactivityinPolygonumcuspidatumSieb.etZucc..MethodsAnthroquinonepoundethod,Soxhletextractionmethodultrasoundethodandmicroinedbyspectrophotometry.Thecorrelationbetongthefourextractionmethodstat

4、ed（P＜0.05）,Soxhletextractionmethodethodinationoftotalanthroquinone,theresultethod（1.16%）>ultrasoundethod（1.15%）microethod>extraction.Therefluxmethodicroethodandultrasoundethod.Thereinationofitsantioxidantactivity（P＜0.05）．TherecuspidatumSieb.etZuc

5、c.ethods,thereethod;PolygonumcuspidatumSieb.etZucc.;Athroquinonepound;Spectrophotometry;Antioxidativeactivity虎杖系蓼科蓼属植物虎杖PolygonumcuspidatumSieb.etZucc.的根茎和根，具有抗菌、抗病毒等广泛的治疗作用［1］。其主要有效成分为蒽醌类、二苯乙烯类、黄酮类等。随着近年来对其药理作用的深入研究，虎杖的抗氧化作用也日益为人们所重视［2，3］。蒽醌类成分作为虎杖中主要

6、有效成分，在治疗疾病过程中起着较为重要的作用，本实验主要研究了不同提取方法对虎杖中蒽醌类成分及其抗氧化作用的影响，并分析蒽醌类成分和抗氧化活性之间的关系。　　1仪器与材料　　1.1仪器　　JY92-Ⅱ超声波细胞破碎仪，宁波新芝科器所；微波炉，广东美的微波炉制造有限公司；UV-2800紫外分光光度计，尤尼柯（上海）仪器厂；酸度计，意大利哈钠；微量移液器，eppendorf；Sartorius电子天平（型号1702，称量范围200g，感量0.1mg）,德国Sartorius；FZ102微型植物试样粉碎机

7、，北京市永光明医疗仪器厂；回流提取装置；索氏提取装置。　　1.2材料　　大黄素对照品（中国药品生物制品检定所，批号110756－200110，供含量测定用，经归一化法标定98.0%）；二苯代苦味酰基自由基(1，1-pheny-2-picrylhydrazyl，DPPH)Sigma；TPTZ（2，4，6-tripyridyl-s-trizine）Sigma；虎杖药材（购自河南仟僖堂医药公司，经河南中医学院曹继华教授鉴定为正品）；其余试剂均为国产分析纯。　　2方法　　2.1对照品溶液的制备精密称取大黄素

8、对照品(105℃干燥至恒重)4.1mg，置50ml量瓶中，加甲醇溶解，定容至刻度。精密吸取上述溶液1ml，置10ml量瓶中，加0.5%醋酸镁-甲醇溶液至刻度，作为对照品溶液。　　2.2样品的前处理将虎杖经过干燥，采用微型植物试样粉碎机进行粉碎，过60目筛，粉末经恒温（60℃)干燥24h后，放干燥器中，备用。　　2.3供试品溶液的制备　　2.3.1回流提取液的制备精密称取2.2项下样品约0.5g，置50ml的圆底烧瓶中，加70%的乙醇回流提取3次，提取时间分别为1.5，