肾综颗粒对阿霉素肾病大鼠形态和功能的影响

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1、肾综颗粒对阿霉素肾病大鼠形态和功能的影响作者：刘霞黄岩杰吴文先陈团营【摘要】探讨肾综颗粒对阿霉素肾病大鼠肾组织形态及功能的影响。［方法］利用尾静脉注射阿霉素（ADR）建立大鼠肾病模型，灌服肾综颗粒，检测尿蛋白定量、血清与肾组织匀浆中的超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）含量及观察肾脏病理形态学改变。［结果］肾综颗粒能有效降低尿蛋白，降低血清及肾组织MDA水平，提高SOD活力，改善病理损伤。［结论］肾综颗粒可以减少尿蛋白，对抗自由基引起的脂质过氧化损伤，明显改善阿霉素肾病大鼠肾脏病理形态和功能。【关键词】肾综颗粒；阿霉素肾病；病理性态E

2、ffectofShenzongGranuleonShapeandFunctionofRats；function肾综颗粒是我们多年来治疗小儿肾病综合征的有效良方，临床上取得了满意的效果。本实验旨在观察肾综颗粒对阿霉素肾病大鼠脂质过氧化损伤、病理形态学等方面的影响，探讨其对肾病综合征的治疗作用。　　1实验材料　　1.1实验动物及分组　　雄性SD大鼠，体重（150±10）g，30只，由河南省实验动物中心提供（合格证号：医动字第410101号）。适应性喂养1周，无异常发现，30只大鼠随机分为3组：对照组、模型组、治疗组，每组10只。　　1.2实验药

3、物及试剂　　肾综颗粒主要成份为黄芪、茯苓、生地、泽泻、丹参、水蛭等，由河南中医学院一附院制剂中心提供，临用时用双蒸水制成混悬液，使1ml含生药2.5g；阿霉素由意大利法玛西普强公司生产，规格10mg/瓶。SOD及MDA测试盒由南京建成生物工程研究所生产。　　2实验方法　　2.1动物造模及给药方法　　采用阿霉素诱导的肾病综合征模型。实验第二周，模型组和治疗组大鼠按6.5mg/kg阿霉素经尾静脉注射一次复制肾病综合征模型。每天用试纸法检测尿蛋白情况，若尿蛋白出现，并且呈进行性加重，尿蛋白定性≥3+，证明造模成功。造模一周后各组均灌胃给药，对照组

4、、模型组按10ml/（kg·d）蒸馏水灌胃；治疗组按肾综颗粒25g生药/（kg·d）灌胃（溶入蒸馏水，1ml含生药2.5g），疗程均为6周。　　2.2检测指标及方法　　（1）观察大鼠的精神状况、体重体毛、饲料量、饮水量、二便情况等。（2）尿蛋白检测：分别于造模前，造模后第2、4、7周各测定24h尿蛋白定量1次，采用磺柳酸法。（3）血清与肾组织匀浆中SOD、MDA于实验结束时摘眼球取血，2ml/只，观察血清SOD及MDA改变；处死大鼠后即剖腹取肾脏，剪下肾皮质1小块，用冰冷生理盐水洗净残血，滤纸吸干，称重，用生理盐水按1∶9（in，将匀浆液置

5、低温冷冻离心机中，以20000rpm离心10min，取上清液，置离心管中，低温保存，用于测定肾组织中的SOD及MDA。SOD活性测定采用黄嘌呤氧化酶法，MDA测定采用硫巴比妥酸法，均严格按照试剂盒说明书进行。（4）肾脏病理学检查常规石蜡切片，进行HE和PAS染色，光学显微镜下观察各组大鼠肾小球及肾间质的变化情况；常规电镜标本制作，用日立Ho7500型透射电镜观察肾脏病理变化。　　2.3统计学处理　　所有的统计检验均采用双侧检验。数值变量采用均数（x）±标准差（s），组间比较采用单因素方差分析。　　3实验结果　　3.1实验大鼠的一般情况　　造

6、模3d后，模型组和治疗组大鼠出现不同程度的腹泻、精神不佳、饲料量和饮水量减少、阴囊水肿、毛发蓬松、生长迟缓、消瘦等表现，尤以模型组最为显著。在实验过程中模型组有3只大鼠死亡，治疗组有2只死亡。死亡大鼠均有严重腹泻，消瘦明显，其中有2只出现鼻部血性分泌物。　　3.2对大鼠尿蛋白定量的影响　　通过以上实验结果可以看出，治疗组与模型组比较，具有显著性差异（P＜0.05），说明肾综颗粒具有减少尿蛋白的作用。表1各组大鼠24h尿蛋白定量的比较（略）与模型组比较，★P＜0.05　　3.3对大鼠血清及肾组织匀浆SOD、MDA的影响　　表2结果表明：治疗组

7、能降低血清及肾组织MDA水平，提高SOD活力，与模型组比较有显著性差异（P＜0.05）。表2各组大鼠血清及肾组织匀浆SOD、MDA水平的比较（略）与模型组比较，★P＜0.05　　3.4对大鼠病理形态学方面的影响　　光镜下可见对照组肾小球系膜基质无增生，肾小管管腔正常，肾间质小血管无改变；模型组肾小球系膜基质增生明显，肾小管蛋白管型，肾间质血管瘀血严重；治疗组系膜轻度增生，肾小管蛋白管型较轻，病变程度较模型组明显减轻。对照组电镜观察肾小球基底膜光滑均匀，未见增厚，足突清晰完整、未见融合，血管腔开放好；模型组肾小球基底膜偶见增厚，足突融合严重，

8、与对照组比较有明显差异；治疗组肾小球基膜平滑，未见增厚，足突融合程度与模型组比较减轻。　　4讨论本实验模型组血清及肾组织MDA均明显升高，而SOD活力明显下降，说明在肾病综合征大