塞来昔布联合顺铂对sgc

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1、塞来昔布联合顺铂对SGC作者：崔京远　马红　李梅　杨洁　张峻　周东风【摘要】目的:探讨选择性环氧化酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布联合顺铂对SGC-7901人胃癌细胞生长、凋亡及Bcl-2表达的影响。方法:终浓度为100、200及300μmol/L的塞来昔布作用于SGC-7901人胃癌细胞24h后加入顺铂(2.0μg/mL)，采用MTT比色法测定细胞的生长抑制率，流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡率及Bcl-2表达水平。结果：不同浓度的塞来昔布对SGC-7901人胃癌细胞均有抑制作用，抑制率与对照组相比，差异有统计

2、学意义(P<0.05);流式细胞学检测到凋亡峰，细胞阻滞于G0/G1期。同时伴随Bcl-2表达水平下降，其抑制作用呈时间-剂量依赖性，且以上抑制作用与顺铂具有协同作用。结论：塞来昔布能促进顺铂诱导胃癌细胞凋亡，进而抑制胃癌细胞的增殖，这可能是COX-2抑制剂抗肿瘤的机制之一。【关键词】塞来昔布·顺铂·胃肿瘤·Bcl-2·细胞凋亡　　【ABSTRACT】Objective：Tostudytheeffectsofcelecoxib,aselectiveCOX-2inhibitor,angastriccancerc

3、elllineandtoexploreitsanti-neoplasmmechanism.Methods：MTTassayinecellproliferationafterincubationindifferentconcentrations(100，200，300μmol/L)ofcelecoxibL).Floetryineapoptoticrate,cellcycleandBcl-2level.Results：Celecoxibsignificantlyinhibitedthegroangastriccance

4、rcellsandelevatedtheinhibitingrateparededependentmanner，andangastriccancercellline.Theresultsindicateoneofthemechanismsoftheanti-cancereffectofCOX-2inhibitor.　　【KEYI-1640培养基为Gibco公司产品;鼠抗人Bcl-2-FITC为法国国际免疫公司产品;DDP为济南齐鲁制药厂产品;塞来昔布购自辉瑞公司。　　1.2　方法　　1.2.1　细胞培养　以1.0×

5、105mL-1密度接种SGC-7901细胞在含10%新鲜小牛血清、100U/mL青霉素及100μg/mL链霉素的RPMI-1640培养基中，置37℃、5%CO2、饱和湿度下培养，实验时取对数生长期细胞。　　1.2.2　细胞的药物处理　实验分4组，取对数生长期的SGC-7901人胃癌细胞，吸去培养液，对照组为仅加入RPMI-1640培养液者;塞来昔布组分别加入终浓度为100、200及300μmol/L的塞来昔布;塞来昔布+DDP组为加入100、200及300μmol/L的塞来昔布作用4h后加入2.0μg/mLDDP;

6、DDP组为仅加入2.0μg/mLDDP者，隔天换液1次。并于倒置显微镜下观察，分别于24、48、72h收集细胞用于实验。　　1.2.3　细胞生长抑制率检测　采用MTT比色法测定各组对SGC-7901人胃癌细胞的生长抑制率。　　1.2.4　流式细胞学检测　分别收集各组细胞106个，以70%乙醇固定24h后，冷PBS液洗涤2次，离心后弃上清，碘化丙啶0.5mL重悬细胞，室温下避光染色30min，上流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡率及Bcl-2蛋白表达水平。　　1.2.5　细胞形态学观察　取各组细胞，培养24h后倒去培养

7、液，用4%的多聚甲醛固定，PBS缓冲液冲洗，HE染色，光学显微镜下观察。　　1.3　统计学处理　采用SPSS11.5统计软件包进行分析，数据用x±s表示。P≤0.05为差异有统计学意义。　　2　结果　　2.1　各组对SGC-7901人胃癌细胞增殖的影响　终浓度为100、200、300μmol/L的塞来昔布作用于SGC-7901人胃癌细胞后，随时间延长，细胞的生长均受到抑制，抑制率与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);同时发现塞来昔布+DDP组对胃癌细胞生长抑制作用更明显，抑制率与塞来昔布组、DDP组相

8、比，差异有统计学意义(P<0.05)，且随培养基中塞来昔布浓度增加和时间的延长，抑制作逐渐增强(表1)。　　2.2　各组对SGC-7901人胃癌细胞凋亡的影响　流式细胞仪分析表明，胃癌细胞在塞来昔布作用后表现为G0/G1期阻滞，在G1峰前出现凋亡峰(AP峰)。塞来昔布对胃癌细胞的凋亡诱导作用呈时间依赖性及剂量依赖性，如100μmol/L塞来昔布作用SG