胞苷脱氨酶基因多态性对阿糖胞苷效果的影响论文

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1、胞苷脱氨酶基因多态性对阿糖胞苷效果的影响论文马经野罗先红方海琳许蕴【摘要】目的：探讨急性白血病病人胞苷脱氨酶基因多态分布及不同基因型患者的疗效与转归。方法：采用PCR扩增目的片段并直接测序来了解CDA基因G208A位点基因多态。结果：CDA基因第1号外显子存在G208A多态，有GG、GA和AA3种基因型，其G等位基因频率为95.14%，而A等位基因频率为4.86%，同时发现未缓解比率在GG、GA和AA两组之间无统计学差异（=0.96，P0.05），但其复发率在两组之间存在差异（=5.04，P0.05）.freelorphismofcytidinedeam

2、inase(CDA)frompatientsiaandthepatients'curativeeffect.MethodsThepolymerasechainreaction(PCR)andsequencingtechnologiesorphisminthefirstextronofCDAebetorphismofG208AinfirstextronofCDA,thedifferentgeypehaddifferentialinfluencetotheprognosisofpatients.〔KeyP，再经两步磷酸化生成阿糖胞苷三磷酸（Ara-CTP）发

3、挥细胞毒作用，另一方面又被胞苷脱氨酶（cytidinedeaminase,CDA）迅速脱氨生成无活性的阿糖鸟苷（Ara-U），DCK和CDA活性与临床疗效有着密切关系。病人的CDA活性差异与基因结构相关1。本研究对2003年1月-2005年5月住院的72例急性白血病患者进行了前瞻性研究，分析CDA基因G208A位点基因多态分布及不同基因型的疗效与转归。现报道如下。1材料与方法1.1研究对象我院住院治疗的初发急性白血病患者72例，男性33例，女性39例，年龄在16~82岁，平均46岁。其中急性淋巴细胞白血病（ALL）21例，急性髓细胞白血病（AML）51例

4、（M27例、M313例、M410例、M521例）。急性白血病诊断标准按张之南主编的《白血病诊断及疗效标准》2。出院随访至6个月。1.2方法1.2.1人基因组DNA样品的制备于患者化疗前无菌取外周血10mL，肝素抗凝，采用常规的Stafford酚提取法提取DNA，紫外分光光度计测定260nm和280nm的A值及比值。样本保存于4℃待测。1.2.2DNA基因G208A多态位点基因型检测通过NCBI网站获取基因的基因组序列，利用在线引物的设计软件Primer3设计引物，G208A位点包含在上下游引物之间。上游引物序列为：5’-GAGGAGCTGCAATCGTG

5、TCT-3’，下游引物序列为：5’-TTGAAGATTCTCCCCTCCTG-3’。50LPCR反应体系中含KCl50mmol/L，Mg离子1.5mmol/L，Tris-HCl10mmol/L，pH8.0，dNTP200mol/L，目的片段上下游引物0.1mmol/L，稀释后的模板DNA5L，TaqDNA聚合酶3U。PCR反应条件为94℃预变性5min，进入循环94℃变性45s，52℃退火30s，72℃延伸1min，共30个循环后72℃延伸10min。1.0%琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物，符合条件的送上海博亚生物技术有限公司进行正反向序列测定。1.2.3治

6、疗方案AML51例中，13例M3用全反式维甲酸诱导后再用DA方案（柔红酶素+Ara-C）或HA方案（三尖杉+Ara-C），其余均用DA方案或HA方案作为诱导治疗；ALL用DVP（柔红酶素+长春新碱+泼尼松）诱导治疗后用大剂量的Ara-C。1.2.4统计学分析所有资料均以MicrosoftExcel2000软件建立相关数据库，采用SPSS11.0统计软件进行统计分析。基因型频率和等位基因频率的差异采用卡方检验（需要校正的采用其校正公式进行计算），按Hardy-L,etal.Sensitivityofacutileukemiacellstocytaeabin

7、eisacorrelatesnucleosidetransportersitecontentmeasuredbyfloetryorphisminthehumancytidinedeaminasegenecontributingtoAra-Csensitivity〔J〕.Pharmacogeics,2003,13:29-38〔4〕杜庆峰,刘晓力,周淑芸,等.羟基喜树碱联合阿糖胞苷治疗高急慢性粒细胞白血病观察〔J〕.中国现代医学杂志,2002,12(20):42-43,46〔5〕SchroderJK,KirchC,SeeberS,etal.Structura

8、landfunctionalanalysisofthecytidinedeami