蛇鳞草提取液体外抑菌作用研究论文

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1、蛇鳞草提取液体外抑菌作用研究论文.freelg/ml，MBC为500mg/ml，对大肠杆菌的MIC为250mg/ml。蛇鳞草醇提液对金黄色葡萄球菌的MIC为125mg/ml，MBC为500mg/ml.freelg/ml，MBC为500mg/ml。两种提取液对绿脓杆菌均未呈现抑菌活性。结论蛇鳞草提取液具有一定的抑菌和杀菌活性。【关键词】蛇鳞草；抑菌活性；最低抑菌浓度；最低杀菌浓度蛇鳞草Abacopteristriphylla(Sl锥形瓶中，加入100ml蒸馏水，加热至全溶，调整pH为7.4，封瓶口后灭菌备用。2.1

2、.2营养肉汤培养基准确称取9g营养肉汤至500ml锥形瓶中，加入500ml蒸馏水，加热至全溶，调整pH为7.4，封瓶口后灭菌备用。2.2溶液制备2.2.1蛇鳞草水提液的制备称取50g蛇鳞草干品，剪碎放入烧杯中，加适量蒸馏水浸泡30min后加热煎煮1h，经过滤得第一次煎液；药渣再加入适量蒸馏水加热煎煮1h。合并两次水煎液，浓缩至每毫升药液相当于含生药1g。2.2.2蛇鳞草醇提液的制备称取50g蛇鳞草干品，剪碎放入圆底烧瓶，加入适量稀释至60%的乙醇液，安装回流装置，加热回流1h，过滤得第1次醇提液；药渣再加入适量乙

3、醇液加热回流1h，过滤。合并两次滤液，浓缩至每毫升药液相当于含生药1g。2.2.3麦氏比浊标准液［7］的配制用电子天平称取1.1756g氯化钡，蒸馏水定容至100ml，配成0.048mol/L氯化钡溶液；再量取1ml95%浓硫酸，加入94ml蒸馏水，配成0.18mol/L硫酸溶液。0.048mol/L氯化钡0.5ml加0.18mol/L硫酸溶液99.5ml，混匀后用530nm波长比色调整其浊度，使吸光度为0.1该浊度为0.5麦氏比浊标准，相当于5×（107～108）CFU/ml。2.2.4菌液［8］的配制实验菌种

4、经平板分离培养24h后，挑取数个菌落置于生理盐水试管中，校正浓度至0.5麦氏标准，再用营养肉汤1∶100稀释，使含菌量达到106CFU/ml为工作浓度。2.3最低抑菌浓度（MIC）判定标准首先在观察细菌对照组长菌呈浑浊状，而药物对照组不长菌，呈透明清亮状的前提下，再观察实验组试管的浑浊情况，以判断不同浓度药液的抑菌作用，如试管内呈浑浊，表明有细菌生长，用“＋”表示；如试管内透明清亮，表明无细菌生长，用“-”表示。2.4蛇鳞草水提液MIC的测定［8］取30支试管于试管架上，分为3组，每组10支。用移液管吸取2ml营

5、养肉汤于每支试管内，再另取移液管吸取2ml蛇鳞草水提液（1g/ml）于每组的第1支试管内，吹匀，使药液与肉汤混匀，再从每组第1管吸取2ml混匀液到每组第2管中，如此类推一直到第9管，再从第9管中吸取2ml混匀液舍去，第10管为细菌对照组，不加药液。即每组试管中的药液浓度为0.5，0.25，0.125，0.063，0.032，0.016，0.008，0.004，0.002，0.000g/ml。3组试管分别加入金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和绿脓杆菌的实验菌液0.1ml。另取9支试管，稀释步骤按上述进行，此组不加入菌液，为

6、药液对照组。将试管置于37℃培养箱中培养24h，实验组与对照组对比观察结果。结果见表1。表1蛇鳞草水提液最低抑菌浓度（MIC）的测定（略）表1实验结果可见，蛇鳞草的水提取液对金黄色葡萄球菌的MIC为63mg/ml，对大肠杆菌的MIC为250mg/ml，各浓度水提取液对绿脓杆菌均未呈现抑菌活性。表明蛇鳞草水提取液对金黄色葡萄球菌的敏感性比大肠杆菌高，抑制金黄色葡萄球菌的效果较好。至于各浓度水提液对绿脓杆菌未得出MIC，初步分析可能为药物未浓缩至对绿脓杆菌的有效抑菌浓度，有待进一步实验验证。2.5蛇鳞草醇提液MIC的

7、测定具体操作方法同蛇鳞草水提液MIC的测定。结果见表2。表2蛇鳞草醇提液的最低抑菌浓度（MIC）的测定（略）表2实验结果可见，蛇鳞草醇提取物对金黄色葡萄球菌的MIC为125mg/ml，对大肠杆菌的MIC为250mg/ml，醇提取物各稀释浓度对绿脓杆菌均无抑菌活性，对比蛇鳞草水提取物的抑菌效果，醇提取物对金黄色葡萄球菌的抑菌效果不如水提取液好，而对于大肠杆菌两种提取物的抑菌效果相当。2.6蛇鳞草水提液及其醇提液的MBC测定［9］分别取蛇鳞草水提液和醇提液各有效抑菌浓度药液和对照组相对应的浓度药液0.1ml移种至不含

8、药物的营养琼脂平皿上，用灭菌接种环轻推药液，各平皿置37℃培养箱中培养24h，观察有无细菌生长。以平皿培养基中，计数少于5个菌落者作为该药物的最低杀菌浓度（MBC）。结果见表3。表3蛇鳞草水提液与醇提液最低杀菌浓度（MBC）测定结果（略）表3实验结果可见，蛇鳞草水提液与醇提液对金黄色葡萄球菌的最低杀菌浓度（MBC）均为500mg/ml，蛇鳞草醇提液对大肠杆菌的MBC为50