轮叶党参提取物对脑血栓栓塞大鼠溶血磷脂酸和磷脂酸水平的影响

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1、轮叶党参提取物对脑血栓栓塞大鼠溶血磷脂酸和磷脂酸水平的影响作者：吕立勋韩刚董月原海忠王成强【摘要】目的考察轮叶党参乙醇提取物对脑血栓栓塞大鼠血浆溶血磷脂酸（LPA）和磷脂酸（PA）水平的影响。方法采用颈内动脉直接插管注入凝血酶建立大鼠脑血栓栓塞模型。SD大鼠40只，随机分为正常对照组、模型组、假手术组、轮叶党参提取物低、中剂量组。除正常对照组外，其余4组大鼠建立脑血栓栓塞模型。轮叶党参提取物组预先14d灌胃给予轮叶党参乙醇提取物，观察轮叶党参乙醇提取物对大鼠脑血栓栓塞后LPA和PA水平的影响。结果与正常对照组比较，模型组大鼠血浆溶血LPA和PA水平升高

2、（P<0.05）；预防性给予轮叶党参乙醇提取物可明显降低血浆LPA和PA水平（P<0.05）。结论轮叶党参乙醇提取物可降低脑血栓栓塞大鼠血浆LPA和PA水平。【关键词】轮叶党参；溶血磷脂酸；磷脂酸；脑血栓栓塞　轮叶党参(Codonopsislanceolata)属桔梗科党参属多年生草本植物，分布于我国东北、华南、西南等地〔1〕。轮叶党参含多种维生素、皂苷、多糖、黄酮类化合物、齐墩果酸及挥发油，具有抑制肿瘤生长、抗疲劳、降血脂、抗氧化及清除自由基等作用〔2～4〕，对人血小板有抗凝集作用〔5〕，但其抗血栓研究鲜见报道。磷脂代谢的中间产物溶血磷脂

3、酸(lysophosphatidicacid，LPA)和磷脂酸(phosphatidicacid,PA),在(心)脑卒中的发生过程中可能起重要作用。血浆LPA的增高标志着血小板活化,而PA水平的增高则反映脑缺血缺氧程度,与氧自由基的过度形成有关。当血浆中LPA明显增高时，凝血过程开始，预示有形成血栓的可能〔6〕。LPA一般在体内含量较低，主要在血小板被激活时释放，刺激血小板聚集和平滑肌收缩，促进血管内皮增生，在凝血和血栓形成过程中起着重要的作用〔7〕。血小板活化在脑梗死的发生发展、治疗和预后中有重要意义。本文采用凝血酶凝血的方法建立大鼠脑血栓栓塞模型，

4、研究轮叶党参乙醇提取物对脑血栓栓塞大鼠LPA和PA水平的影响。　　1材料与方法　　1.1仪器　　TU1810型紫外可见分光光度计（北京普析通用公司）；RE52A型旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂）；KDC1042低速离心机（科大创新股份有限公司）；SK1型快速混匀器（江苏医疗仪器厂）。　　1.2试剂　　凝血酶（安徽桑尼生物药业有限公司，规格500U）；LPA测定用套装试剂盒（北京泰福仕科技开发有限公司）；轮叶党参（产于长白山）由延边大学医学院提供；其余试剂均为分析纯。　　1.3动物　　健康清洁级SD大鼠40只，雌雄各半，体重240～260g，购于

5、北京实验动物有限公司，动物许可证号：SCXK（京）20060330。　　1.4方法　　1.4.1轮叶党参乙醇提取物的制备　　将切碎的轮叶党参根茎浸入70%乙醇中，于70℃水浴中浸泡，并不断搅拌4h，过滤得到上清液，将滤渣重复操作一次，合并上清液置于旋转蒸发仪中于70℃减压浓缩，干燥后得到轮叶党参乙醇提取物，备用。　　1.4.2动物分组与给药　　40只大鼠随机分为，正常对照组、模型组、假手术组、轮叶党参乙醇提取物低、中剂量组，每组8只。除正常对照组外，其余4组大鼠建立脑血栓栓塞模型。正常对照组、假手术组、模型组术后4h断头处死取血；轮叶党参乙醇提取物低(

6、0.5g/kg)、中(1g/kg)剂量组术前每天灌胃给予轮叶党参乙醇提取物，连续给药14d，其余过程同模型组。　　1.4.3大鼠脑血栓栓塞模型的建立〔8〕　　术前大鼠禁食12h，用1%戊巴比妥钠(30mg/kg)腹腔注射麻醉后，仰卧位固定于手术台上。颈正中部纵向切开皮肤，切口长约2cm，游离出右侧颈总动脉，从颈总动脉分叉处向上分离颈外动脉和颈内动脉。结扎颈外动脉，然后向颅底方向分离颈内动脉，在颅底处分离出翼腭动脉，并结扎其根部，仅保留颈内动脉入颅底主干；结扎颈总动脉，暂用2只微型动脉夹间隔一定距离夹闭颈内动脉，在近心端颈总动脉处用眼科剪剪一小口，插入导

7、管(内已抽好血栓诱导剂凝血酶10U加生理盐水0.05ml)固定后，移去近导管端血管夹，少量血液流入导管头端，放置约10min形成一小血栓，然后移去另一只血管夹，缓慢将此血栓和凝血酶注入颈内动脉后，拔出导管,并将颈总动脉切口处结扎，缝合切口；术后单笼饲养。假手术组手术操作过程同上，只是不注入血栓和凝血酶，而注入等量生理盐水。　　1.4.4血浆LPA和PA测定　　取全血约4ml，置于涂有肝素抗凝剂的离心管中。4000r/min离心10min，准确吸取上清1ml，抽提磷脂成分。加入显色剂于90℃水浴5min，取出放置35min后经紫外分光光度计测定吸光度值，

8、计算LPA和PA的浓度。　　1.5统计学分析　　计量资料均以x±s表示。采用SPSS11.5统