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1、乳腺康巴布剂提取工艺研究论文.freelizetheextractingconditionforeffectiveingredientsofRuxiankangCataplasmata.MethodsTheorthogonaltestumextractingconditions.TanshinoneⅡAandcondensaterateinedbytheHPLC.ResultsTheextractionmethod(95%alcohol-50%alcohol-uchastesofsolventfor1handfinemedicinepoeshsieve)oreeffective.
2、ConclusionTheextractingconditionoptimizedbyorthogonaltestisfeasible.Keyata；tanshinoneⅡA；orthogonaltest；extractioncondition；HPLC丹参系唇形科鼠尾草属植物丹参(SalviamiltiorrhizaBge.)的干燥根及根茎,具有祛瘀止痛、活血通经、清心除烦的功效。乳腺康巴布剂由丹参、莪术、拳参、鸡血藤、瓜蒌、地龙组成,其中丹参为君药。丹参中的脂溶性成分具有天然抗氧化作用、抗动脉粥样硬化、降低心肌耗氧量及抗菌、抑菌、抗炎、抗肿瘤作用；丹参中的水溶性成分对脂质过氧
3、化引起的细胞膜损伤有明显的保护作用,.freelL,备用。每组试验重复2次。2.3含量测定2.3.1色谱条件色谱柱：KromasilCl8(150mm×4.6mm,5μm),流动相：甲醇-水(83∶17),流速：1.0mL/min,检测波长：270nm。色谱图见图1。2.3.2对照品溶液的制备取丹参酮ⅡA对照品适量,精密称定,置棕色量瓶中,加95%乙醇制成每1mL含41μg的溶液,即得。2.3.3标准曲线绘制分别精密吸取对照品溶液(41.00μg/mL)5、10、15、20、25μL,进样测定,以对照品进样量对峰面积作图,计算,得回归方程：Y＝4723.8X－263.97,r＝0
4、.9996,说明丹参酮ⅡA对照品在0.205～1.025μg范围内有较好的线性关系。2.3.4精密度试验精密吸取对照品溶液15μL,按“2.3.1”项下条件测定,连续测定5次峰面积,结果表明,精密度RSD＝1.71%,说明精密度较高。2.3.5加样回收率试验吸取一定量已知含量的提取液,加入一定量丹参酮ⅡA对照品,制备成5份样品,按前述条件进行测定。平均加样回收率为100.8%,RSD＝1.01%。2.3.6样品测定吸取正交试验药液各2mL,加95%乙醇定容至10mL,摇匀,经0.45μm微孔滤膜过滤,取续滤液为供试品溶液。精密吸取供试品溶液10μL,按“2.3.1”项下条件测定。
5、结果见表2,方差分析见表3。表2L9(34)正交试验结果（略）表3丹参酮ⅡA方差分析表（略）2.4浸膏率测定精密吸取正交试验药液5mL,至已干燥至恒重的蒸发皿中,水浴蒸干,105℃烘3h,移至干燥器中,冷却30min,迅速精密称定重量,以干燥品计算供试液中浸出物的含量,得出浸膏率。结果见表2,方差分析见表4。表4浸膏率方差分析表（略）根据直观分析结果,极差大小分析得知：A因素对丹参酮ⅡA提取效率和浸膏率影响比较大,B、C因素影响较小。结果表明,粉碎度对丹参酮ⅡA提取效率和浸膏率影响差异有统计学意义(P＜0.05),溶剂量和提取时间对提取效率影响差异无统计学意义(P＞0.05)。F
6、0.05(2,2)＝19.00,F0.01(2,2)＝99.00。综合分析,并从生产角度考虑4,最佳提取工艺为A3B3C2,即药材粉碎成40目粉,每次加12倍量溶剂,每次提取1h。2.5验证试验为了考察所选的提取工艺是否稳定,按该工艺重复3次,即粉碎成40目粉,每次加12倍量溶剂,各次提取1h。提取后样品处理方法同“2.3.6”,平行操作3份样品,测定其中丹参酮ⅡA及浸膏得率,结果见表5。表5验证试验结果（略）3讨论在试验中发现,随着回流时间延长,测得丹参酮ⅡA含量呈下降趋势,可能是丹参酮ⅡA乙醇溶液和水溶液和对光、热和温度不稳定造成的5。此外,过碱性或过酸性的提取体系,也会造成
7、丹参酮ⅡA不稳定甚至降解或转化。所以,在提取丹参药材及其制剂时,如果以丹参酮ⅡA为有效成分尤其是作为指标控制成分,上述影响因素应加以注意。笔者开发的剂型为巴布剂,因此,在药材提取过程中选取了浸膏率作为提取的标准,另外选择了君药丹参中的主要有效成分丹参酮ⅡA作为提取效果的指标。在建立分析方法时,主要以丹参酮ⅡA为研究对象开展相应的分析方法学研究。丹参提取物成分较为复杂,根据现有试验条件,采用高效液相色谱法对提取液中的丹参酮ⅡA进行含量测定方法学研究。在此基础上,笔者又对提取液中水溶
