黄连等6种中草药对都柏林念珠菌抗菌活性的比较研究

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1、黄连等6种中草药对都柏林念珠菌抗菌活性的比较研究作者：王小丽钟有添马廉兰【摘要】　　目的比较黄连、知母、七叶一枝花、黄芩、大黄、五倍子对都柏林念珠菌的体外抗菌活性。方法采用出芽实验法、肉汤微量稀释法和传统的琼脂扩散法。结果都柏林念珠菌对黄连、知母、七叶一枝花、黄芩敏感，抑菌圈直径在23~28mm之间，MIC分别是：0.06~0.125，0.06~0.125，0.125~0.25，0.25~0.5g/ml。黄连、知母、黄芩、大黄抑制出芽效果更好。结论黄连、知母、黄芩对都柏林念珠菌具有较好的抑菌效果，且抑制都柏林念珠菌出芽效果

2、也较好。【关键词】中草药都柏林念珠菌抗菌活性出芽实验法　　Abstract：ObjectiveToparesixChineseherbalmedicine'antimicrobialactivityonCandidadubliniensis.MethodsThemethodsofagarplatediffusions,tubecontinuousdilutionandgerminativetestarrhenaasphodeloidsesBunge，ParispoludhullaSmith,Scutellaraiabaic

3、alensisGeorgihadgoodantimicrobialactivityonCandidadubliniensis,thediameterofbacteriostaticcircleillimetreandtheMICl.CoptischinensisFranch，AnemarrhenaasphodeloidsesBunge，ScutellaraiabaicalensisGeorgi，R.offiainaleBaillhadgoodeffectingerminativetest.ConclusionCoptisc

4、hinensisFranch，AnemarrhenaasphodeloidsesBunge，ScutellaraiabaicalensisGeorgihavegoodantimicrobialactivityonCandidadubliniensis,andhavegoodeffectingerminativetest.　　Keyedicine；Candidadubliniensis；Antimicrobialactivity；Germinativetest　　都柏林念珠菌是1995年由Sullivan等在爱尔兰共和国的都

5、柏林大学报告为一组具有非典型特征的假丝酵母菌，命名为都柏林念珠菌［1，2］，该菌种在人类免疫缺陷病毒感染者和艾滋病患者的口腔中分离率高达19％～32％，在其他人群口腔中的分离率为3％～14．6％［3~5］，临床上观察到都柏林念珠菌主要引起免疫缺陷患者的口咽部感染，较少引起其他部位及全身播散性感染［6，7］。目前临床上仍常用制霉菌素、酮康唑等西药，有报道出现耐药性［8~10］。因都柏林念珠菌的培养特性、染色形态及许多生物学特性与白念珠菌非常相似，本实验选用对白念珠菌具有较好抑菌效果的黄连、知母、七叶一枝花、黄芩、大黄、五倍子

6、［11，12］，采用芽管实验法［13，14］、美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)M27-A方案［15］和传统的琼脂扩散法，综合比较出黄连、知母、七叶一枝花、黄芩、大黄、五倍子对都柏林假丝酵母菌的抑菌强弱，从而为今后中草药复方治疗都柏林假丝酵母菌性口腔疾患提供理论依据。　　1材料　　1.1中草药提取物的制备取干燥中草药（均购自赣州市医药公司）400g，加双蒸水过液面2cm，煮沸两次。30min/次，合并滤液，浓缩至200ml。加3倍量50％的乙醇，放冰箱静置过夜，次日减压过滤，并回收滤液中乙醇，继续浓缩滤液得无醇味

7、的提取物。提取物加双蒸水至100ml使药液为相当生药4g/ml。置冰箱中备用。　　1.2菌株都柏林念珠菌标准菌株（CCCCMIDC8a），购于南京中国医学科学院皮肤病研究所。　　1.3菌液的制备菌株在沙保葡萄糖琼脂（Sabourauddextroseagar）上进行传代培养后用于检测。分光光度计在530nm处检测接种菌悬液，调节浓度至1.0×106细胞/ml,稀释100倍备用。　　2方法　　2.1琼脂扩散法用无菌棉签沾取菌液在沙氏琼脂平板上作均匀密集划线，待菌液干燥后，用外径5mm的打孔器打孔，每孔加药液200μl，平放在

8、37℃霉菌培养箱中培养35h，观察结果，测量抑菌圈直径。抑菌圈直径取两次实验结果的平均值。　　2.2肉汤微量稀释法根据实验室标准协会（ClinicalandLaboratoryStandardsInstitute,CLSI,NCCLS）的M27-A标准，采用肉汤微量稀释法在含2%葡萄糖的RPMI中进行抗