磷酸缓冲液及(ph

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1、磷酸缓冲液的（PH6.8）配制A：磷酸二氢钾：4.559g+500ml蒸馏水B：磷酸氢二钠：11.908g+500ml蒸馏水C：Giemsa原液A+B+C=22ml+27ml+7.5ml磷酸缓冲液的（PH7.2）配制A：磷酸二氢钾：1.77g+1000ml蒸馏水B：磷酸氢二钠：19.4g+1000ml蒸馏水C带制作法1.用0.0175M的NaOH溶液处理半分钟后再处理1分钟，取出放在75﹪、75﹪、95﹪、95﹪的各级酒精中漂洗1-2分钟（脱水），将玻片干燥后置于已经预热650C的6SSC溶液中，放在水浴箱中12-17小时，再用370C预热的蒸馏水漂洗干净，染色。试剂的配制方法1.Na

2、OH0.7g+蒸馏水1000ml2.12SSC溶液微核率操作步骤培养72小时标本----收集离心1500/分钟（10分钟）----去上清----加预热的0.1MKCL（37度）----混匀，培养箱5分钟----预固定（1ML）室温5分钟----离心----去上清，固定（5ML）20分钟----离心，去上清，加适量的固定液、混均----制片。3ml的蒸馏水+3ml的Giemsa.McI1vaine’s储藏液、染色液、冲洗液的配置一．目的：McI1vaine’s储藏液是为玻片染色准备。McI1vaine’s冲洗液是为产前染色体检查准备。二．料和试剂1磷酸氢二钠（Na2HPO4.12H2O）

3、，分子量是3282柠檬酸（C6H8O7），分子量是210.143去离子超纯水4甲醇（CH3OH）三．操作步骤McI1vaine’s储藏液：1．A液：0.2M的磷酸氢二钠溶液(71.6g+1000ml水)B液：0.1M的柠檬酸溶液(21.014g+1000ml水)2．375ml的A液+125ml的B液3．用1N的盐酸或1M的氢养化钠调节PH到6.84．贴上有完整信息的标签（储存要求4度，六个月）McI1vaine’s染色缓冲液1．2730ml水+180mlMcI1vaine’s储藏液+30ml甲醇2．用1N的盐酸或1M的氢养化钠调节PH到6.83．贴上有完整信息的标签（储存要求4度，六个

4、月）McI1vaine’s冲洗缓冲液1．2820ml水+180mlMcI1vaine’s储藏液2．1N的盐酸或1M的氢养化钠调节PH到6.83．贴上有完整信息的标签（储存要求4度，六个月）染色液配制：24ml麦氏染色缓冲液+16ml水+14ml磊氏染色储存液（1.6mg/mL）磊氏染色储存液：0.8g(磊氏染色液Sigma)+500ml(甲醇)，磁力搅拌器搅拌2小时，置于37度的恒温箱72小时。pH值；Na2HPO4溶液（mL）；NaH2PO4溶液（mL）5.8；8.0；92.05.9；10.0；90.06.0；12.3；87.76.1；15.0；85.06.2；18.5；81.56.

5、3；22.5；77.56.4；26.5；73.56.5；31.5；68.56.6；37.5；62.56.7；43.5；56.56.8；49.0；51.06.9；55.0；45.07.0；61.0；39.07.1；67.0；33.07.2；72.0；28.07.3；77.0；23.07.4；81.0；19.07.5；84.0；16.07.6；87.0；13.07.7；89.5；10.57.8；91.5；8.57.9；93.5；7.58.0；94.7；5.3