茶树鸟氨酸转氨酶基因csδ-oat的克隆与表达分析

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1、园艺学报，（）：–2014411224652473http://www.ahs.ac.cnActaHorticulturaeSinicaE-mail:yuanyixuebao@126.com收稿日期：2014–07–11；修回日期：2014–09–25基金项目：国家自然科学基金项目（31370014，31000315）；国家现代农业产业技术体系建设专项资金项目（CARS-23）的茶树鸟氨酸转氨酶基因Csδ-OAT克隆与表达分析王伟东，疏再发，杜昱林，黎星辉，王玉花*（南京农业大学茶叶科学研究所，南京21009

2、5）摘要：根据已知鸟氨酸转氨酶（δ-OAT）的保守序列设计简并引物，并利用RT-PCR和RACE技术从‘迎霜’茶树中克隆获得鸟氨酸转氨酶基因，命名为Csδ-OAT，其GenBank登录号为KJ641844。该基因cDNA全长为1865bp，编码473个氨基酸，理论等电点为7.19，推测分子量为52.3kD。序列比对分析结果表明，Csδ-OAT主要功能域保守性较高，存在典型的PLP结合位点；系统进化树分析显示，Csδ-OAT的进化符合传统的生物学分类，与其他双子叶植物具有同一起源。qRT-PCR分析结果表明，C

3、sδ-OAT基因的表达存在明显的组织特异性，在花中表达最高，其次是叶片，而在其他组织器官中表达较低。此外，Csδ-OAT基因受高盐、低温、干旱、ABA和氧化胁迫处理的诱导，表明其参与了茶树体内各种非生物胁迫响应的过程。关键词：茶树；鸟氨酸转氨酶；Csδ-OAT；克隆；表达分析中图分类号：S571.1文献标志码：A文章编号：0513-353X（2014）12-2465-09CloningandExpressionAnalysisofOrnithine-δ-aminotransferaseGeneCsδ-OATi

4、nCamelliasinensisWANGWei-dong，SHUZai-fa，DUYu-lin，LIXing-hui，andWANGYu-hua*（TeaResearchInstitute，NanjingAgriculturalUniversity，Nanjing210095，China）Abstract：DegenerateprimersweredesignedaccordingtotheknownconservedregionsofOrnithine-δ-aminotransferasegene（δ-O

5、AT），andthecompletecDNAsequenceofδ-OATwasfirstlyclonedfromCamelliasinensisusingRT-PCRandRACEtechnologies.ThecDNAwastermedCsδ-OAT（GenBankaccessionKJ641844）anditsfull-lengthwas1865bpencodingaproteinof473aminoacids.ThemolecularweightofCsδ-OATwas52.3kDandtheoret

6、icalisoelectricpointwas7.19.TheBLASTresultsshowedthatthefunctionaldomainofCsδ-OATishighlyconservedwithatypicalPLPbindingsite.Phylogeneticanalysisofplantδ-OATrevealsthattheevolutionofCsδ-OATcorrespondswithtraditionalbiologicalclassification.QRT-PCRanalysisre

7、sultsshowedthattheexpressionofCsδ-OAThasobvioustissuespecificity，anditwashigherinflower，followedbyleaves，butlowerinothertissues.Moreover，wefoundthattheexpressionofCsδ-OATisinducedbydifferentabioticstresses，includinglow-temperature，highsalinity，ABA，droughtan

8、doxidativestresses，implyingthatCsδ-OATisinvolvedin*通信作者Authorforcorrespondence（E-mail：wangyuhua@njau.edu.cn）2466园艺学报41卷respondingtoabioticstressinplants.Keywords：teaplant；ornithine-δ-aminotransferase；C