cxcr4和vegf在人脑星形细胞瘤中的表达及其与血管生成的关系论文

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1、CXCR4和VEGF在人脑星形细胞瘤中的表达及其与血管生成的关系论文理国富张鹏远牛光明宋乐陶胜忠尹先印苏芳忠【摘要】目的观测人脑星形细胞瘤中趋化因子受体(CXCR4)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达水平并探讨其与临床病理分级和血管生成的关系。方法运用半定量RTPCR法检测43例星形细胞瘤和11例正常脑组织中CXCR4和VEGF的表达。结果CXCR4在正常脑组织、低恶度和高恶度组中的相对表达量分别为0.13±0.01、0.62±0.06和0.89±0.05，差异显著(P0.01);VEGF在各组中的表达量亦有显著差异(P0.01);CXCR4和VEGF的阳性表达率分别是

2、72.1%、67.4%，二者的表达呈正相关(r=0.453,P=0.002)。结论星形细胞瘤中CXCR4和VEGF表达异常，且随病理分级增加表达增强，提示二者协同参与肿瘤的增值和侵袭行为;CXCR4可能通过刺激VEGF的分泌参与肿瘤的新生血管生成。【关键词】星形细胞瘤，CXC族趋化因子受体4，血管内皮生长因子，血管生成.【Abstract】ObjectiveTodetecttheexpressionofCXCchemokinereceptor4(CXCR4)andvascularendothelialgroanastrocytoma.MethodsTheexpressi

3、onsofCXCR4andVEGFiquantitativereversetranscriptionpolymerasechainreaction(RTPCR)in43astrocytomaand11normalbraintissues.ResultsTherelativeexpressionsofCXCR4innormalbraintissues,gradeⅠⅡandⅢⅣ(P0.01).There(r=0.453,P=0.002).ConclusionTheexpressionsofCXCR4andVEGFinastrocytomaarehigh,andentof

4、histologicalgrade.Itsuggeststhattheymaytakepartintheproliferationandinvasionofastrocytoma.CXCR4probablytakespartinthegenerationofangiogenesisthroughincreasingthesecretionofVEGF.【Keya;CXCR4;VEGF;Angiogenesis血管生成是实体性肿瘤生长、增殖及转移的基础.freelRNA序列，应用Oligo5.0软件自行设计引物，由上海赛百盛生物技术有限公司合成，序列见表1。用Trizol(I

5、nviortegn公司)一步法提取组织中总RNA,测定纯度定量后按照北京全式金公司逆转录试剂盒说明书合成cDNA，PCR反应体系如下：cDNA2μl，Forer1μl，Reverseprimer1μl，10×easytaqbuffer5μl，2.5mMdNTP4μl，EasytaqDNAPolymerase0.5μl，最后加ddH2O至50μl。反应条件为94℃预变性5min，94℃变性30sec，退火温度见表1，时间为35sec，72℃延伸2min，35个循环，72℃延伸10min。取PCR产物5μl经2.0%琼脂糖凝胶电泳，紫外灯下观察并摄像。应用Bandscan5.0

6、计算条带的积分光密度IA,IA=平均吸光度×面积，目的片段的相对表达强度用目的片段(IA)/内参(IA)的比值来表示。1.3统计学处理采用SPSS11.0软件包处理数据，两样本率的比较采用四格表资料的χ2检验;计量资料采用t检验;相关性检验用Spearman相关分析。结果判定以P0.05作为检验水准。2结果2.1电泳βactin结果βactin在不同组别中均呈阳性表达(见图1)。图1βactin在各组标本中的表达注：M:Maker,N:正常脑组织1、2、3和4分别为星性细胞瘤Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ级表1引物序列、退火温度及产物大小2.2CXCR4在各组别中的表达CXCR4在正

7、常脑组织中的相对表达量为0.13±0.01，而在瘤组织中为0.73±0.15，差异显著(P0.01)。见图23;在Ⅰ～Ⅱ级和Ⅲ～Ⅳ级中的相对表达量分别为0.62±0.06、0.89±0.05，随组织学级别升高相对表达量明显增加，有统计学差异(t=16.19，P0.01)。见表2。图2CXCR4在Ⅰ、Ⅱ级和正常脑组织中部分标本中的表达注：M:Maker，1～2：Ⅱ级，3～4：Ⅰ级5～7：正常脑组织图3CXCR4在Ⅲ、Ⅳ级部分标本中的表达注：M:Maker，1～3：Ⅲ级，4～6：Ⅳ级2.3VEGF在各组中的表达VEG