sh关节腔内注射治疗兔膝关节炎的实验研究论文

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1、SH关节腔内注射治疗兔膝关节炎的实验研究论文【关键词】透明质酸钠摘要：［目的］探讨透明质酸钠（sodiumhyaluronate，SH）关节腔内注射治疗膝骨性关节炎（OA）的效果。［方法］24只兔子建立骨关节炎动物模型，随机分OA组、SH组、对照组，观察3组软骨、滑膜细胞病理切片及软骨MMP1免疫组化，进行软骨Mankins评分，以及检测血液和关节液的IL1含量的效果。［结果］SH组可见软骨破坏减轻，滑膜纤维增生减少，Mankins评分有明显改善（P＜005）；血、膝关节滑液IL1浓度降低（P＜005）.freelhyalu

2、ronateinjectionontreatmentofrabbitOsteoarthritis(OA)［Method］TalerabbitslydividedintoSHgroup,OAgroupandcontrolgroupafterestablishedthemodelofOA,SHgroup，andcontrolgroupeaetimerespectivelyThehistologicalexaminationsofcartilageandsynovia,immunohistochemistryofMMPlforca

3、rtilage,MankinsscaleedThelevelsofIL1oftheserumandsynovialfluidinedbyELISE［Result］IntheSHgroupshoandsynovialfluidmationofsynoviaandreducethesecretionofIL1insynovialfluidandserumSoitcanlightenthedegenerationofthecartilageandalleviatethepathologyofOA,butitcannotpreven

4、ttheprocessofOAKeyhyaluronate;Osteoarthritis;Synovitis;Interleukin1;Matrixmetalloproteinase1骨关节炎（osteoarthritis，OA）是中老年的最常见关节疾患之一，是导致人群功能残疾、造成经济损失和影响社会发展的主要疾病之一〔1〕。随着我国的老年化的发展，OA的患病率将更加增高，它成为骨科研究的热点之一。治疗OA的方法较多，其中关节腔注射透明质酸钠自1971年Peyron首次报道以来，至今国内外已在广泛应用，在临床上取得良好的效果

5、〔2~3〕。动物实验也表明SH是治疗OA的一种有效药物，但SH治疗OA的机理仍不清楚，本研究从SH对兔OA病理过程细胞因子的作用及对软骨损害的评估来进一步探讨SH治疗OA的实际疗效，为临床的应用提供一定参考。1材料与方法11主要材料、试剂111实验动物取雄性新西兰兔24只，体重25kg左右，6个月龄，清洁级SD（SpragueDal：20mg／支山东正大福瑞达制药有限公司；金属蛋白酶（matrixmetalloproteinases1，MMP1），购自美国默克公司。12实验分组与动物模型24只新西兰兔进行右后膝伸直位全长石膏

6、管型固定制成OA动物模型，所有兔均单笼饲养。模型制成后随机分为3个组（OA组、SH组、对照组），每组8只。13实验动物给药方法及标本处理131给药方法OA组在OA动物模型形成时处死，SH组于膝关节给予关节腔内注射SH04ml，对照组于膝关节给予关节腔内注射生理盐水04ml，每周1次连续4次，让其自由活动。SH组、对照组于最后1次注射后1周处死。132标本处理所有动物在处死前于耳缘静脉取2ml血液，静置后取上层血清，处死后取关节液02ml。血液及关节液-20℃冰箱保存，留待检测其中IL1β含量。并取膝关节股骨髁及部分滑车部位的

7、软骨和滑膜做光镜标本。滑膜行4％甲醛固定，再按常规脱水、浸蜡、包埋、切片、HE染色观察滑膜形态学变化。软骨标本采用4％多聚甲醛（pH74）固定72h，15％乙二胺四乙酸（EDTA）脱钙10周，石蜡包埋，HE染色观察软骨形态学变化；ABPAS染色观察多糖着色，按Mankins评分。14检测方法采用ELISA双抗夹心法标记所收集血清、血上清、关节滑液中的IL1β，使呈有色反应，酶标仪450nm处读取OD值，通过绘制标准曲线，计算出其中IL1β含量。软骨标本制作病理切片后，常规脱腊脱水处理，在湿盒中（武汉博士德生物制品公司）依次进

8、行下列反应：牛睾丸透明质酸酶处理40min，羊抗兔MMP1血清孵育18h，生物素化兔抗羊IgG孵育20min，二氨基联苯胺染色，苏木素复染。15统计分析各组数据采用平均数加减标准差表示，组间差异采用两样本均数的双侧t检验进行判断，P＞005为无显著差异，P＜005为显著差异，P＜001为差